biol_pract

Г – вирус гриппа – крупный РНК-содержащий вирус животных, помимо белкового капсида у него имеется мембранная оболочка – липидный слой с выступающими из него включениями вирусного гликопротеина.

22

7. Рассмотрите схему размножения ретровируса на примере вируса иммунодефицита человека (рис. 1.15). Объясните, как происходит образование ДНК-копии, почему этот процесс называется «обратной транскрипцией». Объясните, почему нуклеиновая кислота вируса может долгое время оставаться в клетке хозяина и передаваться при ее делении в другие клетки?

Рис. 1.14. Электронные

микрофотографии вирусных частиц

Рис. 1.15. Жизненный цикл ретровируса

23

Какими цифрами обозначены следующие процессы: образование нового вириона (формирование наружной вирусной оболочки с образованием новой вирусной частицы); синтез вирусной ДНК на матрице РНК вируса; транскрипция провирусной ДНК в иРНК; сборка сердцевины вируса (капсида и молекул РНК); проникновение вируса в клетку хозяина; репликация вирусной ДНК; трансляция в цитоплазму клетки вирусных белков на матрице иРНК; интеграция вирусной ДНК

вгеном клетки хозяина в качестве провируса?

8.Познакомьтесь со строением гетеротрофной бактерией (рис. 1.16). Какими цифрами обозначены: рибосомы, клеточная стенка, жгутик, цитоплазма, плазмалемма, мезосома, нуклеоид?

Рис. 1.16. Схема строения бактерии

9. Познакомьтесь со строением цианобактерии (рис. 1.17). Какими цифрами обозначены: цитоплазма, липидные глобулы, фотосинтезирующие мембраны (ламеллы), плазмалемма, фосфатная гранула, полисома, желатинозный слой, белковая гранула, нуклеоид?

Рис. 1.17. Схема строения цианобактерии

24

Лабораторный практикум

1.1. Ультратонкое строение бактериальной клетки.

Бактериофаг Т4. Рассмотрите бактериальные клетки Escherichia coli: в нормальном здоровом состоянии (А) и через час после заражения бактериофагом Т4 (рис. 1.18). Познакомьтесь с электронограммой и схемой строения бактериальной клетки (рис. 1.19).

! Зарисуйте бактериальную клетку Escherichia coli в нормальном состоянии и с вирусными частицами бактериофага Т4.

1.2. Морфология бактерий. Для изучения морфологии бактерий приготовьте настои из различных естественных материалов: мяса, рыбы, белка яйца, навоза, сена, фруктов и овощей. Небольшое количество материала измельчите, поместите в склянку, на кончике скальпеля добавьте немного мела и залейте водопроводной водой на 2/3 объема склянки. Склянку с настоем поместите в термостат при 25-28°С на 3-5 дней. Из жидкости настоя (наиболее богата микрофлора в настоях мяса, рыбы, навоза) приготовьте два препарата: один

– прижизненный (раздавленная капля), второй – постоянный (мазок).

Для приготовления прижизненного препарата микроорганизмов на предметное стекло микробиологической петлей нанесите каплю жидкости одного из приготовленных настоев. Покровное стекло поставьте на ребро у края капли и постепенно опустите на нее. При осторожном опускании покровного стекла между стеклами не остается пузырьков воздуха, мешающих микроскопированию.

Рис.1.18. Микрофотография бактериальной клетки Escherichia coli:

нормальная здоровая (А) и через час после заражения бактериофагом Т4 (Б)

25

Капля должна быть небольшой, чтобы после «раздавливания» жидкость не выступала за края покровного стекла. Исследуйте препарат в светлом и темном поле, пользуясь объективом ВИ-40. Для приготовления мазка предметное стекло, хранящееся в смеси этилового спирта и серного эфира, высушите на пламени спиртовки. Бактериологической петлей, простерилизованной на пламени спиртовки, по центру предметного стекла нанесите мазок исследуемого материала (если культура микроорганизма выращена на плотной питательной среде, предварительно на стекло нанесите каплю водопроводной воды, в нее бактериологической петлей внесите небольшое количество материала и сделайте мазок).

Рис. 1.19. Схема ультратонкого строения и микрофотография

бактериальной клетки

Мазок высушите на воздухе и зафиксируйте термически, проводя стекло 2-3 раза через пламя спиртовки мазком вверх (для химической фиксации мазка: смесь этилового спирта и серного эфира в соотношении 1:1 нанесите на мазок на 10 мин). Фиксированный мазок окрасьте, залив его поверхность раствором красителя (метиленовый синий, фуксин, генцианвиолет) на 2-3 мин. Затем краситель с мазка смойте водой, вытрите нижнюю сторону препарата фильтровальной бумагой, верхнюю осторожно обсушите с боков, не дотрагиваясь до мазка. Препарат окончательно досушите на воздухе или высоко над пламенем спиртовки. Готовый мазок микроскопируйте, используя объектив МИ-90.

