68. Гонококк. Микробиологическая диагностика.

Род Neisseria, вид N. gonorrhoeae

Впервые описаны А. Нейссером в 1879 году.

Морфология

• бобовидной формы, диплококки

• окружены микрокапсулой, жгутиков нет, спор не образуют, есть пили

• в клеточной стенке имеется наружная мембрана

• пили делят гонококки на 16 АГ вариантов

• культивация на пит. средах с нативным белком (сыворотка крови) и при 3-5% СО₂

• на асцит-агаре дают ровные прозрачные колонии

• ферментируют только глюкозу, образуют каталазу и цитохромоксидазу

Антигены

- очень изменчивая из-за 16 антигенных вариантов пилей (фазовая вариабельность)

Патогенность и патогенез

• прикрепляются к цилиндрическому эпителию влагалища, шейки матки, прямой кишке, сперматозоидам, за счет пилей и белков наружной мембраны клеточной стенки

• характерная особенность проникать в лимфоциты

• липоолигосахаридная часть – токсин

• капсулярные ПС – подавляют фагоцитоз

• характерная особенность проникать в лимфоциты и размножаться там

• липоолигосахаридная часть клеточной стенки – токсин

• капсулярные ПС – подавляют фагоцитоз

• прикрепляются к цилиндрическому эпителию влагалища, шейки матки, прямой кишке, сперматозоидам и простейшим, за счет пилей и белков наружной мембраны клеточной стенки что приводит к развитию: острого уретрита, цервицита, поражения шейки матки, придатков, семенных пузырьков, простаты,. При экстрагенитальной локализации - прямая кишка, миндалины.

Вызывают острый уретрит, цервицит, поражения шейки матки, придатков, семенных пузырьков, простаты, прямую кишку, миндалины, бленнорею (конъюктивит) у новорожденных (при родах).

Иммунитет

• гуморальный иммунный ответ, однако образующиеся антитела не защищают

• главное это IgA, который подавляет прикрепление пилей к слизистой, но они не способны защитить от последующей популяции гонококков, что приводит к реинфекция и рецидивам, а также переходу в частые хронические формы

Лабораторная диагностика

• бактериоскопия

• нейтрофилы в виде «пчелиного роя»

• уретрит может вызывать еще и стафилококки, уреаплазмы, хламидии, гарднереллы. При этом возможны смешанные инфекции.

• применяется иммунофлюоресценция и ПЦР

Профилактика и лечение

• антибиотики: -лактамы и другие.

• вакцин нет

• для предупреждения бленнореи на конъюктиву новорожденным капают антибиотик (сульфацит натрия)

Спирохеты.

• G-, подвижные бактерии спиральной формы

• окрашиваются по Романовскому-Гимза

• покрыты многослойной наружной мембраной, под которой расположен протоплазматический цилиндр с цитоплазмой, окруженной мембраной и клеточной стенкой

• жгутики полностью находятся внутри клетки и обвиты вокруг нее

• аэробы или факультативные анаэробы, хемоорганотрофы

• используют в качестве источника Е – АМК, жирные кислоты

Трепонемы

1. Т. palladium – возбудитель сифилиса, открыт Ф. Шаудином и Э. Гофманом в 1905 году

2. T. pertenue – возбудитель фрамбезии

3. T. carateum – возбудитель пинты

Бледная трепонема (T. palladium)

Морфология и физиология

• микроаэрофил, имеет форму спирали, протоплазматический цилиндр закручен в 8-12 завитков

• от концов клетки – 3 жгутика

• окрашивается по Р-Г, но лучше рассматривать в фазовоконтрастном микроскопе

• на искусственных средах не растет

• культивируют в тканях яичка кролика, где она размножается и полностью сохраняет свои свойства

Антигены

• белки наружной мембраны,

• липопротеиды – перекрестно-реагирующие АГ, общие для человека и крупного рогатого скота (реакция Вассермана для серодиагностики сифилиса)

Патогенность и патогенез

Факторы вирулентности – белки наружной мембраны и ЛПС, проявляющие свои токсические свойства после освобождения из клетки.

