Докум по группе крови / Инструкции / 2437

ПОДТВЕРЖДЕНИЕ ГРУППЫ КРОВИ А, В И РЕЗУС-ФАКТОРА

ОДНОВРЕМЕННО СО СКРИНИНГОМ АНТИТЕЛ

Используемые материалы:(только для диагностики “in vitro”)

1.ID-карты для подтверждения группы крови А, В ID-DiaClon Type + Screen

и Rh D и скрининга антител (по 1 карте на одно исследование)

(A-B-D-AHG-AHG-AHG)

2.ID-DiaCell I-II-III

3.ID-Раствор 2

4.Образец цельной крови или эритроцитарной массы (желательно поместить образцы крови в Citrata, EDTA, Heparin, CPD-A). Сыворотка или плазма реципиента (сыворотка должна быть как следует очищена с помощью центрифугирования, чтобы избежать попадания остатков фибрина, который может вступить в реакцию с образцом).

Техника выполнения исследования:

1. Выдержать ID-Раствор 2 до достижения им комнатной температуры.

2. Промаркировать соответствующую ID-карту, написав данные реципиента.

3. Приготовить 5% суспензию эритроцитов в ID-Растворе 2, для чего:

- отдозировать в чистую пробирку 0,5 мкл ID-Раствора 2;

- добавить 50 мкл цельной крови или 25 мкл эритроцитарной массы ;

- смешать.

4. Снять защитную фольгу с промаркированной ID-карты.

5. Добавить по 10-12,5 мкл приготовленной суспензии эритроцитов реципиента в

микропробирки ID-карты 1, 2, 3.

6. Добавить по 50 мкл стандартных эритроцитов панели ID-DiaCell I-II-III в микропробирки ID-карты 4, 5, 6.

7. Добавить по 25 мкл сыворотки или плазмы реципиента в микропробирки 4, 5, 6.

8. Инкубировать данную ID-карту 15 минут при температуре 37^оС.

9.Установить ID-карту(карты) в ротор ID-центрифуги (с обязательным

уравновешиванием другими ID-картами, возможно неиспользованными).

10.Центрифугировать ID-карты в ID-центрифуге (время и скорость центрифугирования

постоянны и заданы автоматически).

11.Оценить результат исследования:

Положительный: агглютинаты формируют четкую линию на поверхности геля или

расположены в толще геля.

Отрицательный: компактный осадок на дне микропробирки.

Реакция по группам крови АВО:

Анти-А	Анти-В	Группа крови
От + до ++++	Отрицательный	А
Отрицательный	От + до ++++	В
От + до ++++	От + до ++++	АВ
Отрицательный	Отрицательный	О

Определение слабых вариантов антигенов А и В (меньше ++++) требует дальнейших исследований.

Реакция по Rh D:

Rh D положительный	Rh D слабый	Rh D отрицательный
++++	От + до +++	Отрицательный

Сыворотка анти-D в карте DiaClon Type+Screen подобрана таким образом, чтобы не вступать в реакцию с D VI-вариантом.

Реакция скрининга антител:

Отрицательная реакция означает отсутствие иммунных антител в сыворотке или плазме пациента.

Положительная реакция означает наличие в исследуемом образце иммунных антител.

Специфичность антител может быть установлена с помощью сопроводительного листа – таблицы антигенных профилей, прилагаемой ко всем упаковкам ID-DiaCell. (При этом убедитесь в том, что номера и сроки годности панели ID-DiaCell и сопроводительного листа совпадают).

Если имеет место положительная реакция со всеми эритроцитами панели ID-DiaCell,

рекомендуется выполнять аутоконтроль для исключения аутоантител в исследуемом образце. Аутоконтроль выполняется следующим образом:

1. Приготовить 0,8% суспензию эритроцитов в ID-Растворе 2, для чего:

- отдозировать в чистую пробирку 1,0 мкл ID-Раствора 2;

- добавить 20 мкл цельной крови или 10 мкл эритроцитарной массы ;

- смешать.

2. Промаркировать пробирки ID-карты LISS/Coоmbs (1 пациент – 1 пробирка).

3. Снять защитную фольгу с промаркированных пробирок ID-карты.

3. Внести 50 мкл 0,8% приготовленной суспензии эритроцитов пациента.

5. Добавить 25 мкл плазмы или сыворотки пациента.

6. Инкубировать данную ID-карту 15 минут при температуре 37^оС.

7. Установить ID-карту(карты) в ротор ID-центрифуги (с обязательным

уравновешиванием другими ID-картами, возможно неиспользованными).

8.Центрифугировать ID-карты в ID-центрифуге (время и скорость центрифугирования

постоянны и заданы автоматически).

9.Оценить результат исследования:

• если аутоконтроль отрицательный, положительная реакция со стандартными эритроцитами может быть рассмотрена как действительная, и тогда необходимо провести дальнейшие исследования по идентификации антител.

• если аутоконтроль показывает идентичные всем эритроцитам панели DiaCell положительные реакции, предлагается рассматривать данную положительную реакцию как неспецифическую.

• если стандартные эритроциты из одного или нескольких флакончиков панели DiaCell показывают строго-положительную реакцию, а аутоконтроль слабоположительный, это сомнительная реакция, необходимо провести процедуру тестирования еще раз.

Примечание

ABD-подтверждение не может заменить полное определение группы крови и резус-фактора. ABD-подтверждение следует проводить только для ранее типированной крови (перекрестным методом). Определение группы крови считается действительным только при отрицательном контроле.

Результаты исследования сохраняются в неизмененном виде :

-Сорок восемь(48) часов при комнатной температуре.

-Три недели в холодильнике ( при +2-8^оС)при заклеенной липкой лентой верх-

ней части ID-карты.

-Нижнее поле ID-карты можно отклеить или отрезать и использовать, как до-

кумент в истории болезни или в картотеке.