Алгоритм лабораторної роботи:

1. Дослідну пробу обробляють відповідно до нижченаведеної методики експерименту.

2. За стандарт використовують нерозведений трансформуючий розчин.

3. Оптичну щільність дослідної та стандартної проби вимірюють колориметричним методом.

4. Концентрацію гемоглобіну у досліджуваній сироватці крові обчислюють за формулою.

5. У висновках порівнюють отриманий результат з нормою.

Методика проведення експерименту

1 Визначення гемоглобіну в крові гемоглобінціанідним методом із застосуванням ацетонціангідрину

Принцип методу: гемоглобін при взаємодії з червоною кров’яною сіллю окислюється до метгемоглобіну (гемоглобін-ОН), який утворює з ацетнціангідрином забарвлений ціанмет-гемоглобін, інтенсивність забарвлення якого пропорційна вмісту гемоглобіну.

Хід роботи: 0,02 мл крові вливають у пробірку з 5 мл трансфор-муючого розчину (розведення у 251 раз), добре перемішують. Колори-метрують через 10 хв при довжині хвилі 540 нм (зелений світло-фільтр) у кюветі з товщиною шару 1 см проти контрольної проби. Стандартний розчин гемоглобін ціаніду застосовують нерозведеним. Вимірюють за тих самих умов, що й дослідну пробу.

Розрахунок вмісту гемоглобіну проводять за формулою

Ед

Нb в г% = · Сст · К · 0,01,

Ест

де Нb - вміст гемоглобіну, г%;

Ед і Ест - екстинкція відповідно дослідної і стандартної проб;

Сст - концентрація гемоглобінціаніду в стандартному розчині, 150 г/л або 59,75 мг%;

К - коефіцієнт розведення крові;

0,01 - коефіцієнт для перерахунку, мг% в г/л.

Клініко-діагностичне значення

У нормі концентрація гемоглобіну:

• чоловіки - 135-180 г/л,

• жінки - 120-140 г/л.

Зниження вмісту гемоглобіну в крові характеризує собою анемію, а різке падіння його несумісне з життям як наслідок кисневого голодування, так і порушення тканинного обміну. Частіше трапляється зниження вмісту гемоглобіну, рідше підвищення.

Значне зниження характерне для гострої крововтрати, гіпопластичної анемії на стадії гемолітичної кризи. Збільшення вмісту гемоглобіну в крові можуть спостерігати при еритемії, серцевій декомпенсації, мієлопроліферативних захворюваннях.

Після проведення експериментальної частини роботи ви повинні оформити протокол лабораторної роботи.

Виконайте завдання та перевірте правильність їх розв’язання з еталоном відповіді.

Завдання 1

У немовляти внаслідок неправильного вигодовування виник вира-жений пронос. Одним із останніх його наслідків є екскреція великої кількості натрію гідрокарбонату. Яка форма порушення кислотно-основного стану спостерігається в цьому випадку?

А. Не порушений кислотно-основний стан.

В. Метаболічний алкалоз.

С. Респіраторний ацидоз.

Д. Респіраторний алкалоз.

Е. Метаболічний ацидоз.

Еталон відповіді: Е.

Завдання 2

Під час дії окиснювачів (гідрогену пероксиду, оксиду азоту та ін.) гемоглобін утворює сполуку, до складу якої входить Fe³⁺, та вона не здатна переносити кисень. Як називається ця сполука?

А. Карбгемоглобін.

В. Карбоксигемоглобін.

С. Метгемоглобін.

Д. Оксигемоглобін.

Е. Глікозильований гемоглобін.

Еталон відповіді: С.

Завдання 3

У хворого діагностовано α-таласемію. Які порушення спостеріга-ються в синтезі гемоглобіну при цьому захворюванні?

А. Пригнічення синтезу α-ланцюгів.

В. Пригнічення синтезу β-ланцюгів.

С. Пригнічення синтезу γ-ланцюгів.

Д. Пригнічення синтезу δ-ланцюгів.

Е. Пригнічення синтезу δ- та β-ланцюгів.

Еталон відповіді: А.

Завдання 4

У хворого – серпоподібно-клітинна анемія. Заміна якої амінокислоти в поліпептидному ланцюзі Hb на валін призводить до цього захворювання?

А. Глутамінової.

В. Аспарагінової.

С. Лейцину.

Д. Аргініну.

Е. Треоніну.

Еталон відповіді: А.

Завдання 5

Людина в стані спокою штучно примушує себе дихати часто і глибоко протягом 3-4 хв. Як це відбивається на кислотно-основному стані організму?

А. Виникає метаболічний алкалоз.

В. Виникає дихальний ацидоз.

С. Виникає дихальний алкалоз.

Д. Виникає метаболічний ацидоз.

Е. Кислотно-основний стан не змінюється.

Еталон відповіді: С.

Завдання 6

У дитини на 3-й місяць після народження розвинулася тяжка форма гіпоксії (задишка, синюшність). Який із процесів гемоглобіноутворен-ня порушено?

А. Заміна фетгемоглобіну на гемоглобін М.

В. Заміна фетгемоглобіну на гемоглобін S.

С. Заміна фетгемоглобіну на глікозильований гемоглобін.

Д. Заміна фетгемоглобіну на метгемоглобін.

Е. Заміна фетгемоглобіну на гемоглобін А.

Еталон відповіді: Е.

Завдання 7

Заповнити таблицю: “Буферні системи крові”

№ пор.	Назва буферної системи	Компоненти	Ємність, %	Механізм дії
				при рН<7	при рН>7

Завдання 8

Заповнити таблицю: “Показники КОС”

№ пор.	КОС	Показники крові		рН стосовно норми	Причини патології
		НСО3-	Н2СО3

Короткі методичні вказівки до роботи студентів на практичному занятті

Заняття починається з розв’язання навчальних задач, після чого необхідно виконати досліди лабораторної роботи.

У кінці заняття проводяться тестовий контроль, аналіз результатів роботи, в яких беруть участь усі студенти під керівництвом викладача.