стандарты лечения / Laboratornyi-Spravochnik-2012__Synevo

часто наблюдаются иммунные синдромы, свойственные поражению других органов (криоглобулинемия, иммунокомплексные васкулиты, полиартриты и т.п.). Поскольку одновременное обнаружение аутоантител LKM21 и антител к HCV может указывать на два заболевания печени (аутоиммунное и вирусное), правомерно говорить о перекрестном синдроме. Аутоиммунные антитела к LKM21 обнаружены только у 1% взрослых пациентов с АИГ, но очень часто данные антитела выявляются у больных детского и юношеского возраста. Антитела к LKM21 выявляются также у 122% пациентов с положительным результатом исследования сыворотки крови на гепатит С. Положительный результат по2существу свидетельствует о заболевании аутоиммунным гепатитом (при условии, что имеются соответствующие клинические симптомы).

КОД 9180. Антитела IgG к митохондриальному антигену М2 3Е (Anti М2 3Е)

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ Первичный билиарный цирроз печени (ПБЦ) – хроническое

воспалительное заболевание печени с неясной этиологией, которое относят к аутоиммунным заболеваниям. ПБЦ встречается у женщин в десятки раз чаще, чем у мужчин. В Европе это заболевание ежегодно развивается у 13 человек из 100000. Болезнь характеризуется лимфоцеллюлярным инфильтратом вокруг внутрипеченочных желчных протоков, а также высокой специфичностью и широкой распространенностью антител к митохондриям. Центральное место в клинической картине этого заболевания занимает холестаз. Клинические проявления заболевания начинается с часто неспецифических, очень сильно различающихся между собой основных симптомов, таких как зуд, микропапулезная экзантема, слабость и боли в правой верхней части живота. Обструкционная желтуха развивается после различающегося по продолжительности промежутка времени. Специфическим индикатором является повышение уровня липидов в сыворотке крови.

Гистологически в печени обнаруживаются изменения, соответствующие хроническому негнойному деструктивному холангиту с гранулированным перихолангитом, медленно прогрессирующее разрушение небольших и средних желчных протоков с последующим фиброзом, заключительной стадией которого является полный цирроз. Кроме печени, часто и другие органы с внешней секрецией вовлечены в развитие болезни, к таким органам относятся слезные железы, слюнные железы, поджелудочная железа и особенно часто – щитовидная железа. Характерным для этого заболевания является обнаружение в сыворотке крови аутоантител к митохондриальной фракции М2 (AMA M2) и к ядерным пятнам (Nuclear Dots) (кислому белку SP100). Примерно у 10220% пациентов с ПБЦ развивается вторичный аутоиммунный гепатит (также называемый

перекрывающим синдромом (overlap syndrome)). В этих случаях, как и при АИГ, часто обнаруживают аутоантитела. Антитела к SLA/LP являются свидетельством вторичного АИГ (перекрывающего синдрома), при котором необходимо лечение иммуносупрессорами. Митохондрии содержат множество биохимически определяемых антигенов, которые важны при аутоиммунных заболеваниях. Соответственно, в настоящее время различают девять типов АМА (М12М9). Определение антител к

381

382

так и одноцепочечной ДНК. С другой стороны, антитела, реактивные по отношению к ssDNA, распознают полимеры пуриновых или пиримидиновых оснований, которые не доступны в двухцепочечной форме.

Материал: венозная кровь.

Пробирка: вакутайнер с/без антикоагулянта с/без гелевой фазы.

Условия обработки и стабильность пробы: Сыворотка остается стабильной в течение 7 дней при 228 °C. Архивированная сыворотка может храниться при температуре 220 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: ИФА. Анализатор: ELISA.

Тест системы: DRG (Германия).

Референтные значения в лаборатории «Синэво Украина»:

до 20,0 Ед/мл.

Основные показания к назначению анализа

Системные заболевания соединительной ткани (ревматические заболевания).

Интерпретация результатов

Антитела к одноцепочечной ДНК обнаруживаются не только у пациентов с системной красной волчанкой (70295%), но также ассоциированы с целым рядом других аутоиммунных заболеваний (60% случаев лекарственной красной волчанки, 20250% смешанных заболеваний соединительной ткани, полимиозита/дерматомиозита, 14% случаев склеродермы, 13% случаев синдрома Шегрена, 8% случаев ревматоидного артрита).

