24. Получение сыворотки крови от животных для серологических исследований.

Сыворотка - жидкая часть крови без форменных элементов и фибрина.

Нужна для:

-определение титра антител при бактериальных или вирусных инфекциях, чаще всего начиная с конца первой недели заболевания в динамике болезни по типу парных сывороток;

-постановка серологических реакций при диспансерном наблюдении за реконвалисцентами для верификации перенесённых заболеваний (особенно маркёров вирусных гепатитов).

Примечание

-кровь натощак

-пробирка для забора крови должна быть химически чистой, сухой (для устранения гемолизы эритроцитов, затрудняющего определить степень помутнения сыворотки при взаимодействии антигена с антителом);

-запрещается проводить забор крови без шприца, только иглой.

Техника взятия крови у животных разных видов. Животных фиксируют, подготавливают место прокола: выстригают шерсть (у птиц выщипывают перья, у свиней кончик хвоста обмывают теплой водой с мылом и высушивают чистым полотенцем), дезинфицируют 70%-м этиловым спиртом, спиртовым раствором йода или 3%-м раствором фенола.

Консервируют кровь для лучшей сохранности сыворотки. Для этого используют 5%-ный фенол на изотоническом растворе хлорида натрия (1 мл раствора на 9 мл сыворотки) или борную кислоту 0,05-0,07 г на одну пробирку. Для стабилизации крови используют цитрат натрия 30 мл на 10 мл крови или 15 мл оксалата натрия, 50 ЕД гепарина или 4 капли 10%-ного трилона Б.

Классический метод: пробу крови оставляют при 36-38℃ (не ниже комнатной и не выше 40С) до ее свертывания - образуется сыворотка. Ее обводят стерильной иглой. Помещают на 1-2 ч в термостат при 37-38℃.

Для лучшей ретракции кровяного сгустка и просветления сыворотки пробы ставят в прохладное место на 6-12 часов при 4-8С. Сыворотку сливают, готовят сопроводительные документы в 2-х экземплярах и отправляют в лабораторию нарочным способом.

В пробирку или цилиндр без антикоагулятора выпустить 10 мл крови животного и поставить ее в термостат при 38°С на несколько часов. Образование кровяного сгустка и частичная ретракция, т.е. его стягивание и самопроизвольное отделение сыворотки наступает у лошадей через 1…3 часа, а полное отделение сгустка через 12…18 часов. У крупного рогатого скота ретракция протекает значительно медленнее. Из пробирки, с полной ретракцией сгустка, слить или отсосать сыворотку и сравнить ее с плазмой. Сыворотка имеет желтовато-соломенный цвет и более прозрачна, чем плазма (я вообще хз на счет этого, для балды пусть будет).

25. Сибирская язва: этиология, эпизоотология, клиническое проявление болезни у сельскохозяйственных животных.

– особо опасная, острая септическая болезнь многих видов животных и человека, характеризующаяся септицемией, поражением кожи, кишечника, легких, л/у и гибелью заболевших животных.

Этиология. Возбудитель - Bacillus Anthracis – крупная неподвижная Гр+ спорообразующая палочка. В организме восприимчивых животных и человека, а также на искусственных питательных средах вирулентные штаммы образуют капсулу, а вне организма - споры.

Вегетативные формы малоустойчивы (в невскрытом трупе - 7 суток, при 60гр - 15 мин, при 100гр - мгновенно, действие прямых лучей солнца - 2ч, при -10гр - 24 дня, в замороженном мясе при -15гр - 15 дней, в соленом мясе - 45 дней)

Споры чрезвычайно устойчивы - не погибают в разлагающемся трупном материале, годами сохраняются в воде, десятками лет в почве (сухой жар при 120-140гр - 2-4ч, автоклавирование при 120гр - 5-10мин, кипячение - 15-30мин)

Э/о данные.

Восприимчивые животные: Более восприимчивы - КРС, МРС, буйволы, лошади, ослы, олени, верблюды; Менее восприимчивы - свиньи. Чувствительны - дикие копытные (лоси, горные бараны, косули, зубры, дикие кабаны, антилопы, жирафы). Малочувствительны - плотоядные (в т.ч. собаки и кошки), хищные птицы (грифы, ястребы и др). Зарегистрировано - у грызунов. Не болеют - пресмыкающиеся, земноводные, рыбы и беспозвоночные.

Молодые животные более восприимчивы, чем взрослые

Источники возбудителя – больные животные

Резервуары болезни – почва; дикие и домашние плотоядные; грызуны; хищные птицы

Способы заражения: алиментарный - через корм и воду; трансмиссивный - при наличии кровососущих насекомых; аэрогенный - чаще овцы при вдыхании пыли, содержащей споры возбудителя.

