Микроб билеты / Билет 5

Билет 5

1. Клеточная стенка у разных видов микроорганизмов различна по строению. В состав ее входит редкий гетерополимер- пептидогликан- у разных микроорганизмов он имеет различную толщину, на чем основан один из основных методов окраски- по Граму. В соответствии с окрашиванием микроорганизмы делятся на 2 группы: грам положительные и грам отрицательные. У Гр+ микроорганизмов в составе клеточной стенки- большое количество пептидогликана, он многослойный, на его долю приходится 80% от химического состава клеточной стенки. У Гр- пептидогликана всего 10% и он однослойный. Тейхоевые кислоты в стенке Гр+ имеются, у Гр- их нет. За счет этих 2 компонентов микроорганизмы окрашиваытся разно: Гр+- в синий цвет(удерживают генциан виолет). Гр- окрашиваются фуксином в красный цвет. Отношение к окраске - это тинкториальные свойства.

Клеточная стенка - это необязательный структурный элемент. Ее не имеют микоплазмы, L-формы микроорганизмов. L-формы образуются из обычных микроорганизмов, которые по ряду причин теряют клеточную стенку. Без клеточной стенки микроб более уязвим к факторам окружающей среды.

ЦПМ имеет специфические выпячивания внутрь цитоплазмы – мезосомы. Они делятся на центральные и латеральные. Мезосомы способны соединяться с ДНК и участвовать в делении бактериальной клетки- растаскивают нити ДНК по полюсам.

Многие микроорганизмы имеют капсулу, она состоит из скопления слизистого материала и выполняет защитную функцию. У патогенных микроорганизмов капсула образуется только внутри макроорганизма, она является фактором патогенности, препятствует фагоцитозу, доступу к микробу антител, бактериофагов. Капсула не окрашивается обычными красителями, только по Гимсу- Бурри. Препарат смешивают с черной тушью, которая образует темный фон, затем окрашивают фуксином.

2. Иммуноферментный анализ. Механизм и практическое использование.

Метод был разработан в начале 70-х гг независимо друг от друга тремя группами учёных. Метод напоминает РИА, но в его основу положено маркирование Аг или Ат, вступающего в реакцию, ферментом. Взд метки с субстратом обычно сопровождается изменением окраски среды. В настоящее время созданы многочисленные модификации этого метода, но наибольшее распространение получил гетерогенный ИФА на твёрдой фазе (твердофазный). Различают:

ПРЯМОЙ ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИФА. В этом случае:

сыворотку с Ат инкубируют с Аг, фиксированным на твёрдом субстрате (чаще всего это пластиковая микропланшетка).

Ат, не связавшие Аг, удаляют многократным промыванием.

Вносят меченную ферментом сыворотку к Ат, связавшим Аг.

Определяют ко-во фермента–маркёра, связавшегося с Ат.

КОНКУРЕНТНЫЙ ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИФА.

Вносят сыворотку. Если в ней есть специфические Ат, то они связываются с Аг, фиксированном на твёрдом субстрате. Если специфических Ат нет, то Аг оказывается не связанным.

При добавлении специфических к фиксированному Аг Антител в первом случае им будет не с чем взаимодействовать (большинство Аг уже связаны)  содержание маркёра низкое. Во втором случае специфические Ат будут связываться с Аг и при отмывании они не будут смываться  высокое содержание маркёра.

Аналогично м.б. фиксированы АНТИТЕЛА, и различные фирмы выпускают именно планшеты с уже фиксированными Ат.

По сравнению с классическими методами выявления Аг этот метод позволяет непосредственно регистрировать их взаимодействие с Ат, а не вторичные проявления (агглютинацию, преципитацию или гемолиз). Метод очень ЧУВСТВИТЕЛЕН (достаточно концентрации 1нг/мл).

Определяют: Хламидии, клостридии, ВИЧ и др.

3. Дизентерия – острая или хроническая рецидивирующая кишечная инфекция, клинически характеризующаяся симптомами воспаления толстого кишечника и явлениями общей интоксикации. В остром периоде и при обострении у больных отмечаются поносы с болезненными спазмами прямой кишки. В тяжелых случаях в стуле содержатся слизисто–гнойные массы с примесью крови

Дизентерия – антропонозное заболевание. Источником инфекции являются больные различными формами дизентерии и реконвалесценты, бактерионосительство у которых может продолжаться несколько дней и более. Механизм передачи фекально–оральный (водно–пищевой, контактно–бытовой). Особенно часто дизентерия встречается в летне–осенний сезон года, что связано с частыми приемами воды, употреблением овощей и фруктов, активацией мушиного фактора.

