ВКР Аскорбиновая кислота (Коновалов)

Рис. 2 УФ-спектр поглощения кислоты аскорбиновой.

4. Способы идентификации аскорбиновой кислоты

4.1. Химическими методами.

4.1.1. КИСЛОТНЫЕ СВОЙСТВА [1,18,19, 28,29]:

Кислотные свойства аскорбиновой кислоты используют для испытания подлинности. После добавления карбоната натрия в водном растворе происходит образование ионизированной формы кислоты аскорбиновой. К

полученной натриевой соли прибавляют железа (II) сульфат. Появляется темно-фиолетовое окрашивание, обусловленное образованием железа аскорбината, исчезающего после добавления разведенной серной кислоты:

11

1.1.2.ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫЕ СВОЙСТВА [1,18,19, 28,29]:

1.При взаимодействии кислоты аскорбиновой с раствором нитрата серебра его катион восстанавливается до металлического серебра

(реакция образования «серебряного зеркала»):

2.Восстановительными свойствами кислоты аскорбиновой обусловлено превращение окрашенного в синий цвет 2,6-

дихлорфенолидиндофенола в бесцветное лейкосостояние:

3.Аскорбиновая кислота легко окисляется раствором йода согласно уравнению:

12

4.При взаимодействии кислоты аскорбиновой с раствором калия перманганатанаблюдают обесцвечивание раствора калия перманганата вследствие восстановления марганца до Mn 2+

4.2.Физико-химическими методами

4.2.1.Анализ ИК-спектров водорастворимых витаминов

На рис. 3 в качестве примера представлен ИК-спектр кислоты аскорбиновой. В изучаемых спектрах полосы около 2955, 2924, 2855 см−1

соответствуют валентным колебаниям νС-Н, 1462, 1378 и 722 см−1 –

деформационным колебаниям δС-Нвазели-нового масла. Полосы с частотами около 2361, 2346, 2334 и 666 см−1 соответствует колебаниям присутствующего в атмосфере углекислого газа.

На основании анализа спектров субстанции кислоты аскорбиновой были выделены следующие характеристических полосы поглощения:νС=О в γ-

бутиролактоне (1755 см−1), νС=С (1675 см−1),νas(С-О-С) (1322 см−1) и νs(С-О-С) (1026 см−1).

13

Рис.3. ИК-спектр субстанции кислоты аскорбиновой в вазелиновом масле.

Рис.4. ИК-спектр таблеток Аскорбиновая кислота с глюкозой (Фармстандарт-Уфа-ВИТА, Россия) после

проведения экстракции спиртом 96%.

В работе [] был составлен атлас ИК-спектров субстанций и препаратов водорастворимых витаминов с целью их последующего использования в качестве стандартных. Таким образом, разработаны методики подтверждения подлинности кислоты аскорбиновой в таблетках методом ИК-спектроскопии, которые могут быть использованы для выявления фальсифицированных препаратов, содержащих указанное вещество.

14

4.2.2. Идентификация и дискриминация кислоты аскорбиновой методом БИК-спектроскопии

На рис.5 представлены БИК-спектры субстанций кислоты аскорбиновой разных производителей с фальсификатом. Видно, что гранулят 97% отличается от порошкообразных субстанций только по интенсивности спектров. Методика сравнения БИК-спектров может использоваться для установления подлинности препаратов только с концентрацией кислоты аскорбиновой в препарате свыше 25-30%. В этом случае в БИК-спектре можно увидеть полосы действующего вещества (рис. 6).

Рис.5. БИК-спектры субстанций кислоты аскорбиновой 13 серий 8 производителей в сравнении с фальсифицированным образцом.

15

Рис.6. БИК-спектры субстанции и таблеток с концентрацией кислоты аскорбиновой от 25,16% до 66,67%.

4.2.3. Анализ УФ-спектров кислоты аскорбиновой

Наличие сложных сопряженных систем в структурах водорастворимых вита-минов дает возможность широкого применения УФ-спектрофотометрии для их фармакопейного анализа. IP и USP регламентируют при установлении подлинности сравнение УФ-спектров испытуемой субстанции со спектрами стандартных образцов. ГФ, CP, EP (BP) и JP при установлении подлинности регламентируют сравнение УФ-спектров испытуемой субстанции со стандартными спектрами (рис. 7).

Рис.7. УФ-спектр кислоты аскорбиновой (15 мкг/мл) в растворе кислоты серной 0,005 М.

16

5.Количественное определение кислоты аскорбиновой.

