- •Молекулярные основы наследственности: структура ДНК и гена
- •Молекулярная биология
- •Генетическая информация
- •Принципы передачи информации
- •За некоторым исключением ДНК служит генетическим материалом всех живых организмов. Благодаря структуре молекул
- •Генетическая информация, содержащаяся в генах, определяет признаки потомства, процессы дифференцировки и развития организмов.
- •Характеристика генетического материала
- •Экспрессия генетической информации – это часть информационного потока в клетках.
- •Центральная догма молекулярной биологии –
- •Центральная догма Молекулярной Генетики
- •Центральная догма
- •Матричные синтезы, разрешенные по центральной догме
- •Центральная догма
- •Запрещенные
- ••По матричному принципу синтезируются все
- •Второй принцип матричных синтезов – принцип усиления
- •Из-за принципа усиления изменения в молекуле ДНК реализуются на макроуровне
- •Генетический материал служит источником изменчивости организмов, обусловленной мутациями. Меняется химический состав ДНК –
- •Первые исследования генетического материала
- •Доказательство ведущей роли ДНК
- •Опыты по трансформации
- •Вирулентные штаммы Diplococcus pneumoniae обладают капсулой, которая
- •Гриффит показал, что когда мышам вводили смесь живых авирулентных бактерий, смешанных с убитых
- •Далее было показано, что этот процесс происходит и in vitro. Эвери, Маклеод и
- •Эйвери, Маклеод и Маккарти изолировали трансформирующий фактор путем центрифугирования, чтобы собрать клетки, а
- •Т-четный фаг, такой как T2 и T4, адсорбируется на клеточной стенке своего хозяина
- •Эксперимент Херши-Чейз
- •Hershey (Nobel 1969) и Chase
- •После заражения, встряхиванием отделяют меченые фаговые оболочки от бактерий и разделяют оба компонента
- •Прямые и непрямые доказательства значения ДНК у эукариот
- •У эукариот известно, что хромосомы содержат генетический материалl. Таким
- •Непрямое доказательство - мутагенез
- •Прямое доказательство – анализ рекомбинантных ДНК
- •РНК в качестве генетического материала некоторых вирусов
- •РНК сердцевины и белковая оболочка вируса табачной мозаики (TMV) и вируса мозаики подорожникa
- •Химия нуклеиновых кислот
- •Нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК) состоят из повторяющихся единиц
- •Азотистые основания могут быть пуринами или пиримидинами; каждому
- •Каждому атому углерода в сахаре пентозе присваивается номер со знаком (').
- •Связь двух
- •Нуклеотид - нуклеозидмонофосфат (NMP), с одной фосфатной
- •Молекула РНК содержит 100-100 000 нуклеотидов, ДНК
- •Химический состав оснований
- •Чаргафф использовап бумажную хроматографию для сбора данных по составу оснований в ДНК многих
- •Модель Уотсона-Крика
- •Две цепи имеют антипараллельный сахаро-фосфатный остов, соединенный ступенями азотистых пар оснований, число которых
- •Специфичность спаривания между соответствующими пуриновыми и пиримидиновыми основаниями обусловлена комплементарностью – химическим сродством,
- •Две цепи ДНК проходят в
- •Альтернативные формы ДНК
- •A-DNA немного более компактна чем
- •Структура РНК
- •В РНК пентозный сахар – рибоза и урацил (U) вместо тимина (T) образует
- •Водородные связи и анализ структуры нуклеиновых кислот
- •Двухцепочечная ДНК
- •Методы молекулярной гибридизации
- •Двуцепочечная ДНК транскрибирует с образованием одноцепочечного транскрипта РНК, комплементарного одной из двух цепей
- •Кинетика реассоциации и повторяющаяся ДНК
- •Денатурированные, одноцепочечные фрагменты ДНК могут реассоциировать в комплементарные двойные цепи. Кривая концентрации
- •Геном фага Т4 больше генома MS2, геном E. coli больше генома Т4 При
- •Электрофорез нуклеиновых кислот
- •Репликация и синтез ДНК
- ••Универсальный биологический процесс передачи генетической информации в поколениях клеток и организмов, благодаря созданию
- •Место репликации в клеточном цикле
- •Способ репликации ДНК
- •ДНК синтезируется раскручиванием спирали, а затем повторением каждой цепи с помощью правила спаривания
- •Эксперимент Мезелсона-Сталя
- •Ожидаемые результаты
- •Полуконсервативная репликация у эукариот
- •Точки начала репликации, репликационные вилки и единицы репликации
- •Двунаправленная репликация хромосомы E. coli стартует в фиксированной точке начала репликации (oriC).