Есть способность при делении выделять отдельные фрагменты, которые проникают в ткани

В патогенезе сифилиса выделяют три стадии:

1. первичный очаг – твердый шанкр в месте входных ворот, с последующим проникновением в лимфатические узлы, где возб. размножается – 6 недель (первичный сифилис).

2. генерализация инфекции, проникновение возб. в кровь, что приводит к кожным высыпанием 1-2 г.

3. инфекционные гранулемы, локализ. в органах и тканях – 1-2 годы – поражение ЦНС

Иммунитет

• гуморальный и клеточный иммунный ответ.

• образующиеся антитела не имеют протективных свойств

• клеточный иммунитет – фиксация возбудителя и образование гранулем

• могут образовываться трепонемовые цисты (в сосудах), L-формы,

• формируется ГЗТ (третичный сифилис)

Экология и эпидемиология

• антропонозная инфекция

• половой путь передачи

Лабораторная диагностика

• отделяемое твердого шанкра – микроскопия

• серодиагностика

РСК с трепонемным АГ

преципитации с неспецифическими АГ

(возможно ложноположительность результатов)

• РИФ

• ИФА

• иммуноблоттинг – исследование сыворотки больного с разными АГ трепонем

Другие патогенные трепонемы

Т. pertenue – возбудитель фрамбезии

• по многим биосвойствам не отличается от бледной трепонемы, но явл. зооантропонозом

1 стадия: появление на месте ВВИ болезненной язвочки или папилломы 2-3 мес.

2 стадия: генерализация процесса с кожными высыпаниями (малиноподобные узелки) 2-3 годы

3 стадия: дистрофические процессы в коже и костях

• Источник инфекции – больной человек, заболевание носит характер семейных вспышек

• Встречается в тропиках.

• Дети инфицируются через поврежденную кожу

• Бактериоскопический в первый период, серодиагностика далее

Лечение: пенициллин

T. carateum – возбудитель пинты

• по многим биосвойствам не отличается от бледной трепонем, антропоноз

• бытовой контакт и, возможно, через мошку

1 стадия: коричневая папула

2-3 стадия: на коже пятна разного цвета, гиперкератоз подошв и ладоней, поражение волос. Нарушение нервной, костной и ссс.

T. Bejel – возбудитель Беджеля

• хронический трепонематоз (эндемический сифилис), распространен в арабских странах

• не отличим от бледной трепонемы

• патогенез похож на сифилис и фрамбезию

1 стадия - сыпь на коже и слизистых оболочках в первый период, затем гуммы похожие на сифилитические

Источник инфекции – человек, бытовой путь заражения

Боррелии эпидемического (вшивого) возвратного тифа (В. recurrens)

• О. Обермейер, 1868

Морфология и физиология

• форма тонкой спирали с тремя крупными заостренными завитками

• окр. по Р-Г в сине-фиолетовый цвет, G-

• культивируют на питательных средах с животными белками

• хорошо размножаются в куриных эмбрионах

Антигены

• очень вариабельны из-за внутригеномных рекомбинация

• не нужна серологическая диагностика

Патогенность и патогенез

• в инвазии участвует белок наружной мембраны

• компонент клеточной стенки при лизисе становится эндотоксином

• после проникновения в клетки лимфомакрофагальной системы боррелии размножаются в них и затем поступают в кровь (первый лихорадочный приступ)

• в крови больного накапливаются спирохетолизины  выход эндотоксина

• боррелии могут менять Аг структуру и становиться нечувствительными к образовавшимся Ат

• при повторном поступлении в кровь – вторичный лихорадочный приступ.

