DiaMed

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИГЕНОВ ЭРИТРОЦИТОВ С ПРИМЕНЕНИЕМ ID-КАРТ, СОДЕРЖАЩИХ МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА.

Используемые материалы:

1. ID-карты:

DiaClon ABO/Rh A-B—AB-D_(VI-)-CDE-ctl или A-B—AB-D_(VI+)-CDE-ctl

* DiaClon ABO/D A-B—AB-D_(VI+)-D_(VI-)-ctl

DiaClon ABD confirmation A-B-D_(VI-)/A-B-D_(VI-) или A-B-D_(VI+)/A-B-D_(VI+)

DiaClon Rh subgroups+ Kell C-c-E-e-K-ctl

DiaClon Rh subgroups с-Е/с-Е/с-Е

DiaClon Anti-D^VIpos 6 x D_(VI+)

DiaClon Anti-D^VIneg 6 x D_(VI-)

DiaClon Anti-K(KEL1) 6 x K

2. ID-Раствор 2 для приготовления 5% рабочей суспензии эритроцитов.

3. Образец исследуемой цельной крови или эритроцитарной массы.

Техника выполнения исследования:

1.Выдержать ID-Раствор 2 до достижения им комнатной температуры.

2.Промаркировать чистую пробирку.

3.Промаркировать соответствующую ID-карту.

4.Приготовить 5% суспензию исследуемых эритроцитов ID-Растворе 2, для чего:

• взять промаркированную пробирку

• дозировать в нее 0,5 мл ID-Раствора 2

• добавить 50 мкл исследуемой цельной крови или 25 мкл эритроцитарной массы

• аккуратно смешать и инкубировать 10 минут при комнатной температуре

• использовать не позднее 15 минут после инкубации!

4*.Приготовить 5% суспензию исследуемых эритроцитов ID-Растворе 1, для чего:

• взять промаркированную пробирку

• дозировать в нее 0,5 мл ID-Раствора 1

• добавить 50 мкл исследуемой цельной крови или 25 мкл эритроцитарной массы

• аккуратно смешать и инкубировать 10 минут при комнатной температуре

• использовать не позднее 15 минут после инкубации!

5.Снять защитную фольгу с промаркированной ID-карты.

6.Добавить в каждую микропробирку ID-карты по 12,5 мкл приготовленной суспензии эритроцитов.

7.Установить данную ID-карту (карты) в ротор ID-центрифуги (с обязательным уравновешиванием другими ID-картами, возможно неиспользованными).

8.Центрифугировать ID-карту (время и скорость центрифугирования постоянны и заданы автоматически).

9.Оценить результат исследования:

Результат в контрольной микропробирке –“ctl” должен быть всегда отрицательным.

Положительная реакция в «контроле» может быть вызвана присутствием аутоантител и неспецифическими плазменными белками.

Если «контроль» положителен – определение недостоверно, его необходимо повторить после однократного отмывания образца эритроцитов 0,9% раствором NaCl или ID-Раство-

ром 2.

Результаты определения каждого антигена внести в соответствующую графу ID-карты(на белом поле внизу под каждым антигеном).

Идентифицировать результат по схеме:

Определение антигенов эритроцитов системы АВО

Группа крови (АВО)	Результаты исследования с соответствующими антисыворотками
	Анти-А	Анти-В	Анти-АВ
O(I)	-	-	-
A1(II)	++++	-	++++
A2(II)	от +++ до ++++	-	от +++ до ++++
A3(II)	от ++ до +++	-	от ++ до +++
Ах(II)*	от + до ++	-	от + до ++
В(III)	-	++++	++++
B3(III)	-	от + до +++	от + до +++
Bх(III)*	-	от + до ++	от + до ++
A1B(IV)	++++	++++	++++
A2B(IV)	от +++ до ++++	++++	++++
A3B(IV)	от ++ до +++	++++	++++
AхB(IV)*	от + до ++	++++	++++

* - определение очень слабых вариантов антигенов А и В требует дальнейших исследований.

Определение Резус-принадлежности(D,CDE):

Резус-принадлежность	Результаты исследования с соответствующими антисыворотками
	Анти-D	Анти-CDE
D-отрицательная	-	-
D-отрицательная, С.Е-положительная*	-	от +++ до ++++
D-положительная	++++	++++
D-cлабоположительная(Du)**	от + до +++	от +++ до ++++

*-Положительная реакция с сывороткой Анти-СDЕ при отрицательной реакции с сывороткой Анти-D свидетельствует о наличии антигенов С, Е и требует дальнейшего типирования с использованием ID-карт:

С-с-Е-е-К-ctl или C-Cw-c-E-e-K.

**-Слабый D^u антиген может давать отрицательную реакцию, поэтому все

D-отрицательные образцы должны быть перепроверены с использованием

ID-карт с сыворотками крови человека (анти-D) и ID-Раствора 1.

-Определение Резус и Келл принадлежности:

В случае присутствия соответствующих антигенов результат реакции от +++ до ++++. Слабоположительные результаты реакции (от + до ++) с моноклональными антителами, но сильноположительная реакция (++++) с человеческими антителами показывает присутствие вариантных антигенов эритроцитов.

В случае отсутствия соответствующих антигенов результат будет отрицательным.

- Внести результаты исследования на белое поле ID-карты.

- Поставить дату и подпись определяющего лица.

Результаты исследования сохраняются в неизмененном виде:

- Сорок восемь(48) часов при комнатной температуре.

- Три недели в холодильнике ( при +2-8^оС)при заклеенной липкой лентой верхней части ID-карты.

- Нижнее поле ID-карты можно отклеить или отрезать и использовать, как документ в истории болезни или в картотеке.