Люди могут заразиться при контакте с источниками возбудителя инфекции и резервуарами; с контаминированными животноводческими продуктами и сырьем; с объектами внешней среды; употребляя зараженные продукты в пищу

Пути выделения: с секретами и экскретами

Факторы передачи возбудителя: 1) секреты и экскреты больных восприимчивых животных; 2) трупы восприимчивых животных, продукты животного происхождения и продукты их переработки; 3) объекты окр среды, контаминированные возбудителем, включая почву, являющуюся резервуаром возбудителя сиб язвы.

Интенсивность проявления: спорадически (единичные случаи)

Сезонность проявления: в пастбищный период (особенно при скудном и сухом травостое, наличии кровососущих насекомых), в стойловый период (в связи с использованием инфицированных спорами кормов животного происхождения)

Периодичность проявления: зависит от изменений напряженности иммунитета, увеличения поголовья восприимчивых животных и др факторов

Предрасполагающие факторы: повреждение СО ротовой полости и глотки, гастроэнтериты, снижение резистентности животных

Для болезни характерна стационарность (стационарно неблагополучный пункт и почвенный очаг)

СНБП – это территории, привязанные к населенным пунктам, где когда либо регистрировали случаи заболевания животных сибирской язвы

• Старые – болезнь регистрировали до 2001г

  • Манифестные (периодическая активность в течение 10 лет): постоянно действующие (ежегодно/с интервалом до 5 лет), рецидивирующие (периодически с интервалом 5-10 лет)

  • Не манифестные (активность не проявляется в течение более 10 лет)

• Новые – регистрация болезни после 2001г

  • Зарегистрированные вновь

  • Зарегистрированные впервые

Почвенные очаги – места захоронения сибиреязвенных трупов животных (известные и неизвестные)

Наиболее опасные: 1) Падежные места; 2) Стихийные, неорганизованные захоронения; 3) Неизвестные условия захоронения

Клиническое проявление. Инкубационный период – в среднем 1-3 дня (от нескольких часов до 20 дней)

По характеру течения:

• Молниеносное (сверхострое)

• Острое

• Подострое

• Хроническое

• Абортивное

Исход - без лечения летальный

Молниеносное течение (чаще у МРС, реже у КРС и лошадей).

Отмечают возбуждение, повышение температуры тела, учащение пульса и дыхания, синюшность ВСО.

Животное внезапно падает и в судорогах погибает (от неск мин до неск часов)

Острое течение (характерно для КРС и лошадей)

Температура тела - до 42 гр, беспокойство, угнетение, отказ от корма, прекращение или резкое снижение лактации, мышечная дрожь, учащение пульса и дыхания, нарушение сердечной деятельности, синюшность ВСО, часто с точечными кровоизлияниями

У лошадей часто приступы колик. Иногда запор/понос с кровью, моча с кровью. Горячие припухлости, отеки в области глотки, гортани, шеи, подгрудка, живота.

Животные погибают на 2-3 день болезни. в период агонии пенистые выделения из носовой и ротовой полостей.

Подострое течение (чаще у лошадей)

Сходно с острым течением, но менее выражено, длится до 7 дней и более. На различных частях тела (чаще на груди, животе, вымени, лопатках, голове, в области анального отверстия) появляются отеки.

Хроническое течение (2-3 мес).

Исхудание, инфильтраты под нижней челюстью, поражение подчелюстных и заглоточных л/у.

Абортивное течение

Незначительный подъем температуры тела, угнетение, потеря аппетита, уменьшение секреции молока, истощение. Длится до 2х недель, редко дольше. Больное животное, как правило, выздоравливает.

Формы проявления:

Карбункулезная – чаще у свиней, лошадей, КРС; первичная (место внедрения возбудителя), вторичная (при остром/подостром течении - возникает в различных частях тела, но чаще в области головы, груди, плеч и живота.

В начале припухлости плотные, горячие, болезненные, затем - тестоватые, холодные, безболезненные

В центре припухлости ткани некротизируются и распадются → язва. Иногда такие опухоли образуются у КРС в виде пузырей на СО рта, на языке, губах, щеках, небе. Температура тела поднимается незначительно

Кишечная – расстройство ЖКТ: запор сменяется диареей, экскременты с примесью крови. Высокое повышение температуры. У лошадей - сильные колики

Легочная – признаки геморрагической пневмонии и острого отека легких

Ангинозная – чаще у свиней, протекает в форме ангины/фарингита, характеризующимся сильным опуханием в области гортани, переходящим на шею по ходу трахеи, на грудь и предплечье. Под давлением опухоли затрудняются дыхание и глотание, отмечается слюнотечение, синюшность СО, неподвижность шеи, кашель, хрипота

Иногда эти признаки отсутствуют – общее угнетение, слабость, отказ от корма