Алгоритм лабораторної роботи:

1. Сироватку крові обробляють відповідно до ходу роботи.

2. Оптичну щільність досліджуваних розчинів визначають фотометричним методом.

3. Результати досліджень виражають в умовних одиницях.

4. У висновках отриманий результат порівнюють з нормою.

Методика проведення експерименту Визначення сіалових кислот у сироватці крові

Принцип методу: метод базується на кольоровій реакції, яка має перебіг при нагріванні сіалової кислоти (N-ацетилнейрамінової) з реактивом Гесса. Інтенсивність бурувато-рожевого забарвлення залежить від концентрації сіалових кислот.

Хід роботи: до 1 мл сироватки крові в центрифужні пробірки додають 1 мл 10% розчину трихлороцтової кислоти. Струшують. Після цього пробірки ставлять у киплячу водяну баню на 5 хв і охолоджують. Це призводить до вивільнення зв’язків N-ацетилней-рамінової кислоти з білковою частиною молекули глікопротеїнів. Після центрифугування до 0,4 мл надосадової рідини додають 5 мл реактиву Гесса і знову кип’ятять у киплячій водяній бані протягом 30 хв. При цьому з’являється бурувато-рожеве забарвлення. Після охолодження фотометрують на ФЕКу у кюветі з товщиною шару 10 мм проти води при зеленому світлофільтрі (540 нм). Одержану величину екстинкції перемножують на 1000. Результат дослідження подають в у. од., виражених через екстинкцію.

Клініко-діагностичне значення. У нормі величина її коливається від 100 до 195 умовних одиниць, що відповідає вмісту сіалових кислот від 550 до 790 мг/л (0,7 г/л N-ацетилнейрамінової кислоти).

Збільшення сіалових кислот у крові спостерігається при ревматиз-мі, туберкульозі, інфаркті міокарда, злоякісних пухлинах кісткової тканини, раку легень.

Після проведення експериментальної частини роботи ви повинні оформити протокол лабораторної роботи.

Виконайте завдання та перевірте правильність їх розв’язання з еталоном відповіді.

Завдання 1

До косметолога звернувся пацієнт з проханням позбавити його татуювання на плечі. Яка речовина, що міститься в сполучній тканині, обмежує поширення барвника і робить можливим такий вид “живопису”?

A. Гіалуронова кислота.

B. Гамма-глобулін.

C. Фібронектин.

D. Гепарин.

E. Еластин.

Еталон відповіді: А.

Завдання 2

При парадонтозі відбувається деструкція білкових та полісахарид-них компонентів сполучної тканини. Який з наведених білків входить до складу сполучної тканини?

A. Колаген.

B. Альбумін.

C. Трансферин.

D. Церулоплазмін.

E. Антитрипсин.

Еталон відповіді: А.

Завдання 3

Підвищена ламкість судин, руйнування емалі й дентину зубів при цинзі обумовлені порушенням дозрівання колагену. Який етап модифікації проколагену порушено при цьому авітамінозі?

A. Гідроксилювання проліну.

B. Утворення поліпептидних ланцюгів.

C. Глікозилювання гідроксилізинових залишків.

D. Видалення з проколагену С-кінцевого пептиду.

E. Відщеплення N-кінцевого пептиду.

Еталон відповіді: А.

Завдання 4

До фібрилярних елементів сполучної тканини належать колаген, еластин та ретикулін. Назвіть амінокислоту, яка входить тільки до складу колагену і визначення якої в біологічних рідинах використовується для діагностики захворювань сполучної тканини.

A. Гідроксипролін.

B. Пролін.

C. Гліцин.

D. Лізин.

E. Фенілаланін.

Еталон відповіді: А.

Завдання 5

У сироватці крові пацієнта встановлено підвищення активності гіалуронідази. Визначення якого біохімічного показника сироватки крові дозволить підтвердити припущення про патологію сполучної тканини?

A. Сіалових кислот.

B. Білірубіну.

C. Сечової кислоти.

D. Глюкози.

E. Галактози.

Еталон відповіді: А.

Завдання 6

Заповнити таблицю “Хімічний склад сполучної тканини”

№ пор.	Група хім. компонентів	Назва хімічної сполуки	Особливості будови	Патологічний або фізіологічний стан	Зміна будови або метаболізму

Короткі методичні вказівки до роботи студентів на практичному занятті

Заняття починається з розв’язання навчальних задач, після чого необхідно виконати досліди лабораторної роботи.

У кінці заняття проводяться тестовий контроль, аналіз результатів роботи, в яких беруть участь усі студенти під керівництвом викладача.