КОД 9346. Антитела IgG к внутреннему фактору Кастла КОД 9181. Антитела IgG к париетальным клеткам

желудка

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Аутоиммунный гастрит, тип А, относится к частым аутоиммунным заболеваниям и представляет наиболее частое аутоиммунное заболевание желудочно2кишечного тракта. В 30% случаев аутоиммунный гастрит сопутствует аутоиммунным процессам в щитовидной железе, алопеции и витилиго, хотя может встречаться самостоятельно. При популяционных исследованиях частота гастрита типа А может достигать 123% всех лиц старше 65 лет. Аутоиммунный гастрит протекает субклинически, и редко является поводом обращения пациентов к врачу. В его основе лежит аутоиммунная реакция, направленная против обкладочных (париетальных) клеток желудка (ПКЖ). ПКЖ больше в теле желудка, поэтому обычно аутоиммунный гастрит проявляется атрофией фундальных отделов, по сравнению с антральным гастритом при хеликобактерной инфекции. ПКЖ вырабатывают соляную кислоту и внутренний фактор Кастла (гликопротеин массой 72 кДа, который секретируется в просвет желудка и служит для связывания и транспорта в стенку кишки витамина В12). Аутоиммунные антитела к ПКЖ являются комплемент2фиксирующими и непосредственно участвуют в разрушении популяции обкладочных клеток и развитии атрофического гастрита с нарушением абсорбции витамина В12 в подвздошной кишке. Уничтожение популяции обкладочных клеток ведет к гипоацидному гастриту, мальабсорбции, железодефицитной и пернициозной анемии (болезнь Аддисона2Бирмера), которая

383

384

компонентом диагностики аутоиммунных заболеваний печени. Аутоиммунные заболевания печени включают:

2 аутоиммунный гепатит (АИГ),

2 первичный билиарный цирроз печени (ПБЦ),

2 первичный склерозирующий холангит (ПСХ).

АИГ (люпоидный гепатит, хронически активный гепатит) встречается, главным образом, у женщин. Проявлениями заболевания являются повышенные уровни билирубина, ферментов печени и иммуноглобулинов, типичные гистологические (изменения при биопсии печени выявляется некроз паренхиматозных клеток с инфильтратами лимфоцитов и клеток плазмы крови) и обнаружение различных аутоиммунных антител. Заболевание наблюдается, начиная с младенчества, и заканчивая пожилыми людьми, однако чаще всего болеют молодые взрослые люди. При отсутствии лечения аутоиммунный гепатит вскоре перерастает в цирроз печени. Однако если иммуносупрессивная низкодозовая терапия вовремя начата и постоянно продолжается в течение всей жизни больного, пациент живет полноценной жизнью. При дифференциальной диагностике необходимо исключить наличие текущего инфицирования вирусами гепатитов, проводя соответствующие серологические исследования. Большое значение в диагностике АИГ приобрели циркулирующие антитела. Они обнаруживаются у большинства пациентов, но их роль в патогенезе не выяснена. Также нет четкой корреляции между активностью или прогнозом заболевания и титром антител. Помимо антител к SLA/LP с АИГ, ассоциированы следующие аутоантитела: антинуклеарные антитела к ядрам клеток (ANA), нДНК, гладкой мышечной ткани (SMA, с наиболее важным антигеном2мишенью F актином), печеночно2почечным микросомам (LKM 1, антиген2мишень: цитохром Р450 IID6) и гранулоцитам (pANCA). Определение антител к SLA/LP до настоящего времени было возможно только в нескольких специальных лабораториях. Ранее предполагали, что антиген SLA идентичен цитокератинам печени 8 и 18 или ферменту глутатион2трансферазе. Лишь недавно было установлено, что это предположение ошибочно. Открытый антиген2мишень SLA/LP только в настоящее время надежно идентифицирован на уровне ДНК. SLA/LP, по2 видимому, является цитоплазматической молекулой, участвующей в регуляции биосинтеза белка (белка, ассоциированного с супрессором кодона UGA тРНК). Теперь большое диагностическое значение аутоантител к SLA/LP стало очевидно. Аутоантитела к ядрам клеток (ANA) и к гладкой мышечной ткани (SMA) часто наблюдаются при АИГ, но встречаются также и у 10220% пациентов с хроническими вирусными гепатитами и другими заболеваниями. Аутоантитела к LKM21 обнаружены только у 1% взрослых пациентов с АИГ, но у детей они встречаются чаще. Антитела к LKM21 выявляются также у 122% пациентов с положительным результатом исследования сыворотки крови на гепатит С. В отличие от всех других аутоантител, антитела к SLA/LP высокоспецифичны для АИГ, и не обнаружены у пациентов с вирусными гепатитами. Некоторые авторы классифицируют аутоиммунные гепатиты в соответствии с наличием аутоантител: Подтип I (ANA, SMA, SLA/LP), Подтип II (антитела к LKM21). Диагностика АИГ основывается на клинической картине, результатах биохимического и серологического исследований и гистологическом свидетельстве протекающего воспалительного процесса. При этом должны быть исключены другие возможные причины возникновения хронического

385

386

Условия обработки и стабильность пробы: Сыворотка остается стабильной в течение 7 дней при 228 °C. Архивированная сыворотка может храниться при температуре 220 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: ELISA.

Анализатор: EUROIMMUN Analyzer I. Тест системы: EUROIMMUN (Германия).

Референтные значения в лаборатории «Синэво Украина» (R):

Менее 1,0 – отрицательный результат.

Более или равно 1,0 – положительный результат.

Основные показания к назначению анализа:

Повышение уровня трансаминаз по невыясненным причинам, при подозрении на аутоиммунный гепатит

Интерпретация результатов

Антицитозольные печеночные антитела 1 типа выявляются вместе с LKM2 1. Данные антитела считаются высокоспецифичными для АИГ 2 типа и характерны для подгруппы больных с доброкачественным течением заболевания. В группе больных с хроническим гепатитом HCV(+) и Anti2LKM2 1 (+) одновременное обнаружение Аnti2LC21 позволяет идентифицировать пациентов, у которых на фоне терапии интерфероном может возникнуть ухудшение течения аутоиммунного процесса перекрестного синдрома.

КОД 2115. Антитела IgG к гистонам

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Гистоны – основные белки, ассоциированные с ДНК, с молекулярной массой от 11,2 кДа до 21,5 кДа. Их функция состоит в стабилизации двойной спирали ДНК, и также они, возможно, играют роль в механизмах регуляции генов. Существует пять основных типов гистонов: Н1, Н2А, Н2В, Н3 и Н4. Гистоны ассоциированы с ДНК и формируют высокоорганизованные структуры нуклеосом. Центральная часть нуклеосом состоит из тетрамера Н32Н32Н42Н4, который фланкирует с двух сторон с помощью димеров Н2А2Н2В. Эта сердцевинная гистоновая частица окружена двумя витками двойной спирали ДНК (общее количество пар оснований – 146). Нуклеосомы соединены в цепочку как бусинки, в области связывания ДНК (линкер ДНК) ассоциирована с гистоном Н1.

Материал: венозная кровь.

Пробирка: вакутайнер с/без антикоагулянта с/без гелевой фазы.

Условия обработки и стабильность пробы: Сыворотка остается стабильной в течение 7 дней при 228 °C. Архивированная сыворотка может храниться при температуре 220 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: ELISA.

Анализатор: EUROIMMUN Analyzer I. Тест системы: EUROIMMUN (Германия).

Референтные значения в лаборатории «Синэво Украина» (R):

Менее 1,0 – отрицательный результат.

Более или равно 1,0 – положительный результат.

387

388

вторичные иммунодефициты. В качестве первичных выделены такие состояния, при которых нарушение иммунных механизмов (продукция иммуноглобулинов и/или Т2лимфоцитов) часто связано с генетическим блоком. В зависимости от уровня нарушений и локализации дефекта, различают следующие иммунодефициты: гуморальные, клеточные, иммунодефициты, обусловленные дефектами неспецифической системы резистентности (в частности, системы фагоцитоза), и комбинированные. При нарушении Т2звена иммунной системы больные подвергаются особой опасности поражения вирусными и грибковыми инфекциями. Часто первыми признаками иммунодефицита являются кандидоз, осложнения после вакцинации БЦЖ, тяжелые формы инфекций, обусловленных герпесом и возбудителем ветряной оспы. При клеточных формах иммунодефицита часто выявляется снижение количества и функциональной активности лимфоцитов периферической крови: в одних случаях снижается митогенная активация фитогемагглютинином, в других – уменьшается выработка лимфоцитов. Содержание В2лимфоцитов может быть несколько увеличено, а Т2лимфоцитов – снижено. Однако часто количество Т2лимфоцитов и соотношение их популяций находится в пределах нормы, поэтому в диагностике клеточной иммунологической недостаточности приоритет должен отдаваться методам исследования, оценивающим функциональную полноценность лимфоцитов. Среди первичных иммунодефицитов наиболее часто встречаются комбинированные формы. При тяжелом комбинированном иммунодефиците резко снижается активность естественных киллеров. Вторичные иммунодефициты характеризуются приобретенным дефектом иммунной системы, выражающимся в неспособности организма осуществлять реакции клеточного и/или гуморального иммунитета. Дефекты иммунной системы при вторичных иммунодефицитах могут возникать в различных звеньях: Т2 и В2лимфоцитарном, макрофагальном, гранулоцитарном, комплементном. Общий механизм возникновения вторичных иммунодефицитов заключается в нарушении естественно существующих идиотип2антиидиотип2взаимодействий между рецепторами клеток и циркулирующими иммуноглобулинами под влиянием различных стрессовых и патогенных агентов и воздействий.

Материал: венозная кровь. Пробирка: вакутайнер с ЭДТА. Метод: Проточная цитофлуориметрия. Анализатор: цитофлуориметр.

Тест системы: моноклональные антитела.

Референтные значения в лаборатории «Синэво Украина» (%)

389

390