стандарты лечения / Laboratornyi-Spravochnik-2012__Synevo
.pdf
объективом. Отмечают степень обсемененности микроорганизмов, отношение к окраске по Граму и морфологические особенности.
Бактериологическое исследование или культуральное, основано на классических методах исследования – выделение чистых культур, их идентификация и определение чувствительности к антибактериальным препаратам.
С целью выявления наиболее широкого спектра аэробных и факультативно2анаэробных микроорганизмов используется большой набор плотных дифференциально2диагностические сред.
Доставленный материал в лаборатории засевают на чашки Петри с 5% кровяным агаром, шоколадным агаром, желточно2солевым агаром, на среду Эндо и среду Сабуро, а также в пробирку с сахарным бульоном.
Посев осуществляется дозированный (по методу Гоулда), что позволяет дать количественную оценку числу выросших колоний.
Посевы инкубируют при температуре 37° С, 24248 часов просматривая ежедневно. Чашки с 5% кровяным агаром инкубируют в условиях с повышенным содержанием СО2.
При появлении роста на плотных средах проводят подсчет колоний различной морфологии, учитывая их соотношение, проводят видовую идентификацию микроорганизмов и определение их чувствительности к антибактериальным препаратам.
Идентификацию чистых культур (до вида микроорганизма) проводят с учётом морфологических, тинкториальных, культуральных, биохимических, токсигенных и антигенных свойств микроорганизма.
Отрицательный результат исследования выдается при отсутствии роста на всех питательных средах в течение 722120 часов.
Интерпретация результатов: выдача результатов анализа в фарингеаль2 ном экссудате следующих бактерий:
При воспалительных процессах дыхательных путей, когда высеваются условно2патогенные микроорганизмы, интерпретация полученных результатов представляет определенные трудности. Следует учитывать, что наличие или отсутствие в исследуемом материале микроорганизмов не может иметь решающего значения для диагноза.
Особое значение принадлежит количественной оценке роста различных видов микроорганизмов, выросших при первичном посеве на плотных питательных средах
Для постановки диагноза важен анализ качественного и количественного состава микрофлоры и их корреляция с клиническими проявлениями воспалительного процесса.
Этиологически значимым является наличие микроорганизмов в титре 105
иболее КОЕ/мл.
2 β2гемолитический стрептококк,
2 Staphylococcus aureus только в сочетании с β2гемолитическим стрепто2
кокком,
2 Arcanobacterium haemolyticum,
2 Candida spp.
КОД 5009. Бактериологический анализ ушного секрета
Нормальная бактериальная флора ушной раковины и наружного слухового протока аналогична бактериальной флоре кожных покровов:
2 доминирующие виды: коагулазоотрицательные стафилококки и коринебак2 терии;
2 редко встречающиеся виды: микрококки, сапрофитные нейссерии.
611
ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО
Нормальная микрофлора также включает следующие виды грибков:
Aspergillus, Alternaria, Penicillium и Candida (не albicans). Внутреннее и среднее ухо являются, с точки зрения бактериологии, стерильными областями, но могут быть инфицированы либо в ходе некоторых генерализованных, системных заболева2 ний, где входные ворота – это дыхательные пути (корь, скарлатина), либо за счет инвазии местной и соседской микрофлоры. Среди этиологических факторов на2 ружного отита (воспалительный процесс затрагивает ушную раковину и/или на2 ружный слуховой проход) различают:
•порезы и травматизацию различными твердыми предметами: зубочистка2 ми, булавками, карандашами;
•рожистое воспаление, вызванное Streptococcus pyogenes;
•«отит купальщиков», вызванный Pseudomonas aeruginosa из2за попадания воды в слуховой проход с мацерацией кожных покровов в этой области;
•микозы уха, вызванные грибками рода Aspergillus, после продолжительной
местной антибиотикотерапии.
Средний отит чаще встречается у детей в возрасте от 3 месяцев до 3 лет. Важ2 ную роль в его возникновении играет воспалительный процесс в носоглотке, ко2 торый сопровождается застойными и отечными явлениями в области евстахие2 вой трубы, затрудняет нормальное дренирование и элиминацию продуктов жиз2 недеятельности местной микрофлоры. У детей амигдалиты и фаринготонзилли2 ты часто осложняются отитами из2за широкой формы и горизонтального распо2 ложения евстахиевой трубы, облегчающей распространение инфекции. Адено2 идные наросты обуславливают возникновение отитов как механически, за счет их объемного увеличения, так и вследствие воспаления за счет инфекций, кото2 рые его вызывают.
