- •Федеральное агентство по образованию
- •Биохимия
- •В.В. Шапкарин, а.П. Королев, с.Б. Гридина, е.П. Зинкевич
- •Оглавление
- •Глава 1. Методы исследования в биохимии………………………………….…4
- •Глава 2. Белки и аминокислоты…………………………………………………8
- •Глава 3. Ферменты………………………………………………………………..35
- •Глава 4. Углеводы и их обмен…………………………………………………...56
- •Глава 5. Белки и их обмен ……………………………………………………….62
- •Глава 6. Липиды и их обмен ……………………………………………………..63
- •Глава 7. Витамины ………………………………………………………………..71
- •Введение
- •Глава 1. Методы исследования в биохимии
- •1.1. Указания к выполнению лабораторных работ
- •Глава 2. Белки и аминокислоты
- •2.1. Цветные реакции на белки и аминокислоты
- •Цветные реакции на белки и аминокислоты
- •2.2. Методы количественного определения белка
- •Определение белкового азота методом кьельдаля
- •Разведение стандартного раствора белка
- •2.3. Выделение белков из биологических объектов
- •2.4. Реакции осаждения белков
- •Осаждение белков при нагревании
- •Осаждение белков при нагревании
- •Осаждение белков минеральными кислотами
- •Осаждение белков солями тяжелых металлов
- •2.5. Разделение смеси аминокислот методом хроматографии на бумаге
- •Глава 3. Ферменты
- •3.1. Выделение ферментов и обнаружение их действия
- •Продукты гидролиза крахмала
- •Выделение амилаз из солода
- •Выделение сахаразы из дрожжей
- •3.2.Специфичность действия ферментов
- •3.3. Сравнение действия неорганических катализаторов и ферментов
- •3.4. Факторы, влияющие на скорость ферментативных реакций (на активность ферментов)
- •3.5. Выделение α- и β- амилаз из солода и определение их активности
- •3.6. Определение активности амилаз по Вольгемуту
- •3.7. Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •3.8. Определение активности каталазы (по а.Н. Баху и а.И. Опарину)
- •Глава 4. Углеводы и их обмен
- •4.1 Действие амилазы на сырой и вареный крахмал
- •4.2. Анаэробное окисление углеводов
- •Глюкоза
- •О алкогольдегидрогеназа
- •Глава 5. Белки и их обмен
- •5.1. Определение активности протеаз (по методу Ансона)
- •Глава 6. Липиды и их обмен
- •6.1. Определение йодного числа жира (методом Гануса)
- •6.2.Определение кислотного числа жира
- •6.3. Определение активности липазы клещевины
- •Глава 7. Витамины
- •7.1. Качественные реакции на витамин а
- •7.2. Качественные реакции на витамин д
- •7.3. Качественная реакция на витамин в1 (с диазореактивом)
- •7.4. Качественная реакция на витамин в2
- •7.5. Качественная реакция на витамин (в5) рр
- •7.6. Качественная реакция на витамин с
- •7.7. Количественное определение витамина с
- •Библиографический список
- •Биохимия
- •650056, Г. Кемерово, б-р Строителей, 47
- •650010, Г. Кемерово, ул. Красноармейская, 52
1.1. Указания к выполнению лабораторных работ
Перед выполнением работы необходимо внимательно ознакомиться с методикой её проведения и предположить ожидаемый результат, вытекающий из теоретического обоснования химизма реакции или процесса.
Выполнение работ знакомит студента с методами качественных и количественных исследований сырья и готовой продукции, с основами биотехнологии, дополняет и закрепляет теоретический материал наиболее сложных разделов изучаемой дисциплины.
В начале раздела и перед работой излагаются краткие теоретические обоснования по химии, биологической роли и метаболизму органических веществ. К каждой работе дано описание химической реакции или процесса, ожидаемый результат и практическое значение.
Выполняемую работу обязательно записать в тетрадь с указанием номера, названия, цели работы, принципа метода, химизма происходящих реакций или процессов, схемы исследования и полученных результатов. По результатам работы произвести расчет или оформить полученные данные по предложенной схеме и сделать вывод.
Контрольные вопросы, приведенные в учебном пособии к каждой лабораторной работе, очерчивают минимум знаний, необходимых для защиты выполненной и оформленной работы.
Правила безопасной работы в лаборатории биохимии
1. Работу в лаборатории необходимо выполнять в халатах.
Всю посуду перед выполнением работы необходимо вымыть.
Концентрированные кислоты, щелочи и другие сильнодействующие реактивы набирать пипеткой с грушей или отмерять цилиндром.
Все опыты с концентрированными кислотами, щелочами и легкоиспаряющимися веществами производить только в вытяжном шкафу.
Если пролили концентрированную кислоту или щелочь, то их надо нейтрализовать толченым мелом или раствором кислоты, соответственно, а затем смыть водой.
При попадании концентрированной кислоты или щелочи на кожу, необходимо быстро смыть водой, а затем соответственно 2 % раствором бикарбоната натрия или 2 % раствором борной кислоты.
Запрещается оставлять без присмотра включенные электроприборы.
Категорически запрещается принимать в лаборатории пищу, пользоваться лабораторной посудой для питья.
При работе с химическими веществами нельзя пробовать их на вкус.
Глава 2. Белки и аминокислоты
Белки – высокомолекулярные биологические полимеры, структурными (мономерными) звеньями которых служат -аминокислоты. Аминокислоты в белках соединены друг с другом пептидной связью, образование которой происходит за счет карбоксильной группы, стоящей у -углеродного атома одной аминокислоты и -аминной группы другой аминокислоты с выделением молекулы воды. Мономерные звенья белков называют остатками аминокислот.
Кроме белков, из аминокислот построены пептиды - соединения, содержащие до 20 аминокислотных остатков и полипептиды, содержашщие от 20 до 50 аминокислотных остатков с молекулярной массой до 6 тыс. ед. Массовая доля белков в биологических объектах колеблется в широких пределах: молоке – 2,5-5 %, мышечной ткани – 18-22 %, содержимом куриного яйца – 12-14%, семенах зерновых культур (от сухой массы) – 12- 40 % (и более), картофеле – 0,7-4,6 %, свекле, моркови и других корнеплодах 0,9-1,6 %, фруктах и ягодах – 0,3-2 %, грибах – 3-4 %.
Пептиды, полипептиды и белки отличаются не только количеством, составом но и последовательностью аминокислотных остатков, физико-химическими свойствами и функциями, выполняемыми в организме.
Молекулярная масса белков варьирует от 6 тыс. до 1 млн. и более. Химические и физические свойства белков обусловлены химической природой и физико-химическими свойствами радикалов, входящих в них остатков аминокислот. Способы обнаружения и количественного определения белков в биологических объектах и продуктах питания, а также выделения их из тканей и биологических жидкостей основаны на физических и химических свойствах этих соединений.