Методички для студентов / 20. Возбудители бактериальных кишечных инфекций эшерихии, сальмонеллы

идентификацию по антигенным признакам.

7.2.Разбор с преподавателем узловых вопросов, необходимых для освоения темы занятия.

E.coli, являясь условно-патогенным микроорганизмом, вызывает различные заболевания гнойные воспаления (холециститы, пиелиты и др), септицемии.

Патогенные E.coli вызывают эшерихиозов (диарей). В зависимости от наличия тех или иных факторов патогенности диареегенные E.coli

подразделяются на следующие категории:

Энтеропатогенные E.coli (ЭПКП) вызывают колиэнтерит у детей первого года жизни (0111, 055 и др.).

Энтероинвазивные E.coli(029,0124 и др.) обладают способностью внедряться в эпитеальные клепки слизистой оболочки кишечника и размножаться внутри них, вызывая их разрушение. Заболевание протекает по типу дизентерии, сальмонеллеза.

Энтеротоксигенные E.coli(17 серогрупп) обладают способностью вырабатывать термолабильный энтеротоксин, сходный по механизму действия с холерным. Заболевание протекает по типу холеры.

Энтерогеморрагические t.coli(0 157, 026, 0111, 0145) вырабатывают токсины, разрушающие клетки эндотелия мелких кровеносных сосудов.

Начало заболевания острое, возникают кишечные спазмы, появляется понос, вначале водянистый, затем – с кровью.

Энтероадгерентные – не выяснены.

Дизентерия - инфекционное заболевание, характеризующееся общей интоксикацией организма, поносом и своеобразным поражением слизистой оболочки толстого кишечника.

Дизентерийные палочки -грамотрицательные, неподвижные бактерии. По способности ферментировать маннит дифференцируются на маннитотрицательные (Sh.dysenteriae) и маннитположительные (остальные шигеллы). Sh.sonnei могут в течение 2 суток сбраживать лактозу до кислоты.

Шигеллы обладают 0-соматическим антигеном, который обусловливает их антигенную разнородность. У шигелл имеется эндотоксин и продуцируют экзотоксин.

Резистентность во внешней среде невелика и неоднородна.

практических

приемов по данной теме.

-получение изолированных колоний;

-посев на среду Клиглера штрихами и уколом в глубину

агара;

-постановка РА на стекле капельным способом.

1)Питательные среды Эндо, Плоскирева, Клиглера, Ресселя с посевами эшерихий, сальмонелл и без них.

2)Пестрые ряды с посевами эшерихий, сальмонелл брюшного тифа

ипаратифов.

7.4.Самостоятельная работа студентов под контролем

преподавателя.

Составить схему бактериологической диагностики

колиэнтерита и «ранней» диагностики брюшного тифа.

Бактериологическое исследование испражнения с целью

выделения чистой культуры E.coli и идентификации.

Ранняя диагностика брюшного тифа

Цель: выделение возбудителя и его идентификация

1) Провести идентификацию культур, подозрительных на ЭПКП, S.

typhi, SPA, SPB и S. sonnei по биохимическим признакам (поведения

бактерий на коротком пестром ряде и среде Ресселя (готовые реакции);

3)Постановка реакции агглютинации на стекле с

группоспецифическими (ОКА-, ОКВ-, ОКС-, ОКД-, ОКЕ-) и

типоспецифическими (О20, О26, О55, О111) сыворотками с целью идентификации ЭПКП.

4) Идентифицировать чистую культуру ЭПКП по готовой реакции

агглютинации с живой и гретой культурами.

5)Провести идентификацию культуры, подозрительной на S. typhi

(постановка реакции агглютинации на стекле с антисыворотками против

sonnei (постановка реакции агглютинации на стекле с антисыворотками против против гр.B и D).

7) Прочитать и оценить готовую реакцию агглютинации Видаля.

Ингредиенты, механизм, учет и недостатки.

Учет результатов различных вариантов реакции Видаля

Цель: Обнаружение приобретенных антител к брюшнотифозным и паратифозным бактериям.

Примечание: (+) – выпадение осадка (агглютината) (-) – отсутствие осадка

8)Обосновать выбор методов, позволяющих выявить бактерионосительство у людей, перенесших брюшной тиф.

9)Прочитать и оценить готовую РПГА с Vi-диагностикумом для установления тифозного микробоносительства. Ингредиенты, механизм,

учет реакции.

Учет результатов готовой реакции пассивной Viгемагглютинации.

Цель: выявление Vi - антител в сыворотке крови Компоненты реакции:

а) исследуемая сыворотка крови;

б) эритроцитарный Vi -диагностикум; в) физиологический раствор.

Примечание: (+) – оседание эритроцитов в виде зонтика; (-) – оседание эритроцитов в виде точки или кольца.

дизентерии и холеры.

Бактериологическое исследование с целью выделения чистой культуры возбудителя дизентерии и идентификации.

1-й этап. Цель: получение изолированных колоний шигелл Наилучшим способом является взятие фекалий тампоном непосредственно из прямой кишки или с помощью ректальных трубок.

Посев производят немедленно после получения испражнений.

Ход работы

-Посев испражнения на среду Плоскирева

-Инкубации в течение 18-24 час. при 37С.

2-й этап. Цель: выделение чтстой культуры возбудителя дизентерии.

Ход работы:

-Макроскопическое описание выросших колоний на среде

Плоскирева.

-Микроскопическое исследование колоний типичных для шигелл

(бесцветные или бледно-розовые). Из 1/2 части колонии приготовить мазки и окрасить по Граму.

- по результатам микроскопии, по характеру роста на средах написать предварительный ответ.

-Посев небольшой части колонии на скошенный МПА

-Посев небольшой части колонии на среду Клиглера ( посев

производят штрихами и уколом в глубину агара).

- Идентификация по ферментативной активности (Обратить внимание на изменение цвета столбика агара и отсутствие почернения по ходу посева уколом).

- Идентификация по антигенной структуре, то есть постановка РА на стекле с сыворотками против Флекснера (гр.В) и Зонне (гр.Д) При (+)-й

реакции появляются хлопья, при (-)-й – равномерное помутнение.

4-й этап. Написать окончательный ответ по результатам бактериологического исследования.

Идентификация выделенной чистой культуры вибриона (возбудителя холеры)

sonnei (постановка реакции агглютинации на стекле с антисыворотками

против против гр.B и D).

3) Провести идентификацию культуры, подозрительной на холерную по биохимическим признакам (поведения вибриона на средах с сахарозой, маннозой, аробинозой (готовая реакция);

- по антигенным признакам (постановка реакции агглютинации на стекле с О1-противохолерной сывороткой);

- по чувствительности к фагам ( учет готовой реакции

фаголизиса холерных вибрионов монофагами С и Эльтор).

7.4.Контроль конечного уровня усвоения темы:

ТЕСТЫ 4-х ТИПОВ (эшерихии).

ТЕСТЫ 1 ТИПА.

Для каждого вопроса выберите один наиболее правильный

ответ

1.Назовите возбудителя колиэнтерита. A. Лептоспира интерроганс

В. Протеус вулгарис С. Шигелла Зоне Д. ЭПКП 1 категории

Е. ЭПКП 2 категории