•Streptococcus pneumoniae, гемофильная палочка – независимо от серологи2 ческого вида и даже бескапсульных штаммов,
•Streptococcus pyogenes,
•Enterobacteriaceae, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus aureus.
Техника взятия образца и транспортировка образцов в лабораторию ука зана в разделе № 2.
Методика работы с образцами
• Лабораторное исследование проводится комплексно и включает бактериоскопическое и бактериологическое исследование материала.
Микроскопия исследуемого материaла:
В лаборатории доставленные мазки исследуемого материала окрашивают по методу Грама и микроскопируют с иммерсионным объективом. Отмечают степень обсемененности микроорганизмов, отношение к окраске по Граму и морфологические особенности.
Бактериологическое исследование или культуральное, основано на классических методах исследования – выделение чистых культур, их идентификация и определение чувствительности к антибактериальным препаратам.
С целью выявления наиболее широкого спектра аэробных и факультативно2 анаэробных микроорганизмов используется большой набор плотных
дифференциально2диагностические сред. |
|
Доставленный материал в лаборатории засевают на |
чашки Петри с 5% |
кровяным агаром, шоколадным агаром, желточно2солевым |
агаром, на среду |
Эндо и среду Сабуро, а также в пробирку с сахарным бульоном.
Посев на плотные питательные среды осуществляется дозированный (по методу Гоулда), что позволяет дать количественную оценку числу выросших колоний.
612
Посевы инкубируют при температуре 37° С, 24248 часов просматривая ежедневно. Чашки с 5% кровяным агаром инкубируют в условиях с повышенным содержанием СО2.
При появлении роста на питательных средах проводят подсчет колоний различной морфологии, учитывая их соотношение, проводят видовую идентификацию микроорганизмов и определение их чувствительности к антибактериальным препаратам.
Отрицательный результат исследования выдается при отсутствии роста на всех питательных средах в течение 72296 часов.
Интерпретация результатов: При выявлении специфических возбудителей интерпретация результатов не вызывает трудностей.
В других случаях, когда процесс вызывается условно2патогенными бактериями, необходимо применение количественных критериев оценки.
Сделать заключение о возможном возбудителе воспалительного процесса можно на основании преобладания в мазке нативного материала окрашенного по Граму, вида микроба, массивности роста однотипных колоний, повторности выделения культур.
При острых воспалительных процессах обычно высевают в большом количестве монокультуры микроорганизмов.
Более трудна интерпретация результатов микробиологического исследования при хронических воспалительных процессах, когда выявляют ассоциации бактерий. В таких случаях важна количественная оценка роста различных видов в ассоциации.
Необходимо иметь в виду, что в процессе лечения антибактериальными средствами нередко происходит замена бактериальной флоры на грибковую.
Этиологически значимым является наличие микроорганизмов в титре 105 и более КОЕ/мл.
Для постановки диагноза важен анализ качественного и количественного состава микрофлоры и их корреляция с клиническими проявлениями воспалительного процесса.
КОД 5008. Бактериальный анализ глазного секрета
Инфекционные возбудители могут поражать различные анатомические структу2 ры глазного яблока, глазницу и вспомогательные органы защиты глаза (брови, веки и слезные железы). Патогенные микроорганизмы чаще попадают в прилегающие органы (конъюнктиву и веки), чем в само глазное яблоко. Конъюнктива находится в тесном контакте с роговицей, и поэтому часто происходит двойное инфицирование (кератоконъюнктивит). Персистенция в носовой полости золотистого стафилококка является фактором, способствующим возникновению бактериального конъюнкти2 вита. Местная микрофлора век не отличается от таковой на кожных покровах. Са2 мые высокие показатели микробного числа обнаруживаются в кожно2волосяных же2 лезах и в порах желез, где преобладают коагулазоотрицательные стафилококки. Кроме того, кожно2волосяные железы колонизованы Propionibacterium и анаэробны2 ми микроорганизмами. Дифтероморфные бациллы являются их частью, а также ча2 стью флоры, существующей в норме на кожных покровах и наружных краях века. Конъюнктива и роговица характеризуется низким микробным числом благодаря слезной секреции и постоянному движению век.
