Immunologicheskie_aspekty_reprodukcii_ Belan_E_B2021

ПОНЯТИЕ ОБ ИММУНОЗАВИСИМОМ БЕСПЛОДИИ

Одной из причин бесплодия в браке являются иммунные механизмы. Случаи бесплодия иммунной природы составляют 10–20 % всех случаев бесплодия неясной этиологии.

Бесплодие иммунной природы может быть связано как с иммунными реакциями мужа против собственных спермиев, так и с иммунными реакциями жены против спермиев мужа.

По данным ВОЗ, более 50 % женщин, страдающих бесплодием, в раннем детстве получали искусственное вскармливание (не исключаются последствия недостатка пролактина в процессе формирования организма).

Причины бесплодия у мужчин

Простатит. При хроническом простатите снижается антибактериальная защита. В этиологии простатита доминируют грамположительные кокки (стафилококки, энтерококки).

Появление антител к сперме. Антитела выявляются у 15 % бесплодных мужчин. Антиспермальные IgG, IgM, IgА могут нарушать функциональную активность сперматозоидов (обездвиживать или приводить к их гибели), препятствовать проникновению в полость матки.

Причины индукции аутоиммунных реакций – нарушение механизмов иммуносупрессии. Активный механизм

– 40 –

подавления иммунного ответа у мужчин функционирует на всем пути продвижения сперматозоидов и обусловлен рядом иммуносупрессивных факторов.

Нарушение гематотестикулярного барьера.

Травма (холодовая и т.д.), вазэктомия (иссечение всего семявыносящего протока). Вазэктомия обусловливает появление аутоантител к сперме в 50 % случаев.

Причины бесплодия у женщин

Механизмы женского иммунного бесплодия менее ясны. У 40 % женщин беременность наступает после лечения стероидами.

Иммунологические причины бесплодия более подробно описаны в следующих разделах данного пособия.

ОБСЛЕДОВАНИЕ ПРИ ПОДОЗРЕНИИ НА ИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ БЕСПЛОДИЕ

Существуют качественные и количественные тесты определения иммунозависимого бесплодия. Главное условие их информативности – проведение в день овуляции.

К качественным тестам относится тест контакта спермы и цервикальной слизи (ТКСЦС), который объединил

всебе изучение способности к пенетрации сперматозоидов и «сродство» к ним цервикальной слизи. В норме сперматозоиды проникают в каплю цервикальной слизи и активно

вней мигрируют.

–41 –

Количественные иммунологические тесты определения антиспермальных антител (АСАТ) требуют специальной подготовки, поэтому в данном пособии лишь кратко изложена их методика. В настоящее время для иммунодиагностики бесплодия применяют тесты спермагглютинации и спермиммобилизации (в последнем, фактически, работают и спермцитотоксины).

Микроагглютинационный тест Фриберга (МТФ). Суть метода заключается в определении титра агглютинационных АСАТ в различном материале (плазме эякулята, экстрактах слизи канала шейки матки и в сыворотке крови обоих супругов). Проводится в день овуляции. Как уже отмечалось, спермагглютинины мало специфичны. Для повышения специфичности метода он был усовершенствован путем использования контролей, а также разведения биологических сред крови, эякулята, цервикальной слизи, что позволило более точно диагностировать иммунозависимое бесплодие и осуществлять контроль в динамике. В качестве контролей используются указанные биологические среды фертильной супружеской пары.

На практике важно проводить перекрестные пробы между биологическими средами бесплодных и фертильных субъектов, так как наличие в цервикальной слизи АСАТ к сперме донора-контроля свидетельствует о сенсибилизации женщины к сперматозоидам и других мужчин, а не только партнера.

Тест считается положительным с сывороткой крови

втитре 1 : 32, с секретом шейки матки – 1 : 16, с семенной

–42 –

Для выявления в сыворотке крови беременных анти- HLA-цитотоксических антител обычно используется ком-

племент-зависимый микролимфоцитотоксический тест.

Этот вариант иммунной цитотоксичности используют

вкачестве лабораторного теста для оценки возможного наличия в крови матери антител к клеточным антигенам отцовского происхождения плода.

Тест проводят следующим образом.

1.У (реципиента) матери берут периферическую кровь, получают сыворотку и раскапывают, например, двукратные разведения этой сыворотки в лунки планшета.

2.У донора (отца) берут периферическую кровь, выделяют из нее лейкоциты или фракцию мононуклеаров и аликвоты клеток, например по 2×105 на лунку, раскапывают

влунки с разведениями сыворотки реципиента.

3. Планшеты инкубируют в СО2-инкубаторе при 37 °С

втечение 45–60 мин.

4.Затем в лунки добавляют комплемент (заранее оттитрованную сыворотку кролика или морской свинки).

5.Продолжают инкубацию еще 30–45 мин.

6.Поврежденные клетки выявляют по включению суправитального красителя – трипанового синего, для чего из каждой лунки берут аликвоту клеток, добавляют к этой аликвоте 0,5%-й раствор трипанового синего и в камере Горяева подсчитывают число прокрашенных (поврежденных) и непрокрашенных (живых) клеток.

В случае если процент поврежденных клеток достоверно превышает таковой в контроле (т.е. в лунках, в которые

–44 –

не вносили сыворотку реципиента), то данный донор получает отвод.

Микролимфоцитотоксический тест применяют для серологического типирования HLA специфичностей. Основные этапы теста указаны на рис. 4. В качестве КМ используют выделенные из крови пациента мононуклеарные клетки серотипирования HLA специфичностей класса I или очищенную фракцию В-клеток, например, на колонке со стеклянной ватой, для тестирования специфичностей HLA класса II. Клетки инкубируют с панелью стандартных типирующих сывороток и после добавления комплемента определяют количество убитых и выживших клеток.

Рис. 4. Микролимфоцитотоксический тест (Л. В. Ковальчук, 20103)

3 Ковальчук Л. В. Иммунология : практикум. – Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 176 с.

– 45 –

ВТОРИЧНЫЙ ИММУНОДЕФИЦИТ

Вторичный иммунодефицит (ВИД) как причина женского бесплодия может сопровождать воспалительные заболевания целого ряда органов и систем, а также протекать на фоне различных синдромов – вегетососудистой дистонии, синдрома повышенной утомляемости, эндокринопатии и т. д. Выраженная иммунная недостаточность, как правило, сопровождает хроническую интоксикацию, невротические состояния, нарушения обмена веществ. При ВИД на фоне обострения воспалительных процессов (в частности вирусной этиологии) в связи с дисбалансом в звене иммунорегуляторных клеток возможна активация провоспалительных цитокинов, в том числе интерферонов, что способствует активации клеточного иммунитета с индукцией Т-киллеров и цитотоксических антител, способных повредить плод на ранних этапах развития. Указанные механизмы могут иметь место при бесплодии II – привычных спонтанных абортах.

Бесплодие в связи с ВИД может быть также результатом недостаточной изосенсибилизации женщины к антигену TLX из-за неполноценности механизма иммунологического распознавания вследствие снижения экспрессии молекул

– 46 –

HLA II класса и других рецепторов. Причиной может быть снижение экспрессии рецептора на яйцеклетке к антигену МА-1, представленному на сперматозоиде. Известно, что рецептор к МА-1 очень чувствителен к разного рода воздействиям (стрессу, токсическим веществам и, вероятно, к медиаторам с супрессорной активностью при ВИД). Вышеприведенные механизмы могут быть характерны для бесплодия I – отсутствия зачатия.

Бесплодной женщине с ВИД рекомендуется иммунологическое обследование.

Антигаметный иммунитет

Одним из иммунологических факторов, приводящих к бесплодию, является образование антиспермальных антител (АСАТ). Последние обнаруживаются у 9–36 % бесплодных пар.

У мужчин АСАТ возникают вследствие нарушения гематотестикулярного барьера.

Иммунная система формируется ещё в процессе внутриутробного развития, а образование спермы начинается значительно позже – в период полового созревания. Поскольку иммунная система не распознает специфические антигены спермы как безопасные, их контакту препятствуют естественные физиологические механизмы. Первым механизмом является гематотестикулярный барьер. Этот физический барьер, состоящий из промежуточных клеток (клеток Сертоли), расположенный между сосудами

исеменными канальцами, предотвращает столкновение

–47 –

сперматозоидов и иммунных клеток. Далее идут различные биологически активные жидкости, вырабатываемые яичками для торможения процесса активации иммунной системы. И последний – иммуноглобулин связывающий фактор, который также не дает сформироваться иммунному ответу.

Однако существуют факторы риска, способные привести к образованию и дальнейшему попаданию АСАТ в сперму. Среди них выделяют последствия травм и хирургических операций, различные инфекции, онкологию, крипторхизм, варикоцеле и закупорку семявыводящих путей.

У женщин АСАТ могут индуцироваться в процессе продолжительной семейной жизни в ответ на экпрессированные и/или сорбированные антигены сперматозоида. Из-за наличия микротравм в половых путях сперматозоиды проникают вглубь тканей. При определенных обстоятельствах женщина подвергается иммунизации сперматозоидами. К таким обстоятельствам относятся:

активация местного иммунитета при воспалительных процессах;

наличие перекрестных детерминант между сперматозоидами и возбудителями ранее перенесенных инфекций;

снижение иммуносупрессивных свойств семенной плазмы партнера;

генетическая предрасположенность иммунной системы к усиленному антителосинтезу.

Влияние АСАТ на репродуктивную функцию заключается в следующем:

–48 –

1.Снижение подвижности сперматозоидов, нарушение их активности.

Закрепляясь на мембране сперматозоидов в различных его частях, АСАТ тормозят движение сперматозоидов, причём не только при движении в мужском репродуктивном тракте, но и у женщин. АСАТ зачастую способствуют обездвиживанию и агглютинации («склеиванию») сперматозоидов. Чем больше количество АСАТ, тем ниже подвижность сперматозоидов. Влияет на активность сперматозоидов и место их фиксации: самое неблагоприятное – головка сперматозоида.

2.Препятствие попаданию сперматозоидов в цервикальную слизь.

Отмечается такое явление, как «дрожание сперматозоидов на месте» в случае, если они покрыты АСАТ. По некоторым предположениям, причиной этого может быть взаимодействие гликопротеиновых мицелл цервикальной слизи с Fc-участками антител. Обнаружить этот симптом можно с помощью пробы Курцрока – Миллера in vitro

ипробы Шуварского – Симса – Хюнера при осуществлении посткоитального теста.

3.Отрицательное воздействие на акросомальную реакцию и капацитацию.

Вмешиваясь в процесс взаимодействия половых клеток, АСАТ не позволяют сперматозоиду проникнуть внутрь оболочки яйцеклетки. Таким образом, акросомальная реакция сперматозоидов подавляется, в результате чего оплодотворение яйцеклетки становится невозможным.

–49 –