• приступы повторяются 5-6 раз, до прекращения изменения Аг структуры

• в капиллярах внутренних органов могут скапливаться агрегаты боррелий и тромбоцитов  геморрагич. инфаркты

Иммунитет

• гуморальный иммунный ответ

• постинфекционный иммунитет нестойкий

• регистрируются случаи повторных инфекций

Экология и эпидемиология

• резервуар – больной человек

• переносчик – платяная вошь (боррелии проникают в кишечник вместе с кровью и разм. в гемолимфе)

• заражение только при втирании гемолимфы при расчесах

Лаб. диагностика и лечение

• кровь, взятая во время приступа

• микроскопический метод

• биопроба – отличие эпидемического (не вызывают заражение морской свинки кровью) от эндемического

• вакцин нет

• бета-лактамы

Боррелии эндемического (клещевого) возвратного тифа

(B. caucasica, B. persica, B. duttoni)

• переносятся клещами, паразитирующие в определенных эндемических очагах

• по морфологическим признакам схожи с B. recurrens, отличаются по Аг структуре

• резервуар – мышевидные грызуны разных видов

• переносчики – клещи рода Ornithodoros

• клещи могут передавать возбудителя трансовариально

• клиника схожа

Болезнь Лайма – B. burgdorferi

• передается иксодовыми клещами

• факторы вирулентности – адгезины (коллагенсвязывающий белок, урокиназасвязывающий белок)

• 3 подвида: по способности поражать разные ткани

• может перходить в хроническую форму при добавлении аутоиммунного компонента

• обнаружено 5 Аг, Ат к которым обладают протективными свойствами

Экология и эпидемиология

• в кишечнике, гемолимфе и слюне – в месте укуса размножение – кровь

Лаб диагностика

• иммунофлюресценция материала из места укуса

Сальмонеллы

Род Salmonella получил свое название по имени американского микробиолога Сальмона

Морфология и физиология

• G- мелкие палочки, окруженные микрокапсулой, подвижны за счет жгутиков

• низкая ферментативная активность

Антигены

• содержат О-аг (соматические), Н-аг (жгутиковые) и К-аг

• анализ Аг строения - основной компонент м/б диагностики сальмонелл ( в основу схемы Кауфманна-Уайта положена общность О-Аг, объединенных в серологические группы А, В, С etc)

• фазовые вариации сальмонелл происходят с большой частотой

• большинство сероваров сальмонелл названы по месту открытия или по животному

Salmonella tiphi & paratiphi

Открыты К.Эбертом в 1887 году

Патогенность и патогенез

Фактор вирулентности – Vi – антиген, капсульный п/с, защищающий их от фагоцитоза и комплемента

За счет капсулы S. tiphy прилипает к энтероцитам тонкой кишки  колонизация слизистой  при этом часть попадает в пейровы бляшки и фагоцитируется, где активно размножаются  лимфа  кровь бактериемия  желчный пузырь (желчь - элективная питательная среда)  duodenum  пейровы бляшки с Т-эффекторами  иммунное воспаление  разрыв стенки кишки  перитонит

Иммунитет

• Ат обеспечивают напряженный иммунитет

• SigA местный иммунитет

• устойчивы к факторам среды

Лабораторная диагностика

1. Бактериологическое исследование

а) Посев на среду Рапопорта или Эндо  регистрация изменений, окрас по Граму  высев на дифференциальную среду  характер колоний и реакция агглютинации на стекле со смесью сальмонеллезных сывороток

б) Посев среду обогащения Мюллера или селенитовую

в) посев на среду Расселя или трехсахарную среду  реакция агглютинации на стекле с поливалентными и монорецепторными сальм. сыворотками; фаготипирование; посев на пестрый ряд  ОТВЕТ

2. Сыворотка крови  серодиагностика  Реакция агглютинации Видаля, Vi-гемааглютинации

Профилактика и лечение

• химическая адсорбированная на геле окиси алюмининия тифопаратифозно-столбнячная вакцина (TABte): полные антигены сальмонелл брюшного тифа, паратифа А и В, столбнячного анатоксина

• вакцина, содержащая Vi-Аг S. typhi.