Из конъюнктивы в норме могут быть выделены:
•примерно в 94% случаях – коагулазоотрицательные стафилококки;
•иногда – дифтероморфные бациллы, различные виды Candida, золотистый стафилококк, различные виды стрептококков, неприхотливые к среде оби2 тания нейссерии, некоторые виды Haemophilus, Enterobacteriaceae,
613
ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО
Pseudomonadae, антракоидные бациллы, оппортунистические и сапрофит2 ные грибки;
•редко можно выделить анаэробные бактерии, спорообразующие или неспо2 рообразующие, сапрофитные или условно патогенные микобактерии и ви2 ды некоторых оппортунистических или грибков: Апсидия, Cryptococcus и др.
Этиология глазных инфекций зависит от пораженной анатомической структуры
Блефарит:
•бактерии (например, Staphylococcus aureus),
•вирусы (например, герпеса),
•редко – паразиты (например, Phthirus pubis).
Конъюнктивит
Уноворожденных (при прохождении плода по родовым путям):
•Neisseria gonorrhoeae,
•Chlamydia trachomatis.
Удетей и взрослых:
•Haemophilus influenzae,
•S. pneumoniae,
•S. aureus,
•Moraxella spp.,
•Chlamydia trachomatis (трахома у взрослых),
•грибки, вирусы (аденовирусы, энтеровирусы, Коксаки2вирус).
Кератит
•P.аeruginosa,
•S. аureus,
•S. рneumoniae,
•HSV (Herpes simplex virus).
Системные инфекции могут вызвать и глазные инфекции в иммуноослаблен2 ном организме (например, ВИЧ2инфицированные пациенты), из которых отме2 чаем следующих патогенных возбудителей данных инфекций: цитомегаловирус, пневмоцистис каринии, Cryptococcus neoformans, Candida spp. etc.
Техника взятия образца и транспортировка образцов в лабораторию ука зана в разделе № 2.
Методика работы с образцами
• Лабораторное исследование включает бактериологическое исследование материала.
Материал, взятый тампоном, с отделяемым глаз засевают на чашки с 5% кровяным агаром и «среду для контроля стерильности». Чашки с 5% кровяным агаром инкубируют в условиях с повышенным содержанием СО2. Посевы инкубируют при температуре 37° С, 24248 часов просматривая ежедневно.
При появлении роста на плотных средах проводят учет колоний различной морфологии, видовую идентификацию микроорганизмов и определение их чувствительности к антибактериальным препаратам.
Идентификацию чистых культур (до вида микроорганизма) проводят с учётом морфологических, тинкториальных, культуральных, биохимических, токсигенных и антигенных свойств микроорганизма.
Отрицательный результат исследования выдается при отсутствии роста на питательных средах в течение 72296 часов.
Интерпретация результатов: При интерпретации результатов микробиологического исследования глаз необходимо учитывать контингент обследованных больных, анамнез, клинические проявления болезни.
614
Необходимо учитывать, что гонококки являются одной из частых причин острых гнойных конъюнктивитов у взрослых и особенно у детей. Кератоконъюнктивитам, вызванным нормальной микрофлорой конъюктивы, носоглотки, ротовой полости часто предшествует вирусная инфекция верхних дыхательных путей, аллергические риниты, травмы, оперативные вмешательства, а также использование промывных растворов, инфицированных госпитальными штаммами.
Конъюнктивит наружных углов глаза (Кох2Уикса) часто вызывается микроорганизмами рода Moraxella lacunata. Слабая воспалительная реакция может быть вызвана и кепатогенными микроорганизмами рода Corynebacterium, но в таких случаях наблюдается более обильный рост микроорганизмов, чем при исследовании нормальной конъюнктивы.
Длительное местное применение антибиотиков приводит к выделению грибов рода Candida и Aspergillus.
