Досліджувана сироватка крові розведена 1:5
III
I Фізіологічний розчин
Еритроцитарний (антигенний) діагностикум
Схема механізму РПГА для виявлення специфічних антитіл в сироватці обстежуваного
Додаток Ж
Постановка реакції зворотньої пасивній гемаглютинації (рзпга) для визначення антигена в дослідному матеріалі
Матеріал, що досліджується (I) вносять піпеткою в „дослідну” лунку полістиролового планшету. У контрольну лунку вносять той же об'єм фізіологічного розчину (II). Еритроцитарний антитільний діагностікум (III) по 2 краплі вносять у всі лунки.Після легкого струшування планшету, його поміщають в термостат або залишають при кімнатній температурі.
Попередній облік результатів реакції проводять через 2 години витримки планшета в термостаті. Остаточний облік реакції проводять через 24 години витримки планшета при кімнатній температурі.
У разі позитивної реакції в дослідній лунці еритроцити рівномірно розподіляються по дну лунки планшета, утворюючи гемаглютинат у вигляді «парасольки», у разі негативного результату та в контролі еритроцити осаджуються у вигляді «гудзика».
Схема постановки РЗПГА для визначення антигену в дослідному матеріалі
III Еритроцитарний антитільний діагностикум
Дослід
Контроль діагностикуму
I
II
Фізіологічний розчин
Матеріал для дослідження
Схема механізму РЗПГА для визначення антигена в дослідному матеріалі
Ер.
„Парасолька”
Облік
Еритроцит
Ер.
ЕЭр.
Антиген в дослідному матеріалі
Антитіла адсорбовані на еритроцитах
Додаток З
Постановка реакція гальмування пасивної гемаглютинації (РГПГА) для визначення антигену в дослідному матеріалі
Однакові об'єми досліджуваного матеріалу і фізіологічного розчину (II) вносять в дослідну й контрольну лунку полістиролового планшету. У дослідну лунку вносять діагностичну імунну сироватку (III) і поміщають планшет в термостат на 1 годину при 37°С для взаємодії та зв’язування антигена з антитілом (IV). Вносять по 2 краплі еритроцитарного антигенного діагностикуму у всі лунки (V). Планшет, після легкого струшування, поміщають в термостат або залишають при кімнатній температурі.
Облік результатів реакції проводять після осадження еритроцитів в контролі («гудзичок»).
Якщо на першому етапі антиген, який шукають, нейтралізований антитілами діагностичної імунної сироватки, еритроцити в дослідній лунці не аглютинують і осідають у вигляді «гудзичка».
Попередній облік результатів реакції проводять через 2 години витримки планшета в термостаті, остаточний – через 24 години витримки при кімнатній температурі.
Схема постановки РГПГА для визначення антигена в досліджуваному матеріалі
Контроль діагностикуму
Дослід
IV
V
Фізіологічний розчин
I
II
III
Дослідний матеріал
Еритроцитарний антигенний діагностикум