5.1. Титриметрические методы

Титриметрические количественного определения кислоты аскорбиновой также базируются на ее химических свойствах:восстановительных и кислотных.

1) ГФ XII рекомендует метод йодатометрии. В этом случае титрантом служит раствор калия йодата. Титрование ведут в присутствии иодида калия и хлороводородной кислоты (индикатор — крахмал) до стойкого синего окрашивании.

Избыточная капля титрованного раствора калия йодата реагирует с калия йодидом, выделяя йод, который указывает на конец титрования:

2)Метод йодометрии. Кислота аскорбиновая окисляется титрованным раствором йода в нейтральной, слабокислой или слабощелочной средах до кислоты дегидроаскорбиновой.

3)Метод йодохлорометрии. Титруют раствором йодмонохлорида до появления стойкого слабо-синего окрашивания (индикатор крахмал).

Происходит окисление аскорбиновой кислоты пореакции:

17

4) Цериметрическое определение. Избыточная капля сульфата церия окисляет индикатор до бледно-голубого окрашивания

Раствор фенантролина представляет собой комплексное соединение закисного железа с о-фенантролином интенсивно-красного цвета. Сульфат церия окисляет железо до трехвалентного. В результате чего образуется комплексное соединение голубого цвета:

5)Титрование раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия. В плодах

среде до появления не исчезающей в течение 0,5—1 мин розовой окраски.

6) Кислотные свойства кислоты аскорбиновой выражены в достаточной степени, что позволяет количественно определять лекарственное вещество алкалиметрически. Кислота аскорбиновая титруется стандартным 0,1 М

раствором натрия гидроксила, как одноосновная кислота по енольному гидроксилу в 3-ем положении:

18

5.2.Физико-химические методы

Для количественной оценки кислоты аскорбиновой в многокомпонентных образцах со сложной матрицей, следует применять только высокоспецифичные или сепарационные методы анализа. Метод КЭ является дополнением и в то же время, альтернативой ВЭЖХ, характеризуется высокой эффективностью, малым расходом недорогих реагентов и простотой эксплуатации, капилляры долговечны и легко регенерируются. Несомненно, как и любой инструментальный метод, метод КЭ предполагает материальные затраты на приобретение оборудования, однако такое оборудование является универсальным. Предложенная методика КЭ может быть использована для контроля качества лекарственного растительного сырья и лекарственных препаратов, содержащих кислоту аскорбиновую (плоды и сироп шиповника, витаминный сбор №2, листья бархатцев, растворов кислоты аскорбиновой для инъекций и препарата «Аскорутин»).

Для количественного определения кислоты аскорбиновой в инъекционных растворах можно используют более дешевый и доступный спектрофотометрический метод с ФМК.

В большинстве современных лабораторий используют следующие методы

количественного определения кислоты аскорбиновой:

2.Капиллярный зональный электрофорез

3.Мицеллярная электрофонетическая хроматография.

6.Фармакологическое действие, применение в медицине и хранение лекарственных препаратов глюкозы.

6.7.Биологическая роль

Образование коллагена, серотонина из триптофана, образование катехоламинов, синтез кортикостероидов. Аскорбиновая кислота также участвует в превращении холестерина в желчные кислоты.

Витамин С необходим для детоксикации в гепатоцитах при участии цитохрома P450. Витамин С сам нейтрализует супероксидный радикал до перекиси водорода.

Восстанавливает убихинон и витамин E. Стимулирует синтез интерферона, следовательно, участвует в иммуномодулировании. Переводит трёхвалентное железов двухвалентное, тем самым способствует его всасыванию.

Тормозит гликозилированиегемоглобина, тормозит превращение глюкозы в сорбит.

6.8.Авитаминоз и гипервитаминоз

Принято считать, что среди симптомовнехватки в организме витамина С находятся слабость иммунной системы, кровоточивость дёсен, бледность и сухость кожи, замедленное восстановление тканей после физических повреждений (раны, синяки), потускнение и выпадение волос, ломкость ногтей, вялость, быстрая утомляемость, ослабление мышечного тонуса,

ревматоидные боли в крестце и конечностях (особенно нижних, боли в ступнях), расшатывание и выпадение зубов; хрупкость кровеносных сосудов приводит к кровоточивости дёсен, кровоизлияниям в виде тёмно-красных пятен на коже.

6.9.Суточная норма потребления

Люди должны получать аскорбиновую кислоту с пищей.

Физиологическая потребность для взрослых — 90 мг/сутки (беременным

20