1. Методы микроскопии.

Люминесцентная (флюоресцентная). Основана на явлении фотолюминесценции. Люминесценция - свечение веществ, возникающее после воздействия на них каких-либо источников энергии: световых, электронных лучей, ионизирующего излучения. Фотолюминесценция - люминесценция объекта под влиянием света. Если освещать люминесцирующий объект синим светом, то он испускает лучи красного, оранжевого, желтого или зеленого цвета. В результате возникает цветное изображение объекта.

Темнопольная. Основана на явлении дифракции света при сильном боковом освещении взвешенных в жидкости мельчайших частиц (эффект Тиндаля). Эффект достигается с помощью параболоид- или кардиоидконденсора, которые заменяют обычный конденсор в биологическом микроскопе .

Фазово-контрастная. Дает возможность увидеть прозрачные объекты. Они приобретают высокую контрастность изображения, которая может быть позитивной или негативной. Позитивное - темное изображение объекта в светлом поле зрения, негативное - светлое изображение объекта на темном фоне.

Используют обычный микроскоп и дополнительное фазово-контрастное устройство, а также специальные осветители.

Электронная. Позволяет наблюдать объекты, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности светового микроскопа (0,2 мкм). Применяется для изучения вирусов, тонкого строения различных микроорганизмов, макромолекулярных структур и других субмикроскопических объектов.

2. Реакция нейтрализации вирусов.

РН основана на способности специфических вируснейтрализующих АТ блокировать инфекционные, гемагглютинирующие, гемадсорбирующие, цитопатические, бляшкообразующие свойства вирусов.

Применяется для: Идентификации вирусов; Серодиагностики вирусных инфекций, т.е. для определения нарастания титра вируснейтрализующих АТ в парных сыворотках. Компоненты: 1. Исследуемый вирус (при идентификации выделенного вируса) или исследуемая сыворотка (при серодиагностике инфекции). 2. Диагностическая (группе-, видо-, типоспецифическая) сыворотка (при идентификации вируса) или известный вирус - диагностикум (при серодиагностике). 3. Индикаторный объект: животные, куриные эмбрионы, культуры тканей или эритроциты.

РН ставят в культурах клеток, куриных эмбрионах и на лабораторных животных.

Принцип. Смесью вирус (исследуемый или известный) + сыворотка (диагностическая или исследуемая), выдержанной в течение определенного времени, заражают культуру клеток, куриный эмбрион или лабораторное животное. При (+) реакции, т.е. при нейтрализации вируса АТ индикаторные объекты продолжают нормально существовать, а в контроле - гибель или характерные изменения.

РН - реакция торможения гемагглютинации (РТГА).

РТГА применяется для: Серотипирования вирусов; Серодиагностики инфекций. Выделяют два способа постановки: Капельный способ на стекле (ориентировочная реакция), применяется для серо копирования вирусов; Развернутый в пробирках.

Механизм. У некоторых вирусов (грипп) есть гемагглютинин, вызывающий агглютинацию эритроцитов различных животных, в зависимости от вида вируса. При наличии в сыворотке АТ - антигемагглютининов наблюдаются ингибирования активности вирусов. РТГА. Цель: серотипирование вируса гриппа А

Компоненты: 1. Материал - аллантоисная жидкость куриного эмбриона 2. Диагностические противогриппозные типоспецифические сыворотки 3. 5 % взвесь куриных эритроцитов 4. Физиологический раствор

Реакция ставится на стекле капельным способом. На стекло наносят по 1 капле диагностических сывороток и исследуемого материала, перемешивают, затем добавляют 1 каплю взвеси эритроцитов. При (+) реакции наблюдается гомогенное покраснение, а при отрицательной выпадение хлопьев красного цвета (гемагглютинация).