7.2 Самостоятельная работа под контролем преподавателя.
Воспроизведение адреналинового отека легких у мышей
Воспроизведение адреналинового отека легких у мышей на фоне наркоза
Изучение изменения онкотического давления на развитие отека и обезвоживания
Проведение пробы Ривольта на белок
Опыт № 1* Адреналиновый отёк легких у мышей
Опыт ставят на двух предварительно взвешенных мышах. Подсчитывают у обоих животных исходную частоту дыхания, обращают внимание на амплитуду дыхательных движений и поведение. Затем одной из мышек (подопытной) внутрибрюшинно вводят 1 мл 0,1% раствора адреналина. Второй (контрольной) мышке – такой же объём физиологического раствора. Каждые 5-10 минут у животных определяют частоту и амплитуду дыхательных движений, наблюдают изменение окраски глаз и слизистых и замечают время от момента введения адреналина до гибели подопытной мыши (если через 30-40 минут мышь не погибла, то её забивают).
Погибшую мышь прикалывают булавками к дощечке, вскрывают грудную клетку и извлекают легкие, которые помещают на часовое стекло. При внешнем осмотре легких обратить внимание на их объём, окраску, наличие кровоизлияний. После этого легкие, освобожденные от трахеи, сердца и мягких тканей, взвесить на аптечных весах и вычислить легочный коэффициент.
условных единиц у здоровой мыши.
Как правило, у подопытной мыши развивается отёк легких.
Какие изменения свидетельствуют о развитии отёка легких?
Каковы основные патогенетические факторы, вызывающие отёк легких при введении адреналина?
Опыт № 2* Роль функционального состояния центральной нервной системы в развитии адреналинового отёка легких у мышей
Подопытная мышь наркотизируется внутрибрюшинным введением 0,2 мл 1% раствора гексенала. После наступления наркотического сна мышке внутрибрюшинно вводят 1 мл 0,1% раствора адреналина. Наблюдают и контролируют те же показатели (срок жизни после введения адреналина, частоту и амплитуду дыхательных движений и проч.), что и в опыте №1.
Если через 20 минут после введения адреналина наркотизированная мышь не погибнет, то животное забивают и высчитывают легочный коэффициент.
Результаты, полученные в опыте №1 и №2, сравнивают, объединяют в виде таблицы и делают соответствующие выводы.
1. Как влияет функциональное состояние центральной нервной системы на развитие экспериментального отека легких?
Опыт № 3 Влияние изменения онкотического давления на развитие отёка и обезвоживания
Двух лягушек, обездвиженных разрушением спинного мозга, приколоть на дощечках вверх брюшком. Широко вскрыть грудную клетку и сердечную сорочку, подвести лигатуру под основную ветвь аорты. Канюлю, заполненную физиологическим раствором, вставить в аорту в периферическом (от сердца) направлении и перевязать у шейки лигатурой. Переднюю брюшную стенку разрезать по средней линии до лонного сочленения и далее в стороны, чтобы обеспечить сток жидкости из брюшной полости. Лягушек вместе с дощечкой и канюлей взвешивают и записывают первоначальный вес. Затем одну лягушку при помощи резиновой трубочки подсоединяют к бюретке с физиологическим раствором, другую к бюретке, заполненной лошадиной сывороткой. Уровни жидкостей в обеих бюретках и скорость перфузии должны быть одинаковыми для обеспечения равнозначных условий опыта. Скорость перфузии регулируется винтовым зажимом, который находится на резиновой трубке. Через час после начала перфузии, лягушек отсоединить от бюреток и взвесить. Отметить разницу в весе до и после перфузии физиологическим раствором и сывороткой.
1. Каков механизм развития отёка и обезвоживания у подопытных лягушек?
Опыт № 4 Отличие транссудата от экссудата
Проба Ривальта на белок. В две пробирки Видаля взять по 1,5 мл реактива Ривальта (раствор уксусной кислоты со спиртом). Добавить в первую пробирку одну каплю транссудата, а в другую одну каплю экссудата. Благодаря наличию в экссудате большого количества белка с преобладанием фракции глобулина происходит образование белого облачка вследствие осаждения белка. В пробирке с транссудатом облачко не появляется или может быть едва заметным. Полученные результаты записать в тетрадь и сделать выводы.
1. Каковы основные отличительные особенности экссудата и транссудата?
Работа студентов с бланками номограмм Зиггарда-Андерсона
Номограмма представляет собой специальный логарифмический график. На оси абсцисс отложено значение РН в пределах 6,8-7,8, а на оси ординат РСО2 в пределах 10-150 мм.рт.ст. По номограмме можно читать все показатели КОС: 1) РСО2 истинное (актуальное) напряжение в крови показателя СО2, 2) SB- стандартный бикарбонат крови при гемоглобине 100%, рСО2 40 мм.рт.ст. и температуре 38 градусов 3) BE избыток или дефицит буферных оснований. Этот показатель характеризует смещение титруемых буферных анионов крови по отношению к стандартным условиям (РН 7,4, РСО2 40 мм.рт.ст., температура 38 градусов) 4) ВВ буферные основания крови (ионы бикарбонатов, белков, буферные системы эритроцитов в мМоль на 1 литр), 5)
Пример: пусть РН крови равен 7,24. После эквилибрации этой крови с первой стандартной газовой смесью (28 мм.рт.ст.) ее РН стал 7,39. Наносим найденное значение РН 7,39 и РСО2 28 мм.рт.ст. эквилибрированной крови на номограмму и находи точку их пересечения (В). После эквилибрации исследуемой крови со второй стандартной газовой смесью с РСО2 58 мм.рт.ст. ее РН стал 7,18. Как и в предыдущем случаи находим точку пересечения на номограмме (А). Через точки А и В проводим линию, которая и является «буферной линией» исследуемой крови. Точка пересечения буферной линии с изобарой РСО2 40 мм.рт.ст. указывает величину стандартного бикарбоната (в данном случаи SB17,5 ммоль на литр). Для определения истинного РСО2 исследуемой крови сначала находим точку пересечения (С) линии АВ с линием РН исследуемой крови. Соответственно точке С определяют значение РСО2. В нашем примере РСО2 равен 47 мм.рт.ст. На месте пересечения буферной линии крови АВ с линиями буферных оснований и сдвига буферных оснований определяют соответственно значение ВВ (38 ммоль на л) и ВЕ (-7ммоль на л)
Самостоятельно рассчитывают показатели КОС если известно:
А) РН актуальное 7,37
Б) РН1 эквилибровачное при рСО2 28 мм.рт.ст – 7,48
В)РН2 эквилибровачное при рСО2 58 мм.рт.ст – 7,26