Лекция_5_ГИ_Б
.pdf
Анализ трансформантов табака поколений T2 и T3 методом мультиплексной ПЦР
. . |
|
|
. . |
700 |
NtGA2 |
|
700 |
|
|||
|
|
|
|
500 |
|
|
500 |
|
|
|
|
|
CYP11A1 |
|
|
200 |
|
|
200 |
Tnos |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
NtGA2
700
500 
Tnos
200 
трансгенные растения табака с целевым геном CYP11A1 разных независимых линий
700 
500
200
трансгенные растения табака, трансформированные пустым вектором pGreen0229 разных независимых линий
v – ДНК вектора pGBP450f, K – линия контрольных растений
NTGA2
(
$ )
virE virD1
(
')
(#
)
& # T-' '
Pnos nptII |
Tnos p35S desA |
licBM3 |
polyA |
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
(! ) ( ) (! )
, )
!"#
) :
Nicotiana tabacum L.
Arabidopsis thaliana (L.) Heynh
-* :
'
Определение количества копийкопий трансгена
|
BamHI |
|
|
PvuII |
SalI |
HindIII |
XbaI PvuII |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Pnos |
|
nptII |
|
pA |
|
P35SCaMV |
|
|
( |
|
|
|
|
|
) |
|
|
pA |
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
BamHI |
|
|
PvuII |
SalI |
HindIII |
XbaI PvuII |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Pnos |
|
nptII |
|
pA |
|
P35SCaMV |
|
|
( |
|
|
|
|
) |
|
|
pA |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
'
* BamHI
BamHI |
BamHI |
BamHI |
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
BamHI |
BamHI |
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
BamHI |
|
|
BamHI |
BamHI |
|||
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Количество копий трансгенагена
+-)
' * 1
)
|
BamHI |
|
|
PvuII |
SalI |
HindIII |
XbaI PvuII |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Pnos |
|
nptII |
|
pA |
|
P35SCaMV |
|
|
( |
|
|
|
|
) |
|
|
pA |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
'
* BamHI
BamHI |
BamHI |
BamHI |
BamHI |
||||
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
BamHI |
BamHI |
BamHI |
BamHI |
BamHI |
BamHI |
|||||
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Количество копий трансгенагена
+-)
' * 2
,
) nptII
,1
6555
6442
3676
,2
6555
6442
3676 
Определение целостностисти интегрированной последовательности трансгенасгена
|
BamHI |
|
|
PvuII |
SalI |
HindIII |
XbaI PvuII |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Pnos |
|
nptII |
|
pA |
|
P35SCaMV |
|
|
( |
|
|
|
|
) |
|
|
pA |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
'
* SalI XbaI
SalI |
|
XbaI |
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
( |
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
3500 . . 4400 .