Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Lektsii_DGTU_1-16_po_biofizike / Лекц 10 Опт. с-ма гл. Опт. микр-я.ppt
Скачиваний:
160
Добавлен:
19.05.2015
Размер:
6 Mб
Скачать

1.Окуляр

2.Тубус

3.Держатель

4.Винт грубой фокусировки (макровинт)

5.Винт точной

фокусировки

(микровинт)

6.Револьверная

головка

7.Объектив

8.Предметный

столик

Состоит из двух систем линз – объектива (Об) и окуляра (Ок)

Формирование изображения:

1.Предмет АБ помещается вблизи фокуса системы линз объектива (Об)

2.Объектив создает увеличенное действительное промежуточное

изображение А’Б’. Об (АБ) → А’Б’

3. Окуляр создает окончательное

изображение А’’Б’’.Ок (А’Б’) → А’’Б’’

Характеристики микроскопа

Увеличение

- фокусное расстояние

объектива

-фокусное расстояние окуляра

-расстояние наилучшего зрения

-оптическая длина тубуса (расстояние между передним фокусом Ок и задним фокусом Об)

Нейроны Пуркинье (грушевидные

На практике Г≤ 1500-2000. клетки)

Возможность различать мелкие детали ограничена дифракцией света в структуре изучаемого объекта.

Предел разрешения

- характеризует минимальное расстояние между двумя близко расположенными точками, различимыми в микроскоп раздельно.

 

 

 

 

-

 

 

 

 

 

 

длина волны света

 

 

 

 

-

 

 

 

 

 

 

показатель преломления

 

 

 

 

 

 

среды между предметом и

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

объективом

 

 

 

 

-

 

 

 

 

 

 

разрешающая способность

 

 

 

 

 

 

 

Чем ↓ Z, тем R ↑

 

 

 

- апертурный угол

 

 

 

 

 

 

объектива

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

- ½ угла между крайними

 

 

 

 

 

 

лучами конического светового

 

 

 

 

 

 

пучка, входящего в объектив.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Числовая апертура

В современных оптических микроскопах u/2 = 700. При этом числовая апертура А→ max, и предел разрешения

Z→ min

Полезное увеличение микроскопа

- предел разрешения глаза - предел разрешения микроскопа.

Увеличение называют полезным, если размеры предмета равны пределу разрешения микроскопа, а размеры его изображения

пределу разрешения глаза.

,что соответствует Zг л = 70 мкм

Для соблюдения гигиены зрения используют микроскопы с увеличением

Глаз

различает

элементы

структуры

объекта,

которые

разрешаются

микроскопом.

=>

Для λ= 0,555 мкм Гmin ≈ 250 А

500 А ≤ Г ≤ 1000 А

При освещении объекта белым светом глаз наиболее чувствителен к λ= 0,555 мкм.

УФ- микроскоп

Оптическая система, предназначенная для анализа объектов

в ультрафиолетовых лучах;

используется для анализа (в том числе

 

прижизненного) распределения и динамики

 

преобразований макромолекул в клетках, что

 

основано на поглощении света нуклеиновыми

Изображение в УФ-

кислотами в участке спектра около 260 нм и

микроскопе

рядом белков (богатых фенилаланином и

белковоуглеводных

тирозином) - около 280 нм.

коацерватных капелек

Метод наблюдения в УФ-лучах делает

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

возможным

увеличение

предельной

 

Z

 

разрешающей способности микроскопа.

 

 

2A

 

 

 

 

Источник УФ излучения - ртутная дуга в

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

кварцевой

оболочке, помещенная

в

 

 

 

 

 

 

 

R

1

 

 

 

контейнер

из

специального стекла,

 

 

 

задерживающего

видимый

свет,

но

 

 

Z

 

пропускающего УФ.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Главное преимущество метода состоит в том, что частицы многих веществ, прозрачные в видимом свете, сильно поглощают УФ и, следовательно, легко различимы в УФ - лучах (пуриновые и пиримидиновые основания, большинство витаминов, ароматические аминокислоты, некоторые липиды, тироксин и др.).

Этим обусловлено широкое применение УФ-микроскопии в качестве одного из методов цитохимического анализа.

Регистрация изображения

так как УФ - лучи невидимы для человеческого глаза, то изображения в УФ - микроскопии регистрируют либо фотографически, либо с помощью электроннооптического преобразователя или люминесцирующего экрана.

Изображение, получаемое при помощи обычной оптической микроскопии (слева) и при помощи метода Хелля с помощью УФ лучей (справа).