3.2. Реакция конглютинации с желатином

В агглютинационную пробирку вносят одну каплю (0,05-0,1 мл) свободных эритроцитов из сгустка свернувшейся крови или эритроцитов, отмытых от консерванта. Затем добавляют две капли (0,1-0,2 мл) 10% раствора желатина, предварительно прогретого при 45-50 град. С до разжижения, и одну каплю Цоликлона анти-D. Суспензию тщательно перемешивают, инкубируют 10-15 минут в водяной бане или 30 минут в термостате при 48 град. С, прибавляют 5-6 мл физиологического раствора и после осторожного переворачивания пробирки визуально определяют наличие агглютинатов. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о присутствии в них D антигена.

3.3. Реакция с препаратом на основе полиглюкина

Полиглюкин практически всегда вызывает неспецифическую агглютинацию D-отрицательных эритроцитов, поэтому невозможно объективное заключение об отсутствии D антигена или о наличии его слабого варианта в исследуемых эритроцитах. В связи с этим использование полиглюкина для моноклональных антител не рекомендуется.

3.4. Реакция агглютинации с эритроцитами, обработанными

протеолитическими ферментами

Цоликлон анти-D, содержащий моноклональные антитела класса IgG, способен вызывать прямую агглютинацию D-положительных эритроцитов, обработанных такими протеолитическими ферментами как бромелин, папаин и др., и поэтому может применяться в автоматических системах типирования крови.

3.5. Контроль специфичности реакции агглютинации

Для контроля специфичности при каждом исследовании (независимо от применяемой методики исследования) необходимо использовать стандартные D-положительные и D-отрицательные эритроциты. Желательно также включение образцов со слабовыраженным D антигеном.

4. Форма выпуска

Цоликлон анти-D выпускается в жидкой форме во флаконах объемом 5 или 10 мл (1 мл содержит 10 доз). В качестве консерванта применяется азид натрия в конечной концентрации 0,1%.

Срок хранения - два года в холодильнике при 2-8 град. С. Вскрытый флакон можно хранить в холодильнике в течение одного месяца в закрытом виде.

5. Рекламация

Основаниями для рекламации являются: отсутствие активности, неспецифичность, нарушение целостности флаконов, получение реагента с истекшим сроком годности или недостаточными сведениями.

При составлении рекламации необходимо указать дату получения, номер серии, причины, по которым реагент признан негодным, протокол с результатами проверки реагента. Вместе с рекламацией направляют 2-3 невскрытых флакона данной серии.

Рекламацию следует направить на предприятие-изготовитель.

"Инструкцию по применению Цоликлона анти-D диагностического жидкого для определения D антигена системы резус (Антитела моноклональные анти-D)", утвержденную Главным техническим Управлением Минздрава СССР 21 августа 1990 года, считать утратившей силу с момента утверждения данной инструкции.

Начальник Управления

организации медицинской

помощи населению

Минздрава РФ

А.И.ВЯЛКОВ

Приложение N 10

УТВЕРЖДЕНО

Приказ Минздрава России

от 09.01.1998 г. N 2

ИНСТРУКЦИЯ<*>

По применению анти-d IgM моноклонального реагента для определения резус-принадлежности крови человека (цоликлон анти-d супер)

ТУ 9398-206-27575295-94