3. Определение прозрачности и степени мутности жидкостей Определение окраски жидкостей

При оценке качества ряда ЛС предусмотрено определение про­зрачности, бесцветности, степени мутности или окраски их раство­ров. Прозрачным считается раствор, в котором не наблюдается при­сутствия нерастворенных частиц, кроме единичных волокон. Раствор сравнивают с растворителем, взятым для приготовления данной жид­кости, на черном фоне. Бесцветными считаются жидкости, не отли­чающиеся по цвету от воды, а при испытании иных растворов — от взятого растворителя. Испытание проводят, сравнивая жидкости при дневном отраженном свете на матово-белом фоне.

Если необходимо определить количество менее растворимых, чем лекарственное вещество, примесей или количество окрашенных примесей, растворы сравнивают с эталонами мутности и цветнос­ти. Приготовление эталонных растворов описано в общих ФС: «Оп­ределение прозрачности и степени мутности жидкостей» и «Опре­деление окраски жидкостей». При определении степени окраски или мутности жидкости берут в равных объемах (не менее 5 мл). Пробирки, в которых проводится определение, должны быть оди­накового диаметра, а их стекло — одинаковой окраски.

Освоение методик анализа чистоты ЛС студентами осуществля­ется на примере воды очищенной.

Вода очищенная. Aqua purificata

Вода очищенная получается методом дистилляции, обратным осмосом, ионным обменом и другими методами. Это наиболее ча­сто используемый растворитель для лекарственных веществ. На воде очищенной готовят микстуры, жидкости для наружного примене­ния. На воде для инъекций готовят инъекционные растворы, глаз­ные капли.

Вода очищенная должна соответствовать определенным требо­ваниям в отношении чистоты. Это должна быть бесцветная, про­зрачная жидкость без запаха и вкуса, с рН в пределах 5—7. Опреде­ление, в соответствии с требованиями ГФ, должно проводиться потенциометрическим методом.

В воде очищенной определяют 0 сухой остаток после выпарива­ния 100 мл. После высушивания при 100-105 °С до постоянного веса остаток не должен превышать 0,001% (1 мг в 100 г воды) В воде очищенной не должно быть восстанавливающих вещест; (остатки микроорганизмов). Это определение проводят путем кипячения 100 мл воды, 1 мл 0,01 н. раствора КМп0₄ и 2 мл разведен ной H₂S0₄ в течение 10 мин. Розовая окраска раствора должна со храниться, а в случае присутствия восстанавливающих веществ, он; исчезнет:

Вода легко поглощает С0₂. В воде очищенной этого примесного вещества не должно быть. Обнаруживают его по помутнению в присутствии известковой воды [Са(ОН)₂]. Определение ведут в те­чение 1 ч в закрытом сосуде, заполненном доверху равными объё­мами испытуемой воды и воды известковой. Помутнение указыва­ет на наличие СО, в воде очищенной:

В воде очищенной должны отсутствовать нитраты и нитриты, которые определяют по посинению раствора дифениламина (хи­мизм — см. стр. 14,15).

Раствор дифениламина готовят на концентрированной H₂S0₄.

В воде очищенной допускается содержание примесного иона аммония в пределах не более 0,00002%. Для оценки регламентиро­ванного количества аммиака в воде необходимо использовать эта­лонный раствор, содержащий 0,00002% аммиака. В испытуемой воде и в эталонном растворе проводят реакцию с реактивом Несслера (раствор K₂HgI₄ в КОН). Окраска в испытуемой воде не должна быть интенсивнее, чем в эталонном растворе:

В воде очищенной должны отсутствовать хлориды, сульфаты, ионы кальция и тяжелых металлов. Хлорид-ионы открывают по реакции с раствором AgN0₃ в присутствии HNO₃, (химизм - см. с. 18).

Не должно быть помутнения или опалесценции. Азотная кисло­та делает реакцию специфичной, т.к. осадки AgN0₃ с другими иона­ми (за исключением В г^- и 1~-ионов) в HN0₃ растворяются.

Сульфаты обнаруживают по реакции с раствором ВаС1₂ в при­сутствии НС1, в которой растворяются осадки иона бария с други­ми ионами, например S0₃²~, С0₃²~ (химизм — см. с. 14, 18). Не должно быть помутнения.

Ионы кальция обнаруживают по реакции с раствором оксалата аммония в присутствии аммиачного буфера, создающего оптималь­ные условия для реакции, рН 6,0 — 7,5 (химизм — см. с. 18). Не должно быть помутнения.

Ионы тяжелых металлов обнаруживают по реакции с раствором натрия сульфида в среде кислоты уксусной. Данная реакция по­зволяет выявить ионы тяжелых металлов, дающие с 5²~-ионами тем­ные осадки. Поскольку концентрация ионов крайне мала, наличие примесей ионов тяжелых металлов характеризуется появлением бурого окрашивания:

Микробиологическаячистота должна соответствовать требова­ниям, предъявляемым к питьевой воде не более 100 микроорганиз­мов в 1 мл при отсутствии бактерий семейств Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. Испытания проводят в соответствии с ФС «Испытание на микробиологическую чистоту».

Хранится вода очищенная в закрытых емкостях, изготовленных из материалов, не изменяющих свойства воды и защищающих ее от инородных частиц и микробиологических загрязнений.

Вода для инъекций — Aqua pro injectionibus

Вода для инъекций должна отвечать требованиям, предъявляе­мым к воде очищенной. Кроме того, она должна быть апирогенной, не содержать антимикробных веществ и других добавок. Оп­ределение пирогенности проводят в соответствии с ФС «Испытание на пирогенность».

Для определения пирогенности инъекционных препаратов (и в том числе воды для инъекций) в настоящее время наряду с испыта­ниями на кроликах используют ЛАЛ-реактив. В ФС «Бактериаль­ные эндотоксины» описаны требования к ЛАЛ-реактиву, процеду­ра анализа, расчет предельного содержания бактериальных эндотоксинов.ЛАЛ-тест основан на способности лизата амебоцитов (клеток крови) мечехвоста Limulus polyphemus (Лизат Амебоцитов Лиму-

люс — ЛАЛ-реактив) специфически реагировать с эндотоксинами бактерий (липополисахаридами). Этот тест может быть использо­ван в медицине для ранней диагностики заболеваний, вызванных грамотрицательными бактериями. Реакция между эндотоксинами и лизатом дает помутнение реакционной смеси и увеличение ее вязкости вплоть до образования плотного геля. Такой результат является доказательством присутствия эндотоксинов. Анализ на­зывается гель-тромб-тестом и используется для определения соот­ветствия реального содержания бактериальных эндотоксинов пре­дельному их содержанию, указанному в частной статье ГФ (качественный анализ), а также для определения содержания бак­териальных эндотоксинов в испытуемом препарате (количествен­ный анализ).

Основным методом проведения анализа на соответствие показа­телю «Бактериальные эндотоксины» является качественный анализ (при отсутствии других указаний). Этот метод является также ар­битражным.

ЛАЛ-реактив представляет собой лиофилизированный препарат. Вода для ЛАЛ-теста должна соответствовать требованиям, предъяв­ляемым к воде для инъекций и не содержать бактериальные эндо­токсины в количествах, определяемых используемым ЛАЛ-реакти-вом в данном тесте.

Используют воду для инъекций свежеприготовленную или хра­нящуюся не более 24 ч при температуре 5—10 °С или 80—95 °С в закрытых ёмкостях, изготовленных из материалов, не изменяющих свойства воды, защищающих воду от попадания механических вклю­чений и микробиологического загрязнения.

Преимущество данного теста перед испытанием на кроликах зак­лючается в его высокой чувствительности. Кроме того, определе­ние не требует много времени — результат может быть получен через 30—60 мин.