ФиÐиоÐогиÑ_и_ÑкоÐогиÑ_микÑооÑганиÐмов
.pdf
Антисептика – комплекс лечебно-профилактических мероприятий,
направленных на уничтожение или подавление размножения микроорганизмов
на коже, слизистых оболочках, в ране.
Антисептика включает различные методы:
механический (удаление некротизированных тканей и др.);
физический (дренирование ран и др.);
биологический (интраоперационное введение антибиотиков и др.);
химический (применение антисептиков).
Химические вещества, используемые для антисептики:
1.Галогены (препараты йода и хлора).
2.Окислители (перекись водорода и др.).
3.Производные фенолов (резорцин и др.).
4.Красители (бриллиантовый зеленый, метиленовый синий и др.).
5.Соединения тяжелых металлов (серебра, ртути, цинка и др.).
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
1. Выделение чистой культуры аэробов (продолжение).
II этап исследования. Учет характера роста колоний на пластинчатом МПА:
Макро- и микроскопическое изучение колоний.
|
Признаки |
Колония №1 |
Колония №2 |
|
|
|
|
1) размер |
|
|
|
|
|
|
|
2) |
характер поверхности |
|
|
|
|
|
|
3) |
рельеф |
|
|
|
|
|
|
4) |
характер краев |
|
|
|
|
|
|
5) оптические свойства |
|
|
|
|
|
|
|
6) цвет |
|
|
|
|
|
|
|
7) запах |
|
|
|
|
|
|
|
8) консистенция |
|
|
|
|
|
|
|
9) |
связь с питательной средой |
|
|
10) морфо-тинкториальные свойства
31
Для изучения морфо-тинкториальных свойств микроорганизмов, часть колонии используют для приготовления мазка и окрашивают его по Граму. Затем мазки микроскопируют. После микроскопии другую часть колонии пересевают для выделения чистой культуры и накопления биомассы на следующие питательные среды: колонию №1 – в МПБ, колонию №2 – на скошенный МПА.
Этапы посева в МПБ:
а) прокалить петлю. Приоткрыть чашку Петри с культурами и охлажденной петлей набрать культуру из колонии №1. Закрыть чашку;
б) над пламенем спиртовки открыть пробирку с МПБ, внести петлю с культурой в глубину МПБ. Закрыть пробирку над пламенем спиртовки. Прокалить петлю.
Этапы посева на скошенный МПА:
а) набрать культуру из колонии №2 так же, как из колонии №1; б) над пламенем спиртовки открыть пробирку со скошенным МПА. Внести
петлю культуры до дна пробирки и, скользя петлей по поверхности агара зигзагообразно снизу вверх, сделать посев. Закрыть пробирку, прокалить петлю.
Посевы поместить в термостат при температуре 37°С на 24 часа.
2. Действия медицинского работника при аварийной ситуации:
СанПин 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профи-
лактике инфекционных болезней».
При аварийной ситуации медицинскому работнику необходимо осуществ-
лять следующие мероприятия:
•в случае порезов и уколов немедленно снять перчатки, вымыть руки с мылом под проточной водой, обработать руки 70%-м спиртом, смазать ранку
5%-м спиртовым раствором йода;
32
•при попадании крови или других биологических жидкостей на кожные по-
кровы это место обрабатывают 70%-м спиртом, обмывают водой с мылом и повторно обрабатывают 70%-м спиртом;
•при попадании крови и других биологических жидкостей пациента на сли-
зистую глаз, носа и рта: ротовую полость, слизистую оболочку носа и глаз обильно промывают водой (не тереть);
•при попадании крови и других биологических жидкостей пациента на халат,
одежду: снять рабочую одежду и погрузить в дезинфицирующий раствор или в бикс (бак) для автоклавирования;
•при наличии риска заражения ВИЧ-инфекцией незамедлительно (не позднее
72 часов) начать прием антиретровирусных препаратов в целях посткон-
тактной профилактики заражения ВИЧ.
Необходимо незамедлительно после контакта обследовать на ВИЧ и ви-
русные гепатиты B и C лицо, которое может являться потенциальным источни-
ком заражения и контактировавшее с ним лицо методом экспресс-тестирования на антитела к ВИЧ с обязательным направлением образца крови для стандарт-
ного тестирования на ВИЧ….
