2. Полимеразная цепная реакция (пцр) -

Применяется для диагностики вирусных и бактериальных инфекций. ПЦР позволяет обнаружить микроб в исследуемом материале (воде, продуктах, материале от больного) по наличию в нем ДНК микроба без выделения последнего в чистую культуру.

Для проведения реакции из исследуемого материала выделяют ДНК, в которой определяют наличие специфичного для данного микроба гена. Обнаружение гена осуществляют его накоплением. Для этого необходимо иметь праймеры комплементарного З'-концам ДНК исходного гена. Накопление (амплификация) гена: Выделенную из исследуемого материала ДНК нагревают. ДНК распадается на 2 нити; Добавляют праймеры; Смесь ДНК и праймеров охлаждают. Праймеры, при наличии в смеси ДНК искомого гена, связываются с его комплементарными участками; К смеси ДНК и праймера добавляют ДНК-полимеразу и нуклеотиды; Устанавливают t, оптимальную для функционирования ДНК-полимеразы. В этих условиях, в случае комплементарное ДНК гена и праймера, происходит присоединение нуклеотидов к З'-концам праймеров, в результате чего синтезируются две копии гена. После этого цикл повторяется снова, при этом количество ДНК гена будет увеличиваться каждый раз вдвое. Проводят реакцию в специальных приборах - амплификаторах.

3. Боррелиоз.

Спирохеты рода Borrelia вызывают антропонозные (возвратный тиф), зоонозные (болезни Лайма) инфекционные болезни с трансмиссивным механизмом передачи возбудителей (клещи, вши).

Морфология: Тонкие спирохеты с крупными завитками. Двигательный аппарат представлен фибриллами. Хорошо воспринимают анилиновые красители, по Романовскому-Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Обладают генетическим аппаратом, состоящим из небольших размеров линейной хромосомы и набора циркулярных и линейных плазмид.

Культуральные свойства: Культивируются на сложных питательных средах, содержащих сыворотку, тканевые экстракты, и в куриных эмбрионах. Чувствительны к высыханию и нагреванию. Устойчивы к низким t.

Болезнь Лайма - возбудитель В.burgdorferi. Хроническая инфекция с поражением кожи, сердечной и нервной систем, суставов.

АГ структура: Сложная. Белковые АГ фибриллярного аппарата и цитоплазматического цилиндра, АТ к которым появляются на ранних этапах инфекции. Протективную активность имеют АГ, представленные липидмодифицированными интегральными белками наружной мембраны А, В, С, D, E, F.

Факторы патогенности: Липидмодифицированные белки наружной мембраны обеспечивают способность боррелий прикрепляться и проникать в клетки хозяина. В результате взаимодействия боррелий с макрофагами происходит выделение ИЛ-1, который индуцирует воспалительный процесс.

Патогенез: На месте укуса клеща образуется красная папула. Возбудитель распространяется из места укуса через окружающую кожу с последующей диссеминацией с током крови к различным органам, особенно к сердцу, ЦНС, суставам. Клиника:

1. Мигрирующая эритема, сопровождающаяся развитием гриппоподобного симптомокомплекса;

2 .Развитие доброкачественных поражений сердца и ЦНС;

3. Развитие артритов крупных суставов.

Иммунитет: Гуморальный, видоспецифический к АГ клеточной стенки.

Микробиологическая диагностика. Используются бактериоскопический, серологический методы, ПЦР в зависимости от стадии заболевания. Материал - биоптаты кожи, синовиальная жидкость суставов, ликвор, сыворотка крови. На 1 стадии проводится бактериологическое исследование биоптатов кожи из эритемы.

Начиная со 2 стадии заболевания осуществляется серологическое исследование определением IgM или нарастания титра IgG ИФА или РИФ.

ПЦР используется для определения наличия боррелий в ликворе, суставной жидкости.

Лечение: Антибиотики тетрациклинового ряда.

Профилактика: Неспецифическая.

Возвратный тиф - возбудитель В.recurrentis. Острое инфекционное заболевание, характеризующееся острым началом, приступообразной лихорадкой, общей интоксикацией.

Эпидемический возвратный тиф - антропоноз. Специфические переносчики - платяная, головная вши. Заражение при втирании гемолимфы раздавленных вшей в кожу при расчесывании места укуса.

Эндемический возвратный тиф - зооноз. Возбудители - В.duttoni и В.persica. Резервуар - грызуны, клещи. Заражение через укусы клещей.

Патогенез: Попав во внутреннюю среду организма, боррелии внедряются в клетки лимфоидно-макрофагальной системы, где размножаются и поступают в кровь, вызывая лихорадку, головную боль, озноб. Взаимодействуя с АТ, образуют агрегаты, которые нагружаются тромбоцитами, вызывая закупорку капилляров, следствием чего является нарушение кровообращения в органах.

Иммунитет: К эпидемическому возвратному тифу гуморальный, непродолжительный.

Микробиологическая диагностика. Бактериоскопический метод - обнаружение возбудителя в крови, окрашенной по Романовскому-Гимзе. Биопробу ставят для дифференциации В.recurrentis от возбудителей эндемического возвратного тифа. Вспомогательный метод - серологический метод с постановкой РСК.

Лечение: Антибиотики тетрациклинового ряда, левомицетин, ампициллин.

Профилактика: Неспецифическая.

-

-

Б36