Тимидилат-синтаза – фермент-мишень для химиотерапии рака.

22

Реакции электрофильного присоединения с последующим элиминированием воды

•Механизм

•При бромировании (или хлорировании) нуклеиновых кислот в водных средах происхоит присоединение галогена по С(5)-С(6) двойной связи колец пиримидина и разрушение гуанина.

23

Галогенирование пиримидиновых оснований. Бромирование. Реагенты: бромная вода, N-бромсукцинимид

24

Галогенирование гетероциклических оснований: бромирование

•РНК (вирус табачной мозаики)

•рН 7.0 С U

•рН 9.0 U C

•тРНК из дрожжей (2 моль брома на 1 моль тРНК)

•40-60% 8-бром-G

•30-50% 5-бром-U

•10% 5-бром-С

25

Галогенирование гетероциклических оснований (U)

•Бромирование - 0 0C, несколько минут

•Хлорирование (Сl2) – комнатная температура, несколько часов

•Иодирование (I2, HNO3) – несколько часов

•Br2 Cl2 ICl I2

•При использовании радиоактивного 125I удается получить меченые полинуклеотиды с высокой удельной активностью.

•Галогенирование можно проводить с использованием солей в присутствии аммоний-

церий нитрата (гексанитратоцерата (IV) аммония).

Спектральные и кислотно-основные характеристики нуклеозидных производных урацила и его галоидзамещенных

27

Спектральные и кислотно-основные характеристики нуклеозидных производных урацила и его галоидзамещенных

•Уменьшение рКа при введении галоида в гетероциклическое ядро дает возможность отделять галоидированные нуклеозиды от негалоидированных методами, основанными на различии в величине заряда, например, ионообменной хроматографией

28

Бромдезоксиуридин - мутаген

•У бромдезоксиуридина по сравнению с уридином и тимином таутомерное равновесие между кето- и оксиформами в значительно большей мере смещено в сторону последней, хотя кетоформа остается доминирующей. Кетоформа сохраняет сродство к аденину, поэтому бромдезоксиуридин преимущественно включается в участки, на которых должен находиться дезокситимидин. Однако получающиеся матрицы из-за повышенного содержания окситаутомера пи участии в построении комплементарной цепи могут способствовать отбору в точке нахождения фрагмента бромдезоксиуридина не аденилового, а гуанилового нуклеотида.

30

Бромдезоксиуридин - мутаген

•На месте исходной пары А-Т образуется пара GBr5U. При последующем цикле репликации цепь, содержащая фрагмент дезоксигуанозина, будет способствовать отбору цитидилового нуклеотида, в результате чего образуется пара

•G-C.

31