Пострадавшего и лицо, которое может являться потенциальным источни-
ком заражения, необходимо опросить о носительстве вирусных гепатитов,
ИППП, воспалительных заболеваний мочеполовой сферы, других заболева-
ний…
33
Занятие №3
Тема. Экология микробов (микроэкология). Распространение микробов в окру-
жающей среде. Микробиота организма человека.
Цель занятия. Изучить микрофлору воздуха, воды, почвы, продуктов питания и критерии оценки их чистоты по санитарно-микробиологическим показателям.
Изучить микробиоту различных биотопов организма человека в норме. Получить представление об эубиозе и дисбиозе.
I.Теоретические знания:
1.Экология микробов (микроэкология).
2.Распространение микробов в окружающей среде.
3.Санитарная микробиология.
4.Микрофлора воздуха.
5.Методы и критерии оценки чистоты воздуха в медицинских учреждениях.
6.Микрофлора воды. Микробиологические показатели оценки качества питье-
вой воды.
7.Микрофлора почвы.
8.Микробиологические показатели доброкачественности пищевых продуктов.
9.Микробиота организма человека в норме.
10.Микробиота толстого кишечника.
11.Микробиота мочевого и полового тракта.
II.Практические навыки:
1.Изучить схему проведения III и IV этапов бактериологического исследования выделения чистой культуры аэробов (продолжение).
2.Изучить метод исследования микрофлоры воздуха аспирационным методом.
Определение чистоты воздуха в помещениях медицинских учреждений по микробному числу и количеству S. aureus, как санитарно-показательного микроорганизма.
3.Микроскопия мазков чистых культур микробиоты кишечника.
34
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ
1. Экология микробов (микроэкология).
Экология (от греч. oikos – дом, место обитания) микроорганизмов изуча-
ет взаимоотношения микроорганизмов друг с другом и с окружающей средой.
Микроорганизмы обитают в почве, воде, воздухе, на растениях, в организ-
ме человека, животных и др. Они – составная часть биоценоза – совокупности животных, растений и микроорганизмов, заселяющих биотоп – участок суши или водоема с однородными условиями жизни. Сообщество микроорганизмов,
обитающих на определенных участках среды, называется микробиоценозом.
2. Распространение микробов в окружающей среде.
Микроорганизмы окружающей среды участвуют в процессах круговорота веществ в природе, уничтожают остатки погибших животных и растений, по-
вышают плодородие почвы, поддерживают устойчивое равновесие в биосфере.
Попадая в организм человека некоторые микроорганизмы выполняют ряд по-
лезных функций для организма человека. Вместе с тем, объекты внешней среды
(воздух, вода, почва, пищевые продукты) могут выполнять роль факторов пере-
дачи микроорганизмов от больного к восприимчивому организму.
3. Санитарная микробиология.
Санитарная микробиология – раздел медицинской микробиологии, изу-
чающий микроорганизмы, содержащиеся в окружающей среде и способные оказывать неблагоприятное воздействие на состояние здоровья человека.
Санитарная микробиология:
•разрабатывает микробиологические показатели гигиенического нормирова-
ния;
•разрабатывает методы контроля за эффективностью обеззараживания объек-
тов окружающей среды;
35
•выявляет в объектах окружающей среды патогенные, условно-патогенные и санитарно-показательные микроорганизмы.
Основными показателями, которые использует санитарная микробиология,
являются наличие и концентрация санитарно-показательных микроорганизмов
и общее микробное число.
Санитарно-показательные микроорганизмы используют для косвенного определения возможного присутствия в объектах окружающей среды патоген-
ных микроорганизмов.
Выбор санитарно-показательного микроорганизма обусловлен:
1)одинаковыми с патогенами способами попадания в данный объект;
2)одинаковыми с патогенами сроками выживания в данном объекте.
Общее микробное число (ОМЧ) – это общее количество микроорганизмов в определенном объеме или массе исследуемого объекта (вода, воздух и др.).
4. Микрофлора воздуха.
