ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИГЕНОВ ЭРИТРОЦИТОВ С ПРИМЕНЕНИЕМ ID-КАРТ,

СОДЕРЖАЩИХ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА.

Используемые материалы:

1. ID-карты: ABO/Rh A-B—AB-D-CDE-ctl

ABO/D A-B—AB-D-D_(VI-)-ctl

ABD confirmation A-B-D/A-B-D

Rh subgroups+ Kell C-c-E-e-K-ctl или C-Cw-c-E-e-K

Rh D + Phenotype C-c-D-E-e-ctl

Anti-D 6 x D

Anti-K(KEL1) 6 x K

Anti-k(KEL2) 6 x k

Anti-Cw 6 x Cw

Anti-A₁ 6 x A₁

2. ID-Раствор 1 для приготовления 5% рабочей суспензии эритроцитов.

3. Образец цельной крови или эритроцитарной массы.

Техника выполнения исследования:

1.Выдержать ID-Раствор 1 до достижения им комнатной температуры.

2.Промаркировать чистую пробирку.

3.Промаркировать соответствующую ID-карту.

4.Приготовить 5% суспензию исследуемых эритроцитов ID-Растворе 1, для чего:

• взять промаркированную пробирку

• отдозировать в нее 0,5 мл ID-Раствора 1

• добавить 50 мкл исследуемой цельной крови или 25 мкл эритроцитарной массы

• аккуратно смешать и инкубировать 10 минут при комнатной температуре

5.Снять защитную фольгу с промаркированной ID-карты.

6.Добавить в каждую микропробирку ID-карты по 12,5 мкл приготовленной суспен

зии эритроцитов.

7.Установить данную ID-карту(карты) в ротор ID-центрифуги (с обязательным

уравновешиванием другими ID-картами, возможно неиспользованными).

8.Центрифугировать ID-карту (время и скорость центрифугирования постоянны и

заданы автоматически).

9.Оценить результат исследования:

-Результат в контрольной микропробирке –“ctl” должен быть всегда отрица-

тельным. Положительная реакция в «контроле» может быть вызвана присутстви

ем аутоантител и неспецифическими плазменными белками. Если «контроль» по

ложителен – определение недостоверно, его необходимо повторить после одно-

кратного отмывания образца эритроцитов 0,9% раствором NaCl или ID-Раство-

ром 2.

-Результаты определения каждого антигена внести в соответствующую графу ID-

карты(на белом поле внизу под каждым антигеном).

-Идентифицировать результат по схеме:

Определение антигенов эритроцитов системы АВО

Группа крови (АВО)	Результаты исследования с соответствующими антисыворотками
	Анти-А	Анти-В	Анти-АВ
O(I)	-	-	-
A1(II)	++++	-	++++
A2(II)	от +++ до ++++	-	от +++ до ++++
A3(II)	от ++ до +++	-	от ++ до +++
Ах(II)*	от + до ++	-	от + до ++
В(III)	-	++++	++++
B3(III)	-	от + до +++	от + до +++
Bх(III)*	-	от + до ++	от + до ++
A1B(IV)	++++	++++	++++
A2B(IV)	от +++ до ++++	++++	++++
A3B(IV)	от ++ до +++	++++	++++
AхB(IV)*	от + до ++	++++	++++

* - определение очень слабых вариантов антигенов А и В требует

дальнейших исследований.

Определение Резус-принадлежности(D,CDE):

Резус-принадлежность	Результаты исследования с соответствующими антисыворотками
	Анти-D	Анти-CDE
D-отрицательная	-	-
D-отрицательная, С.Е-положительная*	-	от +++ до ++++
D-положительная	++++	++++
D-cлабоположительная(Du)	от + до +++	от +++ до ++++

*-Положительная реакция с сывороткой Анти-СDЕ при отрицательной реакции с сывороткой Анти-D свидетельствует о наличии антигенов С,Е и требует дальнейшего типирования с использованием ID-карт:

С-с-Е-е-К-ctl или C-Cw-c-E-e-K.

-Определение Резус и Келл принадлежности:

В случае присутствия соответствующих антигенов результат реакции от +++ до ++++. Слабоположительные результаты реакции ( от + до ++) с моноклональными антителами, но сильноположительная реакция (++++) с человеческими антителами показывает присутствие вариантных антигенов эритроцитов.

В случае отсутствия соответствующих антигенов результат будет отрицательным.

-Внести результаты исследования на белое поле ID-карты.

-Поставить дату и подпись определяющего лица.

Результаты исследования сохраняются в неизмененном виде:

-Сорок восемь(48) часов при комнатной температуре.

-Три недели в холодильнике ( при +2-8^оС)при заклеенной липкой лентой верх-

ней части ID-карты.

-Нижнее поле ID-карты можно отклеить или отрезать и использовать, как до-

кумент в истории болезни или в картотеке.