Спектр применения:
Спектр применения метода достаточно широкий, поскольку без затруднений позволяет определить уровень содержания гормонов в миллионных частях миллионной части грамма.
Ученые, открывшие радиоиммунный анализ, с его помощью изучали клиренс инсулина у больных диабетом, поэтому первоначально его применяли для измерения концентрации инсулина в плазме крови. Однако чем больше последующие поколения ученых изучали РИА, тем он становился популярнее и востребованнее. И сегодня его используют для измерения концентрации самых разных гормонов: гормоны поджелудочной железы, желудочно-кишечного тракта, гипофиза, щитовидной железы, а также для измерения негормональных веществ: ферментов, опухолевых антигенов, белков сыворотки крови и др. Так, при помощи радиоиммунного анализа диагностируют самые различные заболевания.
Иммунодиффузный метод исследования.
Иммунодиффузия - наиболее распространенный из всех методов, основанных на реакции преципитации.
1)Простая радиальная иммунодиффузия .
Суть метода заключается в следующем:
-в тонком слое геля, содержащего антитела в известной концентрации, вырезают лунки;
-антиген, помещенный в эти лунки, диффундирует в гель;
-вокруг лунок образуются кольца преципитации, диаметр которых пропорционален концентрации антигена.
Метод обычно применяется для определения концентрации иммуноглобулинов.
2) Двойная радиальная иммунодиффузия.
Суть метода заключается в следующем:
- в тонком слое геля вырезают лунки для антигена и антител; -антиген и антитела диффундируют навстречу друг другу, образуя линии преципитации на некотором расстоянии от лунок.
По расстоянию от лунки с антигеном до линии преципитации можно определить концентрацию антигена.
Иммуноэлектрофорез.
Иммуноэлектрофорез представляет собой сочетание двух методов - иммунодиффузии и зонального электрофореза.
Суть метода заключается в следующем:
-в лунку, вырезанную в тонком слое геля, помещают исследуемую сыворотку;
-проводят электрофоретическое разделение белков сыворотки;
-в геле вырезают бороздку, параллельную направлению миграции белков при электрофорезе, и заполняют ее смесью антител к сывороточным белкам;
-разделенные при электрофорезе белки (антигены) и антитела диффундируют навстречу друг другу. В местах связывания антител с антигенами образуются дуги преципитации.
Иммуноэлектрофорез применяется в основном для исследования сывороточных белков
