стандарты лечения / Laboratornyi-Spravochnik-2012__Synevo

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

Необходимая обработка после взятия пробы: мазок может быть вы2 полнен на предметном стекле (22x22 мм) или покровном стекле (мазок с бахромой), которые должны быть хорошо высушены и обезжирены, без пыли/грязи. Капля крови размазывается на поверхности предметного стекла и просушивается на воздухе. Мазки, сделанные на предметном стекле, обеспечивают равномерное распределение крови на поверхности поверхностного стекла; с другой стороны, предметные стекла менее хруп2 кие и более просты в обращении и маркировке, но имеют повышенную ха2 рактерность к скоплению лейкоцитов больших размеров по краям мазка края и на бахроме мазка. Мазок требуемого качества должен быть ~ 3 см в длину, 2 см в ширину, равномерно вытянутый, с короткими краями бах2 ромы (< 0,3 см), полем зрения в середине на 121,5 см, и толстым полем та2 кой же длины на другом конце. После высыхания мазки фиксируют при по2 мощи безводного метанола и окрашиваются по методу Май2Грюнвальд2 Гимза. Краситель содержит метиленовый синий (превращаясь в метиле2 новый азур с дихромовой кислотой) и эозин. Метиленовый азур является одним из основных красителей, окрашивающий в сине2фиолетовый цвет кислотные компоненты клетки (нуклеиновые кислоты, белки), а эозин вза2 имодействует со щелочными клеточными элементами, придавая красно2 розовый оттенок цитоплазматическим компонентам и гемоглобину. Исхо2 дя из своих свойств, лейкоцитарные грануляции окрашиваются по2разно2 му, давая возможность проводить их морфологический анализ: грануля2 ции нейтрофилов являются слабощелочными и окрашиваются плохо аузо2 рофильным компонентом, эозинофильные грануляции содержат высокой степени щелочное соединение и хорошо окрашивается эозином, а базо2 фильные грануляции содержат преимущественно кислые белки и окраши2 ваются в пурпурно2синий цвет.

Метод исследования: микроскопическое исследование, первоначально на низкой мощности объектива (с объективом 10x/20x) для определения цвета и распределения клеток. Также можно произвести оценку количества лейкоцитов, наличие анормальных клеточных элементов (бластов, эритро2 бластов), агрегаций тромбоцитов, эритроцитарных агглютинатов/скоплений. Затем мазок исследуется при помощи иммерсионного объектива с 1002кратным увеличением, оценивая каждый тип клеток по количественным

икачественным аномалиям.

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина»:

2 отсутствие морфологических аномалий.

Интерпретация результатов:

I. Определение эритроцитов в мазке: эритроциты оцениваются на предмет изменения размера, формы, распределения гемоглобина и на2 личия внутриклеточных включений. Оптимальное изучение морфологии эритроцитов проводится в области мазка, где красные кровяные клетки находятся бок о бок, но не перекрываются друг другом. Как правило, эритроциты выглядят круглой формы, без ядра, одинаковые по размеру и форме, с диаметром среднего размера 728 мкм (по сравнению с ядром одного малого лимфоцита), с бледной областью у центра, не превышаю2 щей 1/3 диаметра клетки, окруженной окантовкой гемоглобина красно2 оранжевого цвета.

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

III. Оценка лейкоцитов в мазке: исследуется морфология и распределение лейкоцитов. Определение количества лейкоцитов может проводиться путем просмотра мазков при помощи объектива слабой мощности. Необходимо идентифицировать и подсчитать минимум 100 клеток для определения лей2 коцитарной формулы. Лейкоциты, обычно присутствующие в мазке, являют2 ся нейтрофилами, эозинофилами, базофилами, лимфоцитами и моноцита2 ми. Наличие миелоидных предшественников (метамиелоцитов, миелоцитов, промиелоцитов, бластов) или отклонение «влево» показателей лейкоцитар2 ной формулы является ненормальным, и возникает при бактериальной ин2 фекции, интоксикации, некрозе тканей, кровотечениях, гемолизе, карцино2 мах, лейкемоидных реакциях, хронических миелопролиферативных синдро2 мах и т.д. Лейкоэритробластная картина состоит в наличии в периферичес2 кой крови миелоидных и предшественников и нормобластов (эритроблас2 тов), обычно ортохроматофильных, независимо от количества лейкоцитов.

Возможные причины:

2 У новорожденных детей, при тяжелых инфекционных заболеваниях, постспленэктомии, остром гемолизе, тяжелом кровотечении, талассемии средней степени, мегалобластной анемии, тяжелой железодефицитной ане2 мии, серповидной анемии, легочных и сердечных хронических заболевани2 ях, заболеваниях печени.

2 Медуллярная инфильтрация: острые и хронические миело2 и лимфопро2 лиферативные заболевания, миелодиспластические синдромы (прелейкми2 ческие), гранулематозные заболевания (туберкулез, грибки), медуллярные метастазы, миелофиброз.

Морфологические аномалии лейкоцитов

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

Морфологические аномалии лейкоцитов

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

Иммуногематологические исследования

КОД 4003. Группа крови

Система групп крови (АВ0) состоит из одного или более антигенов, регу2 лируемых одним геном или комплексом из двух или более генов, тесно свя2 занных между собой. Также были выявлены и другие антигены, которые не были отнесены к установленным системам. Антигенами эритроцитов могут быть белки, гликопротеины или гликолипиды. Большинство из них синтези2 руются эритроцитами, однако некоторые антигены, например, принадлежа2 щие к системе Льюиса, адсорбируются из плазмы на мембране эритроци2 тов. Некоторые антигены характерны именно для эритроцитов, в то время как другие встречаются и в других клетках организма. Определение группы крови имеет важное практическое значение для трансфузионной терапии. Поэтому люди, не обладающие определенными эритроцитарными антигена2 ми крови, могут вырабатывать аллоантитела при контакте с кровью, содер2 жащие эти антигены в ходе трансфузии с продуктами крови или во время беременности. Антитела, которые взаимодействуют с эритроцитарными ан2 тигенами, вызывают гемолитические трансфузионные реакции замедлен2 ного или быстрого типов, и гемолитическую болезнь новорожденных. Сис2 тема группы крови АВ0 является самой важной системой групп крови, пото2 му что когда антигены не выражены на поверхности эритроцитов, соответ2 ствующие антитела всегда присутствуют в плазме, провоцирующие факто2 ры для выработки антител представлены различными факторами среды, та2 кими как бактерии (например, Е.соli), которые представляют на поверхнос2 ти структуры, практически идентичные углеводам AB0. Образующиеся ан2 титела представляют собой смесь иммуноглобулинов IgM (преимуществен2 но) и IgG, активных при 37 °С и способных активировать комплемент, но вы2 сокая плотность антигенных сайтов на мембране эритроцитов позволяет связывать большое количестве антител, приводя тем самым при трансфу2 зии крови, несовместимой в системе АВ0, к острым гемолитическим транс2 фузионным реакциям. Существуют три аллельных гена в системе АВ0 (А, В и 0), которые наследуются по Менделю. А и В являются кодоминантными ал2 лелями, а 0 является рецессивным аллелем. Эти три гена определяют четы2 ре фенотипа: А, В, АВ и 0. У лиц с фенотипом А или В могут быть гетерози2 готными (A0, B0 соответственно), или гомозиготными (АА и ВВ соответ2 ственно). Антигены системы АВ0 локализуются на олигосахаридных цепоч2 ках, являющихся гликосфинголипидами. Гены АВ0 системы непосредствен2 но не кодируют антигены, а кодируют ферменты, которые добавляют специ2 фические сахара в субстрат из мембраны эритроцитов (вещество Н): N2аце2 тил2галактозамин для гена А и галактоза – для гена B; аллель 0 кодирует не2 активную трансферазу, таким образом, что ни один из специфических саха2 ров не прикрепляется к мембране эритроцитов. Ген H кодирует фукозил2 трансферазу, которая добавляет группы L2фукозы к галактозе в конце оли2 госахаридной цепи, в результате чего образуется вещество Н. Редкая ал2 лель, наследуемая иногда в локусе Н называется h, которая кодирует неак2 тивную трансферазу. При гомозиготных HH (фенотип Бомбей) вещество H не присутствует на поверхности эритроцитов, а трансферазы А и Б, даже ес2 ли они присутствуют, не могут добавить специфические сахара, определя2 ющие антигенную специфичность А или B. Клиническая значимость фено2 типа Бомбей проявляется в способности этих лиц вырабатывать не только анти2А и анти2B, но и анти2H, что делает трудным поиск крови, совместимой