
- •Ястребова о.Н.
- •Распространённость
- •Источники инфекции. Пути передачи. Факторы риска
- •Диагностика. Фазы течения заболевания
- •Отечественные иммуноферментные тест-системы для диагностики гс
- •Требования и рекомендации, соблюдение которых повышает достоверность результатов ифа
- •1. Строгое соблюдение инструкции по применению тест-системы.
- •2. Соблюдение сроков и условий хранения наборов и отдельных компонентов тест-системы.
- •3. Периодический контроль работы оборудования.
- •4. Качественная подготовка посуды.
- •5. Правильная подготовка тестируемых образцов.
- •6. Исключение возможности смешивания компонентов из наборов разных серий.
- •7. Внимательность и сосредоточенность на работе лаборанта, выполняющего анализ.
- •8. Тщательная правильная отмывка планшета на каждой стадии постановки ифа.
- •9. Исключение возможных нежелательных воздействий при работе с офд.
- •10. Соблюдение температурного режима инкубации офд.
- •Оборудование, необходимое для работы с иммуноферментными тест-системами
- •Контроль работы оборудования
- •1. Автоматические пипетки.
- •2. Термостаты.
- •3. Автоматические промыватели планшетов (вошеры).
- •4. Спектрофотометры планшетные (ридеры, иммуноферментные анализаторы).
- •5. Дистилляторы.
- •Литература
- •Исследования на гепатит c иммуноферментным методом
- •Результаты анализа:
- •Результаты анализа:
- •Содержание
- •633159, Новосибирская область, Новосибирский район, п. Кольцово, а/я 121, зао “Вектор-Бест”
3. Автоматические промыватели планшетов (вошеры).
Качественная, правильная промывка планшета на каждой стадии работы во многом определяет успех проводимого анализа. Все лунки планшета должны равномерно заполняться промывающим раствором в требуемом объёме и полностью опорожняться. Кроме того, должны соблюдаться указанные в инструкции по применению тест-системы количество промывок и время между заполнением лунок и их опорожнением.
При использовании автоматических промывателей важно контролировать все эти параметры. Равномерность заполнения и опорожнения всех лунок планшета контролируют визуально в процессе промывки. Кроме того, периодически проверяют объём заполнения лунок с использованием пипетки, настроенной на требуемый объём.
Для предупреждения возможности некачественной работы автоматических и ручных промывателей необходимо ежедневно по окончании работы промывать их дистиллированной водой для предотвращения оседания солей промывающего раствора и загрязнения каналов промывающей системы.
4. Спектрофотометры планшетные (ридеры, иммуноферментные анализаторы).
Спектрофотометры используются для получения количественной оценки результатов анализа, поэтому они подлежат периодическому (не реже одного раза в год) метрологическому контролю. Тщательная проверка анализатора метрологом даёт уверенность в правильности получаемых результатов.
В повседневной практике ИФА нужно помнить о том, что спектрофотометру для выхода на рабочий режим необходим прогрев (время прогрева для каждого конкретного прибора указано в инструкции по его применению). Существуют простые приёмы проверки точности работы спектрофотометра:
а) Для того, чтобы проверить воспроизводимость спектрофотометрической оценки результата в каждой лунке планшета, необходимо провести несколько повторных съёмов показаний с одного планшета. Допустимый разброс величины оптической плотности, получаемой для каждой конкретной лунки планшета, не должен превышать 10 %.
б) Для того, чтобы оценить равномерность оценки результатов спектрофотометром по всей поверхности планшета, необходимо во все лунки пустого чистого планшета внести одинаковый объём стандартного окрашенного раствора. Такой раствор можно приготовить, добавив в раствор ОФД (приготовленный в соответствии с инструкцией по применению любой иммуноферментной тест-системы) небольшое количество пероксидазного конъюгата. Количество конъюгата при этом подбирается экспериментальным путём так, чтобы оптическая плотность полученного окрашенного раствора находилась в интервале от 0,3 до 1,0 о.е. (оптических единиц). После внесения такого раствора во все лунки планшета проводят спектрофотометрическое определение оптической плотности. Разброс показаний спектрофотометра внутри планшета не должен превышать 10 %.
5. Дистилляторы.
Дистиллированная вода — единственный компонент, который не входит в состав диагностического набора. Качество воды имеет большое значение при постановке ИФА. Необходимо регулярно измерять значение рН дистиллированной воды, которое должно быть в пределах 5–5,5 ед. Причинами несоответствия рН данным значениям могут быть:
чрезмерно сильный напор воды, не позволяющий пройти цикл очистки;
загрязнение (пророст) шлангов и бутыли, в которую собирается вода;
загрязнение самого дистиллятора.
Для предотвращения этих причин необходимо отрегулировать поток воды. Регулярно (каждые 2–3 дня) тщательно промывать шланги и ёмкость для сбора дистиллированной воды.
Периодически, в зависимости от жёсткости воды, необходимо очищать от накипи путём механической очистки внутреннюю поверхность испарителя, электронагреватели, поплавок датчика, а также верхнюю часть аппарата через люк, сняв крышку дистиллятора.