Методы количественного определения кардиоактивных стероидов

Кардиоактивные стероиды являются терапевтически важной груп­пой веществ..

До настоящего времени количественная оценка кардиоактивных стероидов проводится в основном с помощью биологических тес­тов на животных. Биологические методы трудоемки, длительны, плохо воспроизводимы, мало достоверны (ошибки в пределах 10— 20%).Результаты биологического анализа зависят от индивидуаль­ных особенностей животных и не позволяют получить объектив­ную качественную и количественную информацию о действующем веществе.

Стандартизация сердечных гликозидов с помощью биологичес­кого метода основана на способности карденолидов вызывать в токсических дозах остановку сердца животных в стадию систолы. Их активность оценивают по сравнению с активностью стандарт­ных препаратов и выражают в единицах действия (ЕД) — кошачих (КЕД), лягушачих (ЛЕД), голубиных (ГЕД).

Известно значительное число методов, в основе которых лежит титриметрическое, фотометрическое, флюориметрическое и поля­рографическое определение кардиостероидов.

Химические методы

Кислотно-основное титрование в неводной среде (подгруппа строфанта).

.

Физико-химические методы

1. УФ-спектрофотометрический (используется при анализе сырья и стандартного вещества при 217—219 нм).

2. Фотометрический метод:

а) целанид — с ксантгидроловым реактивом;

б) реактив Татье — 2,4-динитрофенилсульфон — рекомендуется для анализа сырья, лекарственных веществ и лекарственных пре­ паратов (ГФ XI) (реакция на пятичленное лактонное кольцо).

3. Хроматографические методы (ВЭЖХ, ГЖХ).

4. Флюориметрические методы анализа.

.

Так, при действии на гитоксин фосфорной кислоты образуется диангидрогитоксин, который под влиянием УФ-света флюоресци­рует. При этом интенсивность флюоресценции пропорциональна концентрации гликозида, что позволяет проводить количественную оценку. Необходимо сопоставление химических и физико-хими­ческих методов с результатами биологических методов.

Испытание на чистоту. Чистота характеризуется различными физико-химическими па­раметрами (удельное вращение, ИК- и УФ-спектры, Т^). Кроме того, регламентируется содержание влаги (способствует гидролизу полуацетальной связи), сульфатной золы и тяжелых металлов (фак­торы, катализирующие окисление препаратов). Для оценки добро­качественности инъекционных растворов дополнительно оценива­ют их прозрачность и цветность.

Особое внимание обращают на наличие примесей посторонних гликозидов. Это относится прежде всего к ЛС, полученным из рас­тений, содержащих несколько сходных по структуре сердечных гли­козидов. Примесь посторонних стероидов обнаруживают с помощью бумажной хроматографии по величине R_f и флюоресценции пятен.

Хранение

Список А. В хорошо укупоренных банках оранжевого стекла, в сухом, защищенном от света месте.