Для О-гликозидов этих аминокислот имеется тенденция к -

•N-гликозиламидная связь относительно устойчива в мягких щелочных и кислотных условиях, но расщепляется при более жестком гидролизе (2 н. HCl, 100 0С, 10–12 мин или 0,2–2 н. NaOH, 100 0С, 16 ч). В связи с этим следует иметь ввиду, что значительное количество углеводов будет разрушаться в жестких условиях гидролиза, используемых при аминокислотном анализе. Если для белка присуще аномальное поведение при гель-фильтрации, ультрацентрифугировании, измерении ультрафиолетового поглощения, то его можно “заподозрить” в принадлежности к гликопротеинам и последующее определение стратегии секвенирования проводить с учетом данного типа модификации.

РЕАКЦИИ ЭЛЕКТРОФИЛЬНОГО ЗАМЕЩЕНИЯ

•Посттрансляционная модификация, включающая стадию йодирования приводит к образованию тироидных гормонов щитовидной железы: тироксину и 3,3’,5-трииодтиронину. Биосинтез их протекает по механизму окислительного сочетания фенолов из двух определенным образом расположенных остатков иод-L-

тирозина в белковой молекуле тироглобулина. Ниже представлена схема синтеза йодтиронинов.

•Тироглобулин – гликопротеин с молекулярной массой 660 кДа, содержит 115 остатков тирозина, синтезируется в базальной части клетки и хранится во внеклеточном коллоиде в тироидных фолликуллах. Под действием тиропероксидазы окисленный йод реагирует с остатками тирозина с образованием монойодтиронинов (МИТ) и дийодтиронинов (ДИТ). Две молекулы ДИТ конденсируются с образованием тироксина (Т4), а МИТ и ДИТ с образованием трийодтиронина (Т3). Йодтиреоглобулин транспортируется в клетку путем эндоцитоза и гидролизуется ферментами лизосом с освобождением тироксина и 3,3’,5-трииодтиронина.

•В крови йодтиронины находятся в связанной форме в комплексе с тироксинсвязывающим белком. Только 0,03 % Т4 и 0,3 % Т3 находятся в свободном состоянии. Биологическая активность йодтиронинов обусловлена несвязанной фракцией. Транспортные белки служат своеобразным депо, которое может обеспечить дополнительное количество свободных гормонов. Йодтиронины регулируют рост и дифференцировку тканей и энергетический обмен. Их синтез и секреция регулируется гипоталамо-гипофизарной системой. Повышение скорости синтеза йодтиронинов приводит к развитию базедовой болезни, основными симптомами которой является мышечная слабость, потеря массы тела, повышенный аппетит, повышение температуры тела. Гипофункция щитовидной железы в раннем детстве приводит к задержке физического и умственного развития – кретинизму. У взрослых снижение уровня синтеза йодтиронинов проявляется в сонливости, снижении толерантности к холоду, увеличению массы и снижению температуры тела.

Окислительно-восстановительные реакции

ГИДРОКСИЛИРОВАНИЕ ЛИЗИНА, ПРОЛИНА, АСПАРАГИНА

•Перенос гидроксильного радикала ОН от Fe3+ ОН к С Н

приводит к гидроксилированию боковой цепи аминокислотного остатка, которая не является электрондонорной и не выступает в качестве нуклеофила. Монооксигеназы, катализирующие реакцию гидроксилирования, присоединяют гидроксильный радикал стереоспецифически.

•Окисленные остатки пролина и лизина играют важную роль в образовании водородных связей в трехнитевой пространственной структуре белка соединительной ткани коллагена. Окисление происходит в последовательностях Pro- Gly и Lys-Gly. 4-гидроксипролин встречается на порядок чаще, чем 3-гидроксипролин.

•Помимо этого гидроксилирование определенных аминокислотных остатков играет роль в функционировании индуцированного гипоксией транскрипционного фактора HIF (hypoxia inducible factor). Этот белок активируется в условиях

недостатка кислорода. Он индуцирует транскрипцию большого количества генов, в том числе гена, кодирующего белок эритропоэтин, стимулирующий образование эритроцитов из клеток-предшественников, усиливая перенос кислорода к клеткам, страдающим от гипоксии.