Воздух является для микроорганизмов средой пребывания, а не средой оби-
тания. В нем отсутствуют питательные вещества и на бактерии губительно дей-
ствуют ультрафиолетовые лучи. Чаще всего в воздухе обнаруживают микрокок-
ки, споровые и пигментообразующие бактерии, плесневые грибы и другие са-
профитные микроорганизмы. Вместе с тем, воздушная среда является важным фактором в передаче многих инфекционных заболеваний (туберкулез, дифтерия,
коклюш, грипп и др.). Особенно высока частота передачи инфекционных агентов в воздухе закрытых помещений. Микробиологический анализ воздуха в жилых помещениях проводят только по эпидемическим показаниям при выявлении ин-
фекционного больного. В плановом порядке исследуют микробиологическую чи-
стоту воздуха в помещениях медицинских учреждений: операционных, родиль-
ных залах, палатах новорожденных и других, требующих асептических условий.
С целью снижения микробной обсемененности воздуха в медицинских учреждениях проводят влажную уборку и обработку помещений лампами УФ-
36
излучения, аэрозольную дезинфекцию в сочетании с вентиляцией и очисткой
(фильтрацией) поступающего воздуха (например, в операционных блоках).
5. Методы и критерии оценки чистоты воздуха в медицинских
учреждениях.
Санитарно-бактериологическое состояние воздуха оценивают по двум пока-
зателям (табл. 1):
1.Общее микробное число – это общее количество микробов в 1м3 воздуха.
2.Санитарно-показательный микроорганизм – S. aureus. Его наличие опре-
деляют в 1м3 воздуха.
Таблица 1. – Критерии оценки микробной чистоты воздуха в хирургиче-
ских и акушерских стационарах в соответствии с СанПиНом 2.1.3.2630-10 «Са-
нитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим
медицинскую деятельность» (в дальнейшем – СанПиН 2.1.3.2630-10)
|
|
|
Нормативные показатели, |
|
|
Место отбора проб |
Условия работы |
КОЕ/1 м3 |
|
|
ОМЧ |
Количество |
||
|
|
|
||
|
|
|
S. aureus |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Класс А (особо чистые): |
до начала работы |
не выше 200 |
не должно быть |
|
- |
операционные |
|
|
|
- |
родильные залы |
|
|
|
- |
послеродовые палаты |
во время работы |
не выше 500 |
не должно быть |
|
(по типу мать-дитя) |
|||
|
|
|
|
|
- |
палаты для ожоговых |
|
|
|
|
больных |
|
|
|
Класс Б (чистые): |
до начала работы |
не выше 500 |
не должно быть |
|
- палаты для недоно- |
во время работы |
не выше 750 |
не должно быть |
|
|
шенных детей |
|||
|
|
|
||
|
|
|
|
|
Исследование воздуха проводят аспирационным методом в аппарате Кротова (рис. 23), который устроен таким образом, что воздух с заданной скоростью (25 л/мин) всасывается через клиновидную щель крышки аппарата,
под которой находится чашка Петри с питательной средой. При этом частицы
37
аэрозоля, содержащие микроорганизмы, равномерно распределяются по всей поверхности среды благодаря постоянному вращению чашки. Для определе-
ния ОМЧ используют МПА, а для определения S. aureus – желточно-солевой агар (ЖСА). После посева чашки с МПА и ЖСА инкубируют в термостате при температуре 37оС в течение 24-48 часов, затем подсчитывают количество КОЕ в 1 м3 воздуха.
Рисунок 23 – Аппарат Кротова (1 – клиновидная щель, 2 – место для чашки Петри с питательной средой, 3 – шкала скорости всасывания воздуха).
6. Микрофлора воды. Микробиологические показатели оценки
качества питьевой воды.
Микрофлора воды отражает микробный пейзаж почвы. Микробная обсе-
мененность воды открытых водоемов зависит от поступления в них ливневых,
талых и сточных вод. В связи с этим через воду могут передаваться возбуди-
тели холеры, брюшного тифа, дизентерии, лептоспироза, энтеровирусных ин-
фекций и др.
Санитарно-показательными микроорганизмами питьевой воды явля-
ются колиформные бактерии: эшерихии, клебсиеллы, цитробактеры, энте-
робактеры и др. Обнаружение их в воде указывает на наличие свежего фе-
кального загрязнения.
38
Оценку микробиологической доброкачественности питьевой воды в Рос-
сии проводят по нескольким показателям (табл. 2), предусмотренным соответ-
ствующими санитарными правилами и нормами (СанПиН, 2010 г.).
Таблица 2 – Микробиологические нормативы качества питьевой воды
Показатели |
Единицы измерения |
Нормативы |
|
Общее микробное число |
Число образующих колонии |
Не более 50 |
|
бактерий в 1 мл (КОЕ/мл) |
|||
|
|
||
Общие колиформные бактерии |
Число бактерий в 100 мл |
Отсутствие |
|
Термотолерантные |
Число бактерий в 100 мл |
Отсутствие |
|
колиформные бактерии |
|||
|
|
||
Коли-фаги |
Число бляшкообразуюших |
Отсутствие |
|
единиц (БОЕ) в 100 мл |
|||
|
|
||
Споры сульфитредуцирующих |
Число спор в 20 мл |
Отсутствие |
|
клостридий |
|||
|
|
||
Цисты лямблий |
Число цист в 50 л |
Отсутствие |
7. Микрофлора почвы.
Почва является основной средой обитания неболезнетворных микробов,
принимающих участие в процессах формирования и самоочищения почвы, а
также в круговороте веществ в природе (азотфиксирующие, нитрифицирую-
щие и другие бактерии).
Болезнетворные бактерии попадают в почву с испражнениями человека и животных, а также обнаруживаются в местах захоронения животных, погиб-
ших от инфекций. Чаще это споровые бактерии (возбудители газовой гангре-
ны, столбняка, ботулизма, сибирской язвы), которые могут годами сохраняться в почве. Реже обнаруживают возбудителей кишечных инфекций (холера, ди-
зентерия, брюшной тиф и др.). Сроки их сохранения в почве варьируют от не-
скольких часов до нескольких месяцев.
Санитарно-показательными микроорганизмами почвы являются: коли-
формные бактерии (эшерихии, клебсиеллы, цитробактеры, энтеробактеры),
возбудитель газовой гангрены (C. perfringens), а также термотолерантные бак-
терии, растущие при температуре 600С.
39
8. Микробиологические показатели доброкачественности пище-
вых продуктов.
Оценка качества пищевых продуктов проводится согласно санитарным
правилам и нормам (СанПин, 2010 г.) (табл. 3).
Таблица 3 – Микробиологические показатели качества пищевых продуктов
|
Группы контролируемых микроорганизмов |
Нормативные показатели |
||
|
I. Санитарно-показательные: |
Количество |
колониеобразу- |
|
|
1. Количество мезофильных аэробных и факуль- |
юших единиц (КОЕ) в 1 г (мл) |
||
|
тативно-анаэробных микроорганизмов (Bacil- |
продукта должно быть не бо- |
||
|
lus, Clostridium, Pseudomonas) |
лее допустимого уровня. |
||
|
2. Колиформные бактерии (БГКП): E. coli, En- |
Масса продукта (г), в которой |
||
|
terobacter, Citrobacter |
не допускается содержание |
||
|
II. Условно-патогенные бактерии (УПБ): S. au- |
БГКП, УПБ, ПМ и МП. Варь- |
||
|
reus, бактерии рода Proteus, Bacillus cereus, |
ирует от 0,0001 г до 100 г в за- |
||
|
сульфитредуцирующие клостридии |
висимости от конкретно опре- |
||
|
Ш. Патогенные микроорганизмы (ПМ), в том |
деляемых бактерий и характе- |
||
|
числе сальмонеллы |
ра продукта. Патогенные мик- |
||
|
IV. Микроорганизмы порчи (МП): в основном |
роорганизмы не должны обна- |
||
|
дрожжи и плесневые грибы |
руживаться в 25 г продукта. |
||
|
|
|
|
|
9. Микробиота организма человека в норме.
Организм человека заселен (колонизирован) многочисленными видами
микробов. Они представляют собой сообщества (микробиоценозы), образую-
щие устойчивую к различным воздействиям биологическую пленку на коже,
слизистых оболочках открытых полостей организма.
Таким образом, микробиота – это разнообразие микроорганизмов, нахо-
дящихся в симбиозе с организмом человека.
Плотность популяции микробов и их взаимоотношения определяются по-
нятием Quorum Sensing (чувство «кворума»). Чувство «кворума» – способ-
ность некоторых бактерий общаться и координировать свое поведение за счет
секреции молекулярных сигналов.
Микробиом человека – общий генетический материал микробных сооб-
ществ, населяющих человеческий организм, совокупность разнообразия генов
микробиоты организма человека.
40