Сальмонеллы – возбудители энтероколитов

S. typhimurium, S. enterididis, S. anatum

Патогенез

Фактор вирулентности – микрокапсула, белки наружной мембраны клеточной стенки  адгезия на энтероцитах тонкой кишки

Сальмонеллам нужен ион Fe++: например, S. typhomurium использует плазмиду, которая отбирает его от Hb

При разрушении освобождается эндотоксин (ЛПС)  неспецифическое полифункциональное действие на нервную, сердечно-сосудитую и пищеварительную системы

Продукция энтеротоксина, нарушающего водно-солевой обмен  диарея

Иммунитет

гуморальный и клеточный иммунный ответ

Зоонозно-атропонозная инфекция

Сальмонеллы – возбудители гастроэнтероколитов

• м/о, вызывающие гастроэнтероколиты, возникающие в результате пищевых интоксикаций:

S. typhimurium, S. enterididis, S. anatum etc.

Патогенность и патогенез

1) Фактор вирулентности – микрокапсула, белки наружной мембраны клеточной стенки  способствуют адгезии на энтероцитах тонкой кишки  в составе фагосомальных вакуолей проникают в энтероцит, где “пожираются” макрофагами.

Сальмонеллам нужен ион Fe++: например, S. typhomurium использует плазмиду, которая отбирает его от Hb (в этом причина их медленного размножения). Патогененность сальмонелл зависит от иммунитета и количества бактерий в кишечнике

2) При разрушении освобождается эндотоксин (ЛПС)  неспецифическое полифункциональное действие на нервную, сердечно-сосудитую и пищеварительную системы

3) Продукция энтеротоксина, нарушающего водно-солевой обмен  диарея

Иммунитет

Гуморальный и частично клеточный иммунный ответ, которые не приводят к развитию напряженного иммунитета.

Экология и эпидемиология

Зоонозно-атропонозная инфекция (заражение при употреблении в пищу мяса птицы и кр. рогатого скота, кондитерские изделия)

Болеют и взрослые и дети

Могут жить и размножаться при 4-6С и долго сохраняться при заморозке.

Лабораторная диагностика

Биологическое исследование, с определением серовара выделенной чистой культуры, для определения источника инфекции  монорецепторные сыворотки

Профилактика и лечение

Проведение ветеринарно-санитарных и других противоэпидемических мероприятий

Сальмонеллы – возбудители внутрибольничных инфекций

Общая характеристика

• S. typhimirium, S. derby, S.heidelberg, S. haifa etc + все которые относятся в группе В.

• эти бактерии по своим морфологическим факторам не отличаются от м/о – возбудителям пищевых токсикоинфекций.

S. typhimirium  3 биовара, отличающ. только по патогенности для белых мышей и по резистентности к антибиотикам (15-20 из-за конъюгативных R –плазмид)

Патогенность и патогенез

Распространение:

1. контактно-бытовым

2. воздушно-пылевым

3. пищевым

Проявления разнообразны и сильно варьируют. У детей могут протекать очень выражено, со значительной интоксикацией. У детей старше 3 лет чаще всего бессимптомное бактерионосительство.

У детей грудного возраста  токсикоз и обезвоживание

старше 1 года  синдром нейротоксикоза

Очень опасно присоединение к какой либо другой инфекции.

Лабораторная диагностика

• выделение чистой культуры и определение серовара

Профилактика

• поливалентный сальмонеллезный фаг

• получают также фаг матери, находящейся в тесном контакте с больным

Клостридии (Clostridium)

• основное – получение Е путем субстратного фосфорилирования.

По отношению к О₂ их подразделяют на три группы:

1. строгие анаэробы, не переносящие 02

2. умеренно строгие; выживают, но не размножаются

3. аэротолерантные

Спорообразующие G+ бактерии рода Clostridium, возбудители газовой гангрены (C. perfringens, C. novyi, C. histolyticum).

С. perfingens - крупные утолщенные палочки, подвижны, in vivo образует капсулу

• на кровяном агаре есть зона гемолиза, на желчном – помутнение  лецитиназа

• в столбике агара колонии имеют вид чечевичных зерен

• ферментируют с газообразованием углеводы, протеолитические свойства слабые.

C. noviy – подвижные бескапсульные перитрихи, эритроциты не гемолизируют. Ферментируют с газообразование только ряд сахаров, образуют желатиназу, образуют сероводород и аммиак

C. histolyticum – перитрихи, факультативные анаэробы. Не ферментируют сахара, но обладают протеолитической активностью с образованием сероводорода.