- •Синтез ДНК у микроорганизмов
- •ДНК-полимераза I
- •Энергия для реакции получается при энерговыделяющем гидролизе dNTP, освобождающим неорганический пирофосфат.
- •Элонгация ДНК.
- •ДНК-полимеразы II и III
- •Эти ДНК полимеразы не могут инициировать синтез ДНК, но могут удлинять существующую цепь
- •ДНК-полимеразы – ферменты с 3’-5’-экзонуклеазной активностью, позволяющей достраивать нуклеотиды в одном направлении, а
- •Активная форма ДНК-полимеразы III называется холоферментом, это димер из 10 различных полипептидных субъединиц.
Центральная догма
Репликация
Транскрипция Трансляция
РНК
белок
Матрицами могут быть только
нуклеиновые кислоты
Матричные синтезы, разрешенные по центральной догме
ДНК 





белок
Не обнаружен
Центральная догма
Репликация
Транскрипция Трансляция
РНК
белок
Обратная
транскрипция
Ретро-РНК-вирусы
Другие организмы тоже получили от них этот фермент и используют в некоторых случаях
Репликация
РНК
Только РНК-вирусы
Запрещенные
матричные синтезы
РНК
ДНК 
Белки никогда не бывают матрицами
•По матричному принципу синтезируются все
нерегулярные полимеры:
ДНК, РНК, белки.
•Но матрицами могут быть только нуклеиновые кислоты.
Второй принцип матричных синтезов – принцип усиления
• В ходе копирования информации становится
больше
Зигота
ДНК одной клетки
Репликация ДНК
Развитие многокле- точного организма
Миллиарды копий ДНК
Транскрипция |
Трансляция |
1 ген (участок ДНК) |
|
|
в клетке |
тысячи РНК – копий |
Миллионы молекул |
|
одного гена |
|
|
одного белка |
|
|
|
Из-за принципа усиления изменения в молекуле ДНК реализуются на макроуровне
Репликация ДНК
Зигота |
Развитие многокле- |
|
точного организма |
||
|
||
Содержит |
Все клетки копируют мутацию |
|
мутацию в ДНК |
||
|
Транскрипция |
Трансляция |
Ген с мутацией в |
|
|
каждой клетке |
РНК |
Все молекулы данного белка |
|
|
|
|
|
будут измененными |
Генетический материал служит источником изменчивости организмов, обусловленной мутациями. Меняется химический состав ДНК – меняется состав белка.
Если мутация попадает в половые клетки, то она передается потомству и распространяется по популяции. Генетическая изменчивость также связана с хромосомными перестройками.
Первые исследования генетического материала
В 1868 г. Ф. Мишер выделил из ядер нуклеиновую кислоту. К 1910 г. было показано, что ДНК состоит из приблизительно равных количеств нуклеотидов, поэтому считалось несовместимым отсутствие у ДНК химического разнообразия и функция хранения генетической информации. Только в 40-х гг. Э. Чаргафф показал неодинаковое соотношение четырех нуклеотидов у большинства организмов.
Доказательство ведущей роли ДНК
убактерий и бактериофагов
В1944 г. О. Эвери, К. Маклеод и М. Маккарти показали, что при трансформации у бактерий в качестве генетического материала передается именно ДНК.
Это считается началом эры молекулярной генетики – ведущая роль в наследственности принадлежит не белкам, а ДНК.