!микроорганизмов, обратите внимание на форму, взаимное расположение клеток и на соотношение размеров бактерий, нарисункеобозначьтеформубактерий(рис. 1.20).зарисуйте несколькопрепараты,Просматривая

26

1.3. Основные формы бактерий. Познакомьтесь с морфологическими особенностями эубактерий (рис. 1.20) и определите, к какой группе они относятся: 1 – кокки, 2 – диплококки, 3 – стрептококки, 4 – стафилококки, 5 – палочки, или бациллы, 6 – вибрионы, 7 – стебельковые бактерии (рис. 1.21).

Рис. 1.20. Микрофотографии

бактерий

Рис. 1.21. Основные формы бактерий

(1 – кокки, 2 – диплококки, 3 – стрептококки, 4 – стафилококки, 5 – палочки, или бациллы, 6 – вибрионы, 7 – стебельковые бактерии)

27

1.4. Мицелий гриба мукора. Мукор – сапрофитный гриб, живущий во влажных условиях. Мукор широко распространен в природе как деятельный компонент почвенной микрофлоры.

В лаборатории мукор можно вырастить на хлебе или на овощах во влажной камере. Для этого оберните фильтровальной бумагой чашку Петри и положите ее дном кверху в кристаллизатор, на дно которого налейте воду. На чашку Петри положите кусок хлеба или вареных овощей и засейте спорами, нанося споры препаровальной иглой. Затем кристаллизатор накройте стеклом и поставьте в термостат при температуре +23–27°С. Через двое-трое суток на поверхности питательной среды появится белый пушок, позднее обильно разрастающийся. Еще через сутки на концах гиф появляются черные головки величиной менее булавочной – материал готов для занятий.

Рис. 1.22. Сапрофитный гриб – мукор

(1 – мицелий; 2 – спорангиеносец; 3 – спорангий)

Приготовьте (или используйте постоянный) микроскопический препарат мицелия мукора. Рассмотрите строение мицелия: в нем нет поперечных перегородок, видна бесцветная зернистая цитоплазма и более или менее крупные вакуоли, некоторые из гиф гриба оканчивается черными головками – это спорангии, сидящие на спорангиеносцах (рис. 1.22).

1.5. Клетки кожицы листа валлиснерии. Для приготовления препарата на любой из сторон листа валлиснерии скальпелем или препаровальной иглой надрежьте кожицу, кусочек которой сдерите с листовой пластинки, поместите в каплю воды на предметное стекло, осторожно накройте покровным стеклом и рассмотрите при малом и большом увеличении микроскопа (рис. 1.23).

Клетки кожицы либо вытянуты по длине листа, либо имеют квадратные или многоугольные очертания. Оболочки клеток тонкие, прозрачные, плотно примыкающие одна к другой. В клетках видны многочисленные зеленые тельца – хлоропласты, или хлорофилловые зерна. Работая микровинтом, рассмотрите клетку с поверхности (в

28

плане) или на некоторой глубине (в оптическом разрезе). В некоторых клетках видно ядро. Оно представляет собой светло-серое тельце с одним сильно преломляющим свет и поэтому хорошо заметным ядрышком. Цитоплазма не видна, не удается различить границы находящейся в клетке вакуоли с клеточным соком.

При внимательном наблюдении можно видеть, что пластиды перемещаются вдоль клеточных стенок. Это происходит вследствие движения вокруг центральной вакуоли цитоплазмы. Такое движение называют круговым, или ротационным (циклоз). Движение цитоплазмы играет важную роль в осуществлении обменных процессов и распределении веществ внутри клетки. В естественных условиях цитоплазма движется очень медленно, под влиянием физических или химических раздражителей движение обычно ускоряется. Движение можно ускорить, если лист на несколько

1 – оболочка клетки; 2 – хлоропласты; 3 –минут положить в теплую воду

ядро; 4 – направления движенияили добавить в нее каплю спирта.

цитоплазмы; 5 – цитоплазма; 6 – вакуоль

1.6. Клетки крови лягушки. Рассмотрите мазок крови лягушки (фиксация метиловым спиртом, окраска гематоксилин-эозином). Большинство клеток мазка принадлежит эритроцитам (рис. 1.24). Они имеют овальную форму и овальное плотное ядро, интенсивно окрашивающееся гематоксилином в сине-фиолетовый цвет. Цитоплазма этих клеток закрашивается эозином в оранжево-красный цвет за счет гемоглобина, растворенного в теле этой клетки.

29