1. Методы выделения чистых культур бактерий.

Чистая культура - популяция бактерий одного вида или одной разновидности, выращенная на питательной среде.

Выделение ЧК аэробных бактерий.

1 этап. Для определения морфологии клеток и их тинкториальных свойств, из исследуемого материала готовят мазок, окрашивают по Граму или другим методом и микроскопируют. Для посева исследуемый материал разводят в пробирке со стерильным изотоническим раствором NaCl. Одну каплю приготовленного разведения наносят петлей на поверхность питательного агара в чашку Петри и тщательно втирают шпателем в среду, равномерно распределяя материал по всей ее поверхности. После посева чашку переворачивают дном кверху, подписывают и помещают в термостат при 37С на 18-24 ч.

2 этап. Просматривают чашки и изучают изолированные колонии (форма, величина, консистенция). Для выделения и накопления ЧК одну изолированную колонию или несколько различных изолированных колоний пересевают в отдельные пробирки со скошенным агаром. Для этого часть колонии снимают петлей, не задевая соседние колонии.

3 этап. Отмечают характер роста выделенной ЧК. ЧК характеризуется однородным ростом. При микроскопическом исследовании окрашенного мазка, приготовленного из ЧК, в нем обнаруживаются морфологически и тинкториально однородные клетки. Однако в случае выраженного полиморфизма (некоторые виды бактерий), в мазках из ЧК наряду с типичными встречаются и другие формы клеток.

Выделение ЧК анаэробных бактерий. Посевы на анаэробную микрофлору, как спорообразующую (клостридии), так и неспорообразующую (вейлонеллы, бактероиды, пептококки), производят анаэробных условиях. Первоначальные посевы делают на обогатительные среды типа Китта-Тароцци, затем пересевают на плотные: сахарный кровяной агар в чашки Петри, в пробирки с сахарным питательным агаром. После инкубации посевов в анаэробных условиях из образовавшихся колоний бактерий готовят мазки, окрашивают, микроскопируют, а затем пересевают на среду Китта-Тароцци и агаровые среды для выделения чистой культуры.

При выделении спорообразующих анаэробных бактерий (клостридии) первоначальные посевы прогревают на водяной бане при 80С в течение 20 мин для уничтожения вегетативных клеток посторонней микрофлоры, которая может присутствовать в исследуемом материале.

2. Расстройства иммунной системы.

Иммунодефициты - нарушения нормального иммунного статуса, обусловленные дефектом одного или нескольких механизмов иммунного ответа.

Первичные (врожденные, генетические) иммунодефициты. Состояния, при которых нарушение иммунных гуморальных и клеточных механизмов связано с генетическим блоком, т. е. генетически обусловлено неспособностью организма реализовывать то или иное звено иммунологической реактивности. Расстройства иммунной системы затрагивают основные специфические звенья в функционировании иммунной системы и факторы, определяющие неспецифическую резистентность. Возможны комбинированные и селективные варианты иммунных расстройств. В зависимости от уровня и характера нарушений различают гуморальные, клеточные и комбинированные иммунодефициты.

Причины врожденных иммунодефицитов - удвоение хромосом, точечные мутации, дефект ферментов обмена нуклеиновых кислот, генетически обусловленные нарушения мембран, повреждения генома в эмбриональном периоде. Первичные иммунодефициты проявляются на ранних этапах постнатального периода, наследуются по аутосомно-рецессивному типу. Проявления первичных иммунодефицитов - недостаточность фагоцитоза, система комплемента, гуморальный иммунитет (В-системы), клеточный иммунитет (Т-системы), комбинированная иммунологическая недостаточность.

Вторичные (приобретенные) иммунодефициты. Развиваются у лиц с нормально функционировавшей от рождения иммунной системой. Они формируются под воздействием окружающей среды на уровне фенотипа и обусловлены нарушением функции иммунной системы в результате различных заболеваний или неблагоприятных воздействий на организм. При вторичных иммунодефицитах поражаются Т- и В-системы иммунитета, факторы неспецифической резистентности. Вторичные иммунодефициты поддаются иммунокоррекции, т.е. восстановлению нормальной деятельности иммунной системы.

Вторичные иммунодефициты: после перенесенных инфекций (особенно вирусных) и инвазий (протозойные и гельминтозы); при ожоговой болезни; при уремии; при опухолях; при нарушении обмена веществ и истощении; при дисбиозах; при тяжелых травмах; при облучении, действии химических веществ; при старении; медикаментозные.

По времени возникновения: Антенатальные (ненаследственные формы синдрома ДиДжорджи), перинатальные (нейтропения новорожденного, вызванная изосенсибилизацией матери к АГ нейтрофилов плода), постнатальные вторичные иммунодефициты.

По клиническому течению: Компенсированная форма сопровождается повышенной восприимчивостью организма к инфекционным агентам, вызывающим оппортунистические инфекции. Субкомпенсированная форма характеризуется склонностью к хронизации инфекционных процессов. Декомпенсированная форма проявляется в виде генерализованных инфекций, вызванных условно-патогенными микробами и злокачественными новообразованиями.

Вторичные иммунодефициты: Физиологические, новорожденные, беременности и лактации, старения, биоритмичности, экологические, сезонные, эндогенные интоксикации, радиационные, СВЧ, патологические, постинфекционные, стрессовые, регуляторно-метаболические, медикаментозные, онкологические.