1. Химиотерапия.

Специфическое антимикробное, антипаразитарное лечение при помощи хим веществ. Свойства этих веществ - избирательность действия против болезнетворных микроорганизмов в условиях макроорганизма.

Основоположник химиотерапии - Эрлих, установил, что хим вещества, содержащие мышьяк, губительно действуют на спирохеты и трипаносомы, и получил первый химиотерапевтический препарат - сальварсан (соединение мышьяка, убивающее возбудителя, но безвредное для микроорганизма).

Домагк обнаружил среди анилиновых красителей вещество - пронтозил, спасавший экспериментальных животных от стрептококковой инфекции, но не действующий на эти бактерии вне организма. В организме происходит распад пронтозила с образованием сульфаниламида, обладающего антибактериальной активностью.

Вудс установил, что сульфаниламиды являются структурными аналогами парааминобензойной кислоты (ПАБК), участвующей в биосинтезе фолиевой кислоты, необходимой для жизнедеятельности бактерий. Бактерии, используя сульфаниламид вместо ПАБК, погибают.

Противовирусные препараты.

Вирулоцидные препараты, действующие на внеклеточные вирионы: Оксолин действующий на риновирусы, герпесвирусы, миксовирусы; тетрофеин действующий на аденовирусы, герпесвирусы.

Препараты, блокирующие адсорбцию вируса на рецепторах клетки хозяина: На этой стадии используют фальшивые рецепторы - структурные аналоги вирусных рецепторов, которые адсорбируясь на рецепторах (лигандах) клеток, препятствуют адсорбции вируса. Аналог рецептору CD4, на котором адсорбируется ВИЧ.

Препараты, нарушающие процесс раздевания вирусов: Ремантадин, активный против вируса гриппа А.

Препараты, ингибирующие стадию сборки вирионов: Производные тиосемикарбазона. Метисазон (марборан) ингибитор вируса оспы.

Препараты - ингибиторы репликации - аналоги азотистых оснований, которые, встраиваясь в молекулу ДНК или РНК, блокируют работу полимераз: Видарабин - действует на ДНК-зависимую ДНК-полимеразу вируса герпеса. Препарат токсичен, используется только при тяжелых формах заболеваний. Ациклавир имеет тот же механизм действия. Наиболее широко используется при инфекциях, вызванных вирусом герпеса Эпштейна-Барр и герпесвирусами 6 и 7 типов.

Азидотимидин - аналог тимина, действует на обратную транскриптазу ретровирусов, в частности ВИЧ. Дидезоксицитадин - аналог азидотимидина. Оба препарата токсичны. К ингибиторам репликации относятся также аналоги фосфоновой кислоты, которые, необратимо связываясь с пирофосфатом, блокируют функцию ДНК-полимеразы.

2. Иммуноферментный анализ. Иммуноблотинг.

ИФА - выявление АГ с помощью соответствующих им АТ, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой, бета-галактозидазой или щелочной фосфатазой). После соединения АГ с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции - интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул АГ и АТ. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В, а также определения гормонов, ферментов, лекарственных препаратов.

Твердофазный ИФА - вариант теста, когда один из компонентов иммунной реакции (АГ или АТ) сорбирован на твердом носителе (в лунках планшеток из полистирола). Компоненты выявляют добавлением меченых АТ или АГ. При положительном результате изменяется цвет хромогена. Каждый раз после добавления очередного компонента из лунок удаляют несвязавшиеся реагенты путем промывания.

I. При определении АТ в лунки планшеток с сорбированным АГ последовательно добавляют сыворотку крови больного, антиглобулиновую сыворотку, меченную ферментом, и субстрат/хромоген для фермента.

II. При определении АГ в лунки с сорбированными АТ вносят АГ (сыворотку крови с искомым АГ), добавляют диагностическую сыворотку против него и вторичные АТ (против диагностической сыворотки), меченные ферментом, а затем субстрат/хромоген для фермента.

Конкурентный ИФА для определения АГ: Искомый АГ и меченный ферментом АГ конкурируют друг с другом за связывание ограниченного количества АТ иммунной сыворотки.

Конкурентный ИФА для определения АТ: Искомые АТ и меченные ферментом АТ конкурируют друг с другом за АГ, сорбированные на твердой фазе.

Иммуноблоттинг - высокочувствительный метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА. Иммуноблоттинг используют для диагностики ВИЧ-инфекции.

АГ возбудителя разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, затем переносят их из геля на активированную бумагу или нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. На полоски с блотами АГ наносят сыворотку больного. Затем, после инкубации, отмывают от несвязавшихся АТ больного и наносят сыворотку против Ig человека, меченную ферментом. Образовавшийся на полоске комплекс (АГ + АТ больного + АТ против Ig человека) выявляют добавлением хромогенного субстрата, изменяющего окраску под действием фермента.