7 Билет
Методы генетического взаимодействия вирусов. Негенетическое взаимодействие.
Взаимодействие вирусов между собой может происходить только при заражении одной клетки несколькими вирусами (смешанная инфекция). При этом характер взаимодействия в условиях смешанной инфекции может быть генетический и негенетический.
Генетические взаимодействия: 1. Кросс-реактивация 2. Множественная реактивация. 3. Пересортировка генов.
Негенетические взаимодействия.
1. Комплементация. При этом дефектный (мутантный) по функциональному белку вирус не способен к собственной репродукции и требует помощника. В этом случае вирусом - помощником может являться как родственный недефектный вирус, так и биологически неродственный вирус (лейкоз птиц и вирус саркомы Рауса).
2. Негенетическая реактивация. В случае проникновения в клетку вместе с полноценным живым вирусом
дефектного по структурному белку инактивированного вируса возможна репродукция последнего. При этом живой вирус, используя собственные ферменты, раздевает инактивированный вирус, после чего начинается репликация его нуклеиновой кислоты.
3. Фенотипическое смешивание (транскапсидация). Является разновидностью гибридизации, при которой
полноценный геном одного вируса в процессе сборки заключается в белковую оболочку (капсид) другого вируса. В этом случае образующиеся вирусы-гибриды являются генетически полноценными, то есть содержат неизмененный геном исходного вируса.
При всех способах взаимодействия вирусов между собой явления, при которых происходит подавление активности одного вирус другим, условно называют интерференцией. Взаимодействия вирусов, при которых происходит повышение активности участвующих вирусов, называют экзальтацией
Принцип работы электронного микроскопа, разрешающая способность, приготовление препаратов
В электронном микроскопе образец облучается пучком электронов. Длина же электронной волны значительно меньше, чем световой. Соответственно, волна “чувствует” меньшие препятствия: разрешающая способность микроскопа оказывается выше. Конструктивная особенность состоит в том, что в электронном микроскопе в качестве линз используются электромагнитные катушки.
Типы электронных микроскопов трансмиссионные (просвечивающие) и сканирующие (растровые).
1. При трансмиссионной микроскопии пучок электронов проходит через изучаемый объект, и в результате получается плоскостное изображение объекта.
2. При сканирующей микроскопии на поверхность объекта вначале наносится металлическое напыление, а
в ходе микроскопии электронный пучок последовательно “пробегает” по всем точкам поверхности объекта (сканирует поверхность), выбивая из напылённого вещества вторичные электроны (бета-лучи). Последние формируют пространственное изображение поверхности.
Особенности приготовления препарата.
1. Взятие материала и фиксация Материал берут очень маленькими кусочками (порядка 1 мм 3 ), а фиксацию осуществляют обычно в 2 стадии: вначале глутаральдегидом (стабилизация белков), затем - четырёхокисью осмия (стабилизация фосфолипидов и контрастирование ткани).
2. Уплотнение материала 1) Образцы, как обычно, обезвоживают, а для их дальнейшего уплотнения используют эпоксидные смолы. 2) а) Заливку производят в специальных формах, б) затвердевание смеси происходит путём её полимеризации в термостате, в) и затвердевшие блоки имеют вид маленьких свечей.
3. Приготовление срезов 1) Срез делают с помощью ультратома; их толщина - 30-50 нм (ср. с
микротомными срезами - 10.000 – 20.000 нм). 2) Затем их переносят на сеточки (играющие роль предметного стекла).
4.Окрашивание срезов 1) а) Окрашивание срезов сводится к их контрастированию с помощью солей тяжёлых металлов (свинца, вольфрама, урана). б) Эти соли осаждаются на фосфолипидах мембран и поглощают электроны. 2) Поэтому соответствующие места клетки выглядят более тёмными.
Парагрипп-3
Paragrippus bovum, инфекционный бронхит, бронхопневмония, острый катар верхних дыхательных путей, транспортная лихорