Клиндиагностика. Исследование кала и кишечника-2

После остывания в препарате определяют отдельные виды жи­ровых элементов. Капли, не изменившие свою форму после осты­вания (округлые, «лужицы» с гладкими краями оранжево-красно­го цвета), относят к нейтральным жирам.

Жирные кислоты обнаруживают в форме тонкоигольчатых крис­таллов, заостренных с обоих концов, группирующихся часто в пучки по 2...4. Они могут располагаться радиально, образуя вен­чик, и окружать капли жира.

Мыла представляют собой маленькие вытянутые ромбовидные кристаллы и глыбки желто-коричневого цвета, неокрашивающие­ся Суданом III без нагревания препарата.

Чтобы достаточно точно дифференцировать жиры, препараты окрашивают реактивом Гехта. В этом случае нейтральный жир и жирные кислоты приобретают коричнево-красный, а мыла — зе­леный цвет.

В первые 10 дней жизни у здоровых телят в нагретом препара­те кала (с реактивом Саатгофа) жировые элементы представлены единичными жировыми каплями (до 10 в поле зрения), нейтраль­ный жир отсутствует или его содержание невелико, жирные кис­лоты и мыла обнаруживают в небольшим или среднем количестве, (А. М. Смирнов, И. В. Никишина).

У здоровых поросят до 10-дневного возраста в нагретом пре­парате (с реактивом Саатгофа) жировые элементы встречаются по 1...4 капли не в каждом поле зрения микроскопа, нейтраль­ный жир отсутствует или содержится в небольшом количестве {В. П.Лаукин).

У телят и поросят более старшего возраста кал содержит мень­ше жировых элементов, а при диспепсии и гастроэнтероколите и особенно при тяжелом течении указанных болезней количество жировых элементов в кале значительно возрастает и сопровожда­ется увеличением содержания нейтрального жира, жирных кислот и мылов;

слизь, клетки крови, эпителиальные клетки и другие элементы, отделяемые кишечной стенкой, выявляют и оценивают при ,микроскопии. Клетки при этом легче обнаружить в слизи. Послед­нюю промывают в изотоническом растворе хлорида натрия и готовят из нее препараты. Микроскопически слизь представляет собой гомогенную массу или тяжи, где и располагаются клетки (эпителиальные, крови и др.).

Большое количество слизи в кале указывает на воспалительный процесс в слизистой оболочке кишечника. Характерным призна­ком воспаления служит также наличие большого количества клеток кишечного эпителия.

В кале здоровых животных можно обнаружить единичные лейкоциты; при воспалительных процессах кишечника их содержание в слизи резко увеличивается. Эритроциты в норме не встречаются , их появление свидетельствует о воспалительном процессе, язвах и кровотечении в кишечнике. Клетки ткани или же тканевые обрывки выявляют при хронической инвагинации кишечника дифтеретическом и крупозном воспалении кишечной стенки и других патологиях.

При усилении гнилостных процессов в кишечнике встречаются кристаллы триппельфосфатов. напоминающие по форме крышки гроба; при пониженной кислотности желудочного сока— кристаллы оксалата кальция в форме почтовых конвертов. В виде ромбовидных и игольчатых структур или зерен оранжевого цвета билирубин обнаруживают у взрослых животных при быстром про­хождении химуса и фекалий по кишечнику, а также в норме в ме-конии молодняка в первые дни жизни. Ромбовидные или игольча­тые красновато-коричневые кристаллы гематоидина выявляют в кале после кровотечений.

Химическое исследование. Устанавливают реакцию кала (рН). выявляют в нем «скрытую» кровь, желчные пигменты, белковых экссудацию, определяют активность энтерокиназы и щелочной фосфатазы.

рН кала определяют с помощью рН-метра, универсальной индикаторной и лакмусовой бумаги (красной и синей).

При использовании рН-метра кал предварительно разво­дят дистиллированной водой нейтральной реакции (в соотно­шении 1 ; 10).

Реакцию кала с помощью универса.11ьной индикаторной бумаги определяют по цветной шкале, на которой нанесены цифровые обозначения рН.

Полоски лакмусовой бумаги предварительно смачивают дис­тиллированной водой нейтральной реакции и затем прикладыва­ют к калу; синяя бумажка краснеет при кислой реакции, а красная синеет при щелочной, при нейтральной реакции обе бумажки не меняют цвет.

Реакция кала обусловлена жизнедеятельностью кишечной мик­рофлоры. У травоядных животных в норме кал имеет нейтральную или слабокислую реакцию, а у плотоядных — нейтральную или слабощелочную. Изменение рН связано с изменением соотноше­ния между бродильными и гнилостными процессами в кишечни­ке; если преобладают бродильные процессы (активизируется бро­дильная, или йодофильная микрофлора, которая выделяет угле­кислоту и органические кислоты), реакция становится кислой. Активизация гнилостной микрофлоры обусловливает щелочную реакцию кала за счет повышенного образования аммиака. Соот­ношение бродильных и гнилостных процессов в кишечнике более точно определяют по методике Гуаффона и Ру; выявляют в кале органические кислоты и аммиак (методика описана в руковод­ствах по клиническим лабораторным исследованиям).

