Микроб билеты / Билет 34

Билет 34

1. Грибы (Myces) относятся к эукариотам. Грибов в природе огромное количество и только небольшая их часть вызывает заболевания животных и человека. Основной структурный элемент грибов – гифы - нитевидные структуры, переплетающиеся между собой. В результате переплетения гиф образуется мицелий. Грибы в лабораторных условиях культивируются на специальных питательных средах, где образуют мицелий как поверхностный(воздушный), так и субстратный.

Грибы размножаются спорами бесполым путем. Высшие грибы размножаются половым путем: 2 споры сливаются, образуя зиготу. По образованию спор грибы делятся на низшие и высшие. У низших грибов помимо особенности спорообразования мицелий одноклеточный несегментированный. У высших грибов мицелий делится перегородками на отдельные клетки. В перегородках находятся отверстия.

У низших грибов споры образуются в специальных закрытых спорангиях. Споры, закрытые оболочкой спорангия, называются эндоспорами. У высших грибов экзоспоры- соприкасаются с внешней средой.

Артроспоры - гиф мицелия начинает дробиться и каждый образующийся при этом фрагмент дает начало новому мицелию.

Хламидоспоры - на концах в местах сочленения мицелия образуются выпуклости, одна из которых утолщается и превращается в спору.

Бластоспоры - характерны для дрожжевого грибка. От материнской клетки отпочковываются дочерние.

Аскоспоры - это половые споры, не образующие мицелий.

Классы грибов:

- Овомицеты.

- Аскомицеты (сумчатые).

- Базидиомицеты.

- Несовершенные грибы или дейтеромицеты.

Патогенность грибов.

Грибы у человека способны вызывать микозы, как поверхностные (поражения кожи, ногтей, волос), так и глубокие (мышцы, клетчатка). Грибы могут вызывать системные поражения. Криптокиккоз - заболевания, вызываемые грибком на фоне ВИЧ-инфекции (в 30% случаев). Заболевание вызывает Cryptococcus. Он имеет дрожжеподобные клетки размером 4- 20 мкм. Образует бластоспоры. Нитчатые формы отсутствуют. Может образовывать капсулу.

Blastomyces вызывает бластомикоз. Встречается в двух формах - висцеральный и кожный. В тканях определяются довольно крупные дрожжеподобные клетки.

Candida - входит в состав нормальной микрофлоры. У маленьких детей часто наблюдается кандидоз полости рта - молочница. Активизируются на фоне иммунодефицита.

Hystoplasma - Гистоплазма - вызывает гистоплазмоз. В клетках, тканях образует одноклеточные образования округлой или грушевидной формы. Образует бласто- и хламидоспоры. На питательных средах дает воздушный мицелий.

Coccidioides вызывают системное заболевание кокцидиоз, острая форма напоминает грипп. При хронической форме поражается костная ткань. Образует эндоспоры. На питательных средах образует воздушный мицелий. Часто встречается на фоне ВИЧ-инфекции.

2. Метод был разработан в начале 70-х гг независимо друг от друга тремя группами учёных. Метод напоминает РИА, но в его основу положено маркирование Аг или Ат, вступающего в реакцию, ферментом. Взд метки с субстратом обычно сопровождается изменением окраски среды. В настоящее время созданы многочисленные модификации этого метода, но наибольшее распространение получил гетерогенный ИФА на твёрдой фазе (твердофазный). Различают:

ПРЯМОЙ ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИФА. В этом случае:

сыворотку с Ат инкубируют с Аг, фиксированным на твёрдом субстрате (чаще всего это пластиковая микропланшетка).

Ат, не связавшие Аг, удаляют многократным промыванием.

Вносят меченную ферментом сыворотку к Ат, связавшим Аг.

Определяют ко-во фермента–маркёра, связавшегося с Ат.

КОНКУРЕНТНЫЙ ТВЕРДОФАЗНЫЙ ИФА.

Вносят сыворотку. Если в ней есть специфические Ат, то они связываются с Аг, фиксированном на твёрдом субстрате. Если специфических Ат нет, то Аг оказывается не связанным.

При добавлении специфических к фиксированному Аг Антител в первом случае им будет не с чем взаимодействовать (большинство Аг уже связаны)  содержание маркёра низкое. Во втором случае специфические Ат будут связываться с Аг и при отмывании они не будут смываться  высокое содержание маркёра.

Аналогично м.б. фиксированы АНТИТЕЛА, и различные фирмы выпускают именно планшеты с уже фиксированными Ат.

По сравнению с классическими методами выявления Аг этот метод позволяет непосредственно регистрировать их взаимодействие с Ат, а не вторичные проявления (агглютинацию, преципитацию или гемолиз). Метод очень ЧУВСТВИТЕЛЕН (достаточно концентрации 1нг/мл).

Определяют: Хламидии, клостридии, ВИЧ и др.

3. Бактериальные менингиты — обычно острые, опасные для жизни инфекции. Даже на фоне проводимой адекватной антимикробной терапии смертность может достигать 15%. Заболевание чаще регистрируют у детей. Возбудитель бактериальных менингитов — капсулированные бактерии. Основной возбудитель поражений у детей в возрасте 6-12 мес— Haemophilus influenzae типа b. Дети младше 2 мес обычно не болеют (что обусловлено циркуляцией AT, трансллацентар-но полученных от матерей); по достижении 5-летнего возраста вероятность развития заболевания снижается с каждым годом. Другой важный патоген — Neisseria meningitidis, способный вызывать эпидемический менингит. Большинство случаев вызывают бактерии серогрупп А, В, С и Y.

Первичные инфекции характерны для молодых; наиболее высокую заболеваемость регистрируют у детей. Часто гнойные менингитывызывает Streptococcus pneumoniae; пневмококки — основные возбудители бактериальных менингитов у пожилых. Факторы, предрасполагающие к развитию пневмококкового менингита, — спленэктомия, серповидноклеточная анемия, алкоголизм, черепно-мозговые травмы. Группу риска составляют дети, страдающие запущенными отитами, вызванными S. pneumoniae. Реже поражения вызывают Listeria monocytogenes, энтеробактерии (эшери-хии, клебсиеллы, сальмонеллы, протеи), Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus epidermidis, Acinetobacter calcoaceticus, Mycobacterium tuberculosis, виды Brucella, Leptospira, Mycoplasma, бактероиды, дифтероиды и др. Материал для исследований — СМЖ; при её изучении выявляют факт поражения мозговых оболочек, но результаты не имеют прогностического значения. Образцы следует забирать, соблюдая правила асептики. Изменение состава и давление СМЖ варьирует в зависимости от стадии заболевания — у большинства давление СМЖ повышается постепенно (при тяжёлых поражениях может быть чрезмерно высоким).

СМЖ обычно мутная и характеризуется выраженным лейкоцитозом (как правило, 1000-10 000/мл).

• Если СМЖ мутная, то из неё готовят мазки для микроскопирования; если прозрачная — то мазки готовят из осадка, полученного после центрифугирования. Мазки следует окрашивать по Граму, Цилю-Нильсену и Романбвскому-Гимзе. Также не следует пренебрегать окраской тушью на наличие капсул. Нельзя проводить идентификацию возбудителя, основываясь только на результатах микроскопии.

• Если СМЖ была загрязнена при взятии пробы, то микроорганизмы обычно не выявляют при микроскопии и обнаруживают лишь на следующий день в культурах. При менингитах, вызванных Mycobacterium tuberculosis и Listeria monocytogenes, проводят посев на соответствующие среды.

4. Вирус парагриппа и РС-вирус относятся к семейству Paramyxoviridae.

Это вирусы сферической формы со спиральным типом симметрии. Средний размер вириона 100–800 нм. Имеют суперкапсидную оболочку с шиповидными отростками. Геном представлен линейной несегментированной молекулой РНК. РНК связана с мажорным (NP) белком.

Оболочка содержит три гликопротеида:

1) HN, обладающий гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью;

2) F, ответственный за слияние и проявляющий гемолитическую и цитотоксическую активность;

3) М-белок.

Репликация вирусов полностью реализуется в цитоплазме клеток хозяина. Вирус парагриппа человека относится к роду Paramyxovirus. Для вирусов характерно наличие собственной РНК-зависимой РНК-полимеразы (транскриптазы).

На основании различий антигенной структуры HN, F и NP-белков вирусов парагриппа человека выделяют четыре основных серотипа.

Возбудитель репродуцируется в эпителии верхних отделов дыхательных путей, откуда проникает в кровоток.

Клинические проявления у взрослых чаще всего протекают в форме катаров верхних отделов дыхательных путей. У детей клиническая картина является более тяжелой.

Основной путь передачи вируса парагриппа – воздушно-капельный. Источником инфекции больной (или вирусоноситель).

Лабораторная диагностика:

1) экспресс-диагностика (ИФА);

2) выделение возбудителя в монослоях культур почек эмбриона человека или обезьян;

3) серодиагностика (РСК, РН, РТГА с парными сыворотками).

PC-вирус – основной возбудитель заболеваний нижних дыхательных путей у новорожденных и детей раннего возраста. Относится к роду Pneumovirus.

Характеризуется низкой устойчивостью, вирионы склонны к самораспаду.

Возбудитель реплицируется в эпителии воздухоносных путей, вызывая гибель зараженных клеток, проявляет выраженные иммуносупрессивные свойства.

PC-вирус вызывает ежегодные эпидемические инфекции дыхательных путей у новорожденных и детей раннего возраста; заражение взрослых возможно, но течение инфекции у них легкое или бессимптомное. Основной путь передачи – воздушно-капельный.

После выздоровления формируется нестойкий иммунитет.

Лабораторная диагностика:

1) экспресс-диагностика – определение антигенов вируса в носовом отделяемом с помощью ИФА;

2) специфические антигены выявляют в РСК и РН.

Этиотропная терапия не разработана.

Бокавирус человека, вероятно, является важной причиной возникновения острых инфекций верхних и нижних дыхательных путей у детей младшего возраста. Не исключено также, что этот вирус способен вызывать острые гастроэнтериты у детей, а также бессимптомно персистировать в инфицированном организме. HBoV является 3-м по частоте обнаружения респираторным вирусным агентом человека после респираторно-синцитиального вируса и риновируса. Наиболее надежным методом идентификации HBoV в клинических образцах является полимеразная цепная реакция. Филогенетический анализ показал наличие, по крайней мере, 2 циркулирующих вариантов (генотипов) вируса.

Вирионы HBoV имеют те же структурные характеристики, что и все члены семействаParvoviridae. Полиэдрические частицы не имеют оболочки и не содержат липидов и гликопротеинов. Геном HBoV представлен одной молекулой одноцепочечной ДНК длиной около 5300 нуклеотидов.

HВoV классифицирован как член подсемейства Parvovirinae, семейства Parvoviridae. Анализ организации генома и аминокислотной последовательности кодируемых им белков позволил отнести вновь идентифицированный вирус к роду Bocavirus, в который входят 2 вируса: бычий парвовирус (bovine parvovirus - BРV) и минутный вирус собак (minute virus of canines - MVC). Таким образом, название рода бокавирус получено в результате комбинации первых двух букв «bo» из слова «bovine» и «ca» из слова «canine».

Геномная организация HВoV напоминает таковую у других известных бокавирусов: BPV и MVC. Подобно геномам всех членов подсемейства Parvovirinae, геном HВoV включает 2 рамки считывания (ORF), кодирующие неструктивный белок (NS-1) и по крайней мере 2 капсидных белка (VP1 и VP2). Кроме того, подобно BPV и MVC HВoV имеет в своем геноме также 3-ю рамку считывания, которая кодирует неструктурный белок NP-1, функция которого неизвестна. Степень родства HВoV и других бокавирусов невелика. Например, сходство аминокислотных последовательностей белков NP-1 HBoV, с одной стороны, и BРV и MVC - с другой, не превышает 47%.