В желудке и тонкой кишке значительная часть шигелл погибает и высвобождается эндотоксин  чем их больше, тем более выражена интоксикация. Токсины воздействуют на слизистую оболочку ЖКТ, на нервные окончания, сосуды и рецепторы слизистой, всасываясь, вызывают озноб, лихорадку и поражение нервной системы и внутренних органов. Оставшиеся живыми шигеллы с помощью адгезинов прикрепляются к гликокаликсу микроворсинок кишечника, колонизируют слизистую оболочку и проникают в энтероциты, где размножаются. Главная роль в патогенезе дизентерии принадлежит токсинам. Цитотоксины разрушают эпителиальный покров кишечника, развивается катарально-язвенное воспаление. Токсины нарушают обмен веществ, вызывают полигиповитаминоз. В кишечнике – дисбактериоз. Токсигенные S.dysenteriae вызывают заболевания с выраженной интоксикацией и возможным смертельным исходом (особенно у детей раннего возраста).

4. Арбовирусы: флавивирусы, рубивирусы, строение вириона, антигены, методы культивирования. Общие клинико-эпидемические характеристики вызываемых заболеваний. Методы диагностики (назовите, укажите материал для исследования и как они проводятся)

Специфическая профилактика клещевых энцефалитов.

- Арбовирусы- это вирусы, для которых естественными хозяевами и переносчиками являются членистоногие (клещи, комары). Эти вирусы вызывают заболевания у человека с трансмиссивным путем передачи (при укусе насекомого). Эти заболевания имеют сходные симптомы: лихорадка, геморрагии, энцефалит. Вирусы относят к разным семействам: тогавирусы,флавивирусы (раньше их выделяли как род в семействе тогавирусов), буньявирусы. Близки по клинике заболевания, вызваемые вирусами из семейства аренавирусов и филовирусов, но роль переносчиков при этой инфекции не доказана. Это РНК-вирусы, имеют суперкапсидную оболочку (характеристику см.таб РНК-вирусы). Их можно размножать в КТ членистоногих. Тогавирусы включают род -вирусов и рубивирусов. Рубивирусы не являются арбовирусами, это возбудитель коревой краснухи (передается воздушно-капельным путем, при заболевании развивается вирусемия и вирус заносится в органы, слизистые, кожу и развивается характерная сыпь). -вирусы -типичные арбовирусы, передаются клещами и вызывают лихорадки и энцефалиты.Тогавирусы обладают ЦПД в КТ, у них есть гемагглютинин. методы диагностики: 1.вирусологический 2.серологический (РСК, РТГА) 3.иммуноиндикация

Флавивирусы по своим биологическим характеристикам близки к тогавирусам, но сейчас выделены в самостоятельное семейство.Отличаются своим репродуктивным циклом (значительно медленнее размножаются, практически не обладают ЦПД, в конце репродукции выделяются через эндоплазматический ретикулум клетки, а не почкованием. К флавивирусам относят вирус желтой лихорадки (сопровождается поражением печени), лихорадки Денге, японского энцефалита, клещевого энцефалита, омской геморрагической лихорадки. Методы диагностики такие же, как для тогавирусной инфекции. Против энцефалитов и омской геморрагической лихорадки разработаны убитые вакцины, а против желтой лихорадки - живая.

Буньявирусы (см характеристику в таб. РНК вирусы) вызывают крымскую геморрагическую лихорадку (встречается также в Конго и Центральной Африки),москитную лихорадку (в Италии), передаются комарами. К этому семейству относят и вирус -возбудитель ГЛПС (геморрагической лихорадки с почечным синдромом), но роль переносчиков-насекомых в ее распространении не доказана. Источником инфекции являются грызуны, при ГЛПС возможен алиментарный путь заражения. Методы диагностики те же. Чаще всего на исследование берут кровь при инфекциях, вызываемых этими вирусами.

У человека арбовирусы вызывают острые инфекции, но могут проявляться как медленные латентные инфекции (болезнь Паркинсона). У грызунов чаще протекают как латентные инфекции, но могут быть и острые с летальным исходом. У членистоногих только как латентные, а в КТ из членистоногих не дают ЦПД.