Кровь и билирубин в кале очень важно выявить химическими методами при подозрении на наличие «скрытой» крови, которую не удается обнаружить при макроскопическом и микроскопическом исследовании. Используют приведенные да­лее пробы.

Бензидиновая проба заключается в следующем: на предметное стекло наносят кал толстым слоем, добавляют 2...3 капли свеже­го раствора бензидина в уксусной кислоте (бензидин берут на кончике ножа и растворяют в 5 мл ледяной уксусной кислоты) и 2...3 капли 3%-го раствора пероксида водорода, перемешивают стеклянной палочкой. При наличии в кале крови появляется сине-зе­леное окрашивание в течение первых 2 мин. Окрашивание, по­явившееся позже, не учитывают. Чувствительность пробы доста­точно высокая: выявляют содержание 0,2 % крови.

Проба на стеркобилин с ацетатом цинка (по Шлезингеру); комочек кала растирают в дистиллированной воде (соотноше­ние 1 : 10) и добавляют равное количество реактива Шлезингера (10 г ацетата цинка, растворенного в 90 мл 96%-го этилового спир­та) и несколько капель раствора Люголя. Полученную смесь фильтруют и фильтрат просматривают на черном фоне: пробу считают положительной, если заметна зеленая флюоресценция.

Проба на билирубин (по Фуше): комочек кала растирают в дистиллированной воде (соотношение 1 : 20) и вносят по каплям реактив Фуше (в 100 мл дистиллированной воды растворяют 25 г трихлор-уксусной кислоты и добавляют 10 мл 10%-го раствора хлорида железа 3 или полуторахлорного железа) в равном к полученной эмульсии количестве. Пробу считают положительной, если появляется зеленое или синее окрашивание. Билирубин в кале выявляют при эн­теритах и дисбактериозах (после применения антибиотиков).

Реакция на белковую экссудацию: Зг кала растирают в ступке с 100 мл дистиллированной воды. Полученную эмульсию разливают по 15 мл в 3 пробирки. В первую пробирку вносят 2 мл раствора сулемы (7 г сулемы растворяют в 100 мл дистилированной воды при нагревании, соблюдая правила техники безопасности, так как сулема ядовита!) или 20%-го раствора три-хлоруксусной кислоты, во вторую пробирку — 2 мл 20%-го раство-1К1 уксусной кислоты, в третью, контрольную — 2 мл дистиллированной воды. Пробирки встряхивают и оставляют при комнатной температуре на 24 ч. По истечении этого времени учитывают степень. просветления жидкости над осадком: полное просветление (+++++) — реакция резко положительная; значительное просвет­ление (+++) — реакция положительная; незначительное просветление (+) —реакция слабоположительная, если не произошло просветление и жидкость над осадком такая же мутная, как над контролем (-) — реакция отрицательная.

Просветление в первой пробирке свидетельствует о наличии сывороточного (растворимого) белка, т. е. на воспалительный про­цесс в слизистой оболочке кишечника.

По реакции с раствором сулемы можно судить о наличии стеркобилина и билирубина: при содержании стеркобилина появится розовое окрашивание, билирубина — зеленое. В пробирке с трихлор-уксусной кислотой билирубин также дает зеленое окрашивание. Содержание стеркобилина (билирубина), в кале оценивают в баллах минимальный бал (+) ставят, когда единичные частицы кала окрашены в зеленый (розовый) цвет, максимальный (+++++) — когда весь кал зеленого (кирпично-красного) цвета. Отсутствие окрашивания обозначают знаком минус (—).

Активность энтерокиназы и щелочной фос­фатазы определяют по методике, разработанной Шлыгиным, Фоминой и Михлиным. Изменения ферментативной активности могут служить признаком патологии двенадцатиперстной кишки, печени и желчного пузыря.

Бактериологическое исследование. Бактериологическим методом можно определить лишь процентное соотношение грамположительной и грамотрицательной микрофлоры. С этой целью мазки кала красят по Граму и исследуют под микроскопом.

У здоровых телят и поросят раннего возраста грамположительная микрофлора составляет 60...90 %, грамотрицательная — 40...10%. При диспепсии количество грамотрицательной микро­флоры резко увеличивается: при простой до 50...80 %, при токси­ческой до 80.-.90 %, а грамположительной микрофлоры соответ­ственно уменьшается.

В мазках кала, окрашенных раствором Люголя, йодофилькая микрофлора приобретает синий, фиолетовый или черный цвет, дрожжевые грибы — желтый или желто-коричневый. Большое ко­личество йодофильной микрофлоры обнаруживают при усиле­нии бродильных процессов в кишечнике и недостаточном усвое­нии углеводов; много дрожжевых клеток — при кандидомикозе и дисбактериозе. .