КОД 5013. Урокультура
Инфекции мочевыводящих путей (ИМП) – это воспалительные заболевания, вызываемые различными микроорганизмами, которые проникают в мочевыде2 лительную систему, где они размножаются и вызывают, в то же время, наруше2 ния нормального функционирования почек и мочевыводящих путей. После ло2 кализации в организме ИМП может опускаться в нижние отделы, когда поража2 ются уретра и мочевой пузырь, и переходить на верхние отделы, поражая моче2 точники и почки. После постепенного стихания симптоматики ИМП могут пере2 ходить в бессимптомную форму (бактериурия без клинических проявлений). При бактериурии, сопровождающейся значительной воспалительной реакцией (пиу2 рией), клинические проявления, как правило, все же появляются. В норме моче2 вой тракт является стерильным, за исключением дистального отдела уретры, ко2 торый заселен бактериями с кожных покровов промежности, а у женщин – и ми2 кроорганизмами с вульвы. Эти бактерии способны контаминировать мочевой пузырь в случае нарушения правил проведения отбора образцов мочи. Половая структура заболеваемости ИМП зависит от возраста, а именно: в первый год жизни ИМП встречаются чаще у мальчиков (из2за фимозов и парафимозов, ха2 рактерных для этого возраста), затем соотношение постепенно выравнивается в период раннего детства, после чего доминирует женский пол, когда заболева2 емость растет прямо пропорционально возрасту (будучи связанной с активнос2 тью половой жизнью и беременностью). Но различия, связанные с половой при2 надлежностью, проходят в пожилом возрасте за счет увеличения уровня заболе2 ваемости среди мужчин, в связи с заболеваниями простаты. Развитию ИМП спо2 собствуют структурные и неврологические нарушения, которые мешают нор2 мальному оттоку мочи, и системные заболевания (например, сахарный диабет и неоплазии). У пожилых пациентов, у лиц с ослабленным иммунитетом и с поро2 ками развития, а также у детей ИМП может развиваться бессимптомно или с не2 специфическими проявлениями (лихорадка, расстройства пищеварения, потеря веса). Еще в 1956 г. E.H. Kass установил, что для ИМП пороговым значением яв2 ляется 105 КОЕ грамотрицательных палочек/мл мочи. Для Staphylococcus spp. пределом является 5x104 КОЕ/мл, а для Candida albicans – 104 КОЕ/мл.
Результаты микробиологических исследований зависят от качества проведе2 ния отбора проб и транспортировки образцов (см. раздел 4.3 настоящего руко2 водства).
615
ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО
Техника взятия образца и транспортировка образцов в лабораторию ука зана в разделе № 2.
Методика работы с образцами:
Выделение микроорганизмов из мочи (качественное исследование) не позволяет от дифференцировать бактериурию, возникающую в результате загрязнения мочи нормальной микрофлорой дистального отдела уретры, от бактериурии, развивающейся при инфекционных процессах в мочевыводящей системе, возбудителями которых являются условно2патогенные микроорганизмы. С этой целью применяют количественные методы исследования, основанные на определении числа микробных клеток в 1 мл мочи (степень бактериурии). Посев проводят методом секторных посевов по Гоулду с использованием простого питательного агара и 5% кровяного агара. В окончательном ответе, который выдается лабораторией, указывается степень бактериурии, вид выделенных культур и их чувствительность к лекарственным препаратам.
Интерпретация результатов: Основной задачей при интерпретации полученных данных является доказательство этиологической роли условно2 патогенных микроорганизмов. Учитывают комплекс тестов: степень бактериурии, вид выделенных культур, повторность их выделения в процессе заболевания, присутствие в моче монокультуры или ассоциации микроорганизмов. Степень бактериурии позволяет дифференцировать инфекционный процесс в мочевых путях от контаминации мочи нормальной микрофлорой. С этой целью используют следующие критерии:
1.Степень бактериурии, не превышающая 103 микробных клеток в 1 мл мочи, свидетельствует об отсутствии воспалительного процесса и обычно является результатом контаминации мочи.
2.Степень бактериурии, равная 104 микробных клеток в 1 мл мочи, расценивается как сомнительный результат. Исследование следует повторить.
3.Степень бактериурии, равная и выше 105 микробных клеток в 1 мл мочи, указывает на наличие воспалительного процесса.
Изменение степени бактериурии в процессе заболевания может быть использовано для контроля за течением процесса и эффективностью терапии: уменьшение степени бактериурии свидетельствует о благоприятном течении заболевания и эффективности использованных лекарственных препаратов.
При трактовке результатов исследования следует учитывать повторность выделения одного и того же вида микроорганизмов: повторное выделение из мочи культуры одного вида, типа, варианта говорит о наличии инфекционного процесса.
Учитывается также присутствие в моче монокультуры или ассоциации микроорганизмов. Монокультура чаще выделяется при острых воспалительных процессах и коррелирует с высокой степенью бактериурии. Ассоциации микроорганизмов чаще встречаются при хронических процессах и коррелируют
снизкой степенью бактериурии.
При окончательной трактовке результатов микробиологического исследования необходимо учитывать данные клиники и другие лабораторные анализы.
Количественные результаты проб урокультур выдаются с учетом следующих обстоятельств:
•при отсутствии роста или бактериурии порядка 1032104 КОЕ/мл,
•при выявлении более двух видов бактерий в количестве > 104 КОЕ/мл,
•при обнаружении патогенных бактерий в количестве > 105 КОЕ/мл требует2
616
ся проведение их видовой идентификации и тестирования на чувствитель2 ность к определенным антибиотикам.
Наличие патогенных бактерий в урокультуре:
Наиболее распространенными бактериями в этиологии ИМП являются:
•глюкозоферментирующие грамотрицательные бактерии (E.coli, Klebsiella, Proteus, Enterobacter, Citrobacter, Morganella, Providencia);
•неферментирующие глюкозу грамотрицательные бактерии (Pseudomonas, Acinetobacter);
•грамположительные кокки (Enterococcus spp, Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophyticus, гемолитический стрептококк группы B);
•Corynebacterium urealyticum вызывают ИМП у пациентов с длительным ле2 чением антибиотиками или с урологическими вмешательствами.
Candida albicans является причиной уретроциститов при неконтролируемом метаболическом диабете.
КОД 5011. Бактериологическое исследование материала с гнойным содержимым
Нагноение может возникать в любых органах и тканях, сопровождаясь на2 коплением гноя в подкожной клетчатке (пустулы, гидрадениты, фурункулы, абсцессы, гуммы), в мышечной ткани (абсцессы, флегмоны, остеомиелит), в лимфатических узлах, во внутренних органах (абсцессы), в придаточных полостях (околоносовые пазухи, мозговые оболочки, брюшина, синовиаль2 ная оболочка суставов). Основная роль микробиологической лаборатории заключается в видовой идентификации и тестировании на чувствитель2 ность к антибиотикотерапии одного или нескольких микроорганизмов. Бак2 териология ран зависит от анатомического расположения и механизма воз2 никновения (сложные хирургические операции, травмы, ожоги). В инфекци2 онном поражении кожных покровов и подлежащих тканей доминируют ста2 филококковые и стрептококковые (рожа, импетиго, пузырчатка, целлюлиты) пиодермиты (фурункулез, фолликулит, гидрадениты). Подострые или хро2 нические инфекции могут быть вызваны представителями рода Actinomyces и Nocardia (гранулематозные абсцессы, глубокие целлюлиты) или микобак2 териями (изъязвления). Послеоперационные инфекции зависят от анатоми2 ческой локализации: раны, расположенные в относительно стерильных об2 ластях, остаются, как правило, неинфицированными, в то время как при хи2 рургических вмешательствах в нижнем отделе брюшной полости редко уда2 ется избежать инфицирования, где в качестве источника инфекции может выступить флора желудочно2кишечного тракта. Инфекции при ожогах ха2 рактеризуются сепсисом и высоким уровнем смертности. Процесс нагное2 ния может быть вызван как аэробными, так и анаэробными бактериями, при этом наиболее часто выделяются S.aureus, Streptococcus, Enterobacteriaceae, Pseudomonas spp., Candida, Aspergillus и Mucor spp., ана2 эробные бактерии, в том числе Clostridium, Bacteroides. Раны, полученные от укусов, могут инфицироваться бактериями из ротовой полости зверя с раз2 личной этиологией: Pasteurella spp., S.aureus, альфа2гемолитические стреп2 тококки, Enterobacreriacea, анаэробные грамположительные кокки, анаэроб2 ные грамотрицательные бактерии, Fusobacterium spp. Этиологические аген2 ты при язвах голени и пролежнях полиморфны, однако наиболее часто они вызваны S.aureus, а также Streptococcus, Enterococcus spp., Enterobacteriaceae, Р. aeruginosa, Acinetobacter, Peptostreptococcus spp, Bacteroides и Prevotella spp.
617
ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО
Техника взятия образца и транспортировка образцов в лабораторию указана в разделе № 2.
Методика роботы с образцами
• Лабораторное исследование проводится комплексно и включает бактериоскопическое и бактериологическое исследование материала.
Микроскопия исследуемого материла:
В лаборатории доставленные мазки исследуемого материала окрашивают по методу Грама и микроскопируют с иммерсионным объективом. Отмечают степень обсемененности микроорганизмов, отношение к окраске по Граму и морфологические особенности.
Бактериологическое исследование или культуральное, основано на классических методах исследования – выделение чистых культур, их идентификация и определение чувствительности к антибактериальным
препаратам. |
|
С целью выявления |
наиболее широкого спектра аэробных и |
факультативно2анаэробных микроорганизмов используется большой набор плотных дифференциально2диагностические сред.
Доставленный материал в лаборатории засевают на чашки Петри с 5% кровяным агаром, шоколадным агаром, среду Сабуро, а также в пробирку с сахарным бульоном и «среду для контроля стерильности».
Посев на плотные питательные среды осуществляется по методу «тампон – петля» и дозированный (по методу Гоулда), что позволяет дать количественную оценку числу выросших колоний.
Посевы инкубируют при температуре 37° С, 24248 часов просматривая ежедневно. Чашки с 5% кровяным агаром инкубируют в условиях с повышенным содержанием СО2.
При появлении роста на питательных средах проводят подсчет колоний различной морфологии, учитывая их соотношение, проводят видовую идентификацию микроорганизмов и определение их чувствительности к антибактериальным препаратам.
Отрицательный результат исследования выдается при отсутствии роста на всех питательных средах в течение 5 суток.
Интерпретация результатов: Интерпретация полученных данных не представляет трудностей, так как при условии соблюдения правил асептики во время взятия патологического материала, выделенные микроорганизмы есть возбудители данного инфекционного процесса.
Некоторые особенности следует учитывать при выделении ассоциации микроорганизмов из раневого отделяемого. Ведущее место в течение раневого процесса имеют те виды микроорганизмов, которые количественно преобладают в данном микроценозе, поэтому важно количественно оценить рост каждого вида микроорганизмов в ассоциации.
Этиологически значимым является наличие микроорганизмов в титре 105 и более КОЕ/мл.
КОД 5003/5004. Посев на микоплазму, уреаплазму (IST2, полуколичественный метод)
Одно из ведущих мест среди заболеваний, передаваемых половым путем, занимают микоплазменные инфекции урогенитального тракта.
U. urealyticum и M. hominis относятся к агентам, которые могут передаваться половым путем, и, хотя их роль как основных патогенных микробов в развитии негонококкового уретрита (НГУ) оспаривается, факт, что U. urealyticum может вызывать НГУ, не опровергается.
618
Бессимптомное носительство урогенитальных микоплазм следует рассматривать как состояние риска развития инфекционного процесса, возникающего под действием факторов различной природы: смешанные инфекции, изменение гормонального и иммунного гомеостаза организма и др.
U. urealyticum и M. hominis могут быть причиной таких заболеваний как негонококковый уретрит, постгонококковый уретрит, простатит, орхоэпидидимит, кольпит, эндоцервицит, цистит, болезнь Рейтера; они обнаруживаются также при спонтанных абортах и выкидышах, постабортной и послеродовой лихорадки, при мертворождениях, при мужском и женском бесплодии.
Кроме того, данные микроорганизмы могут встречаться у больных сифилисом и гонореей, что может служить причиной осложнений после лечения венерических заболеваний, в связи с чем требуется дополнительная корректировка терапии таких больных.
Выделение микоплазм от клинически здоровых лиц, а также наличие субклинического течения микоплазмоза послужило основанием считать микоплазмы условно2патогенными микроорганизмами.
Патогенность микоплазм связана со значительной концентрацией их в организме – массивностью заражения.
Важно в диагностике микоплазмоза ассоциативные связи с другими бактериями. А также необходим анализ качественного и количественного состава микрофлоры и их корреляция с клиническими проявлениями воспалительного процесса.
В связи с этим важное значение имеет правильная технология проведения лабораторных исследований для выявления возбудителей микоплазмозов,
атакже определения показаний для их лечения.
Методика работы с образцами
Материалом для исследования у мужчин является мазок из уретры. У женщин наиболее часто исследуют вагинальные и цервикальные мазки.
Поскольку микоплазма характеризуется высокой аффинностью к клеткам слизистых оболочек, необходимо тщательно поскрести слизистую, чтобы собрать достаточное количество клеток.
Концентрация клеток в образце может влиять на результат. При низком титре 103 или > 104 возможно получение ложноположительного результата.
Определение микоплазм проводится с использованием тест2систем MYCOPLASMA IST – 2, производства «BioMerieux» (Франция), которая предназначена для выявления двух наиболее распространенных урогенитальных микоплазм: U. urealyticum и M. hominis. Она представляет собой микрометод, который, помимо одновременного выявления двух микроорганизмов, позволяет определять и их полуколичественное содержание.
Данная тест2система чувствительна при наличии в материале возбудителя в титре 103 КОЕ/мл и выше.
Интерпретация результатов.
104 КОЕ/мл – пороговое значение для Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis при исследовании урогенитального материала.
103 КОЕ/мл – пороговое значение при исследовании мочи мужчин при уретритах, вызванных Ureaplasma urealiticum.
619
ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЕ АНАЛИЗЫ НА АНАЛИЗАТОРЕ VITEK 2
Анализатор позволяет точно и быстро идентифицировать патогенные бактерии и определить их чувствительность к широкому спектру антибиотиков. Материал от каждого пациента исследуется индивидуально и независимо. Исследование чистой культуры патогена занимает 2210 ч, что в несколько раз быстрее известных ручных методов. В ходе одного исследования проверяется чувствительность 202ти антибиотиков, и результат по каждому из них включает указание их эффекта (S/I/R), а также МИКи. Исследуются как терапевтически значимые АБП, так и «маркерные» антибиотики, что позволяет охарактеризовать эффекты эквивалентных антибиотиков и даже спрогнозировать эффекты тех из них, которые фактически не исследовались в ходе анализа. Далее встроенная
Экспертная Система VITEK2 проводит глобальную интерпретацию
результата анализа и его терапевтическую коррекцию с целью достижения максимального терапевтического эффекта и минимизации развития резистентности. Например: штамм Klebsiella pneumonia, продуцирующий ESBL (ферменты бета2лактамазы расширенного спектра, дезактивирующие некоторые АБП) может быть определен в лаборатории ручным методом как чувствительный к цефалоспоринам 32го поколения.
Экспертная Система VITEK2 в таком случае автоматически исправит результат с S (чувствительный) на I или R (нечувствительный), поскольку вероятность эффективного использования этих АБП низка, а применение их приведет в дальнейшем к развитию резистентности.
Это актуальная информация об эффектах АБП, которая включает данные о его естественном спектре действия, а также частоте приобретенных резистентностей, фармакокинетике и фактических клинических данных. Используется для эмпирического назначения АБП. Главное требование – регулярные обновления.
По действию АБП все бактерии разделяют на 3 группы:
•Чувствительные (S).
•Промежуточные (I).
•Резистентные (R), или нечувствительные.
Например, к эритромицину чувствительны стрептококки, резистентны энтеробактерии, а Haemophilus influenzae имеют к нему промежуточную или сомнительную чувствительность.
Выводы:
1.БЫСТРЕЕ: рациональная антибиотикотерапия доступна уже на 32й день после взятия материала у пациента.
2.ТОЧНЕЕ: высокая точность (99%) идентификации, в т.ч. атипичных и полирезистентных микроорганизмов.
3.НАДЕЖНЕЕ: экспертная интерпретация и терапевтическая адаптация/коррекция результатов увеличивает эффективность антибиотикотерапии.
4.АКТУАЛЬНЕЕ: в основе – современная европейская база данных резистентности к антибиотикам (EUCAST), ежегодные обновления.
5.МОЩНЕЕ: определение механизмов резистентности, детекция внутрибольничных инфекций, прогноз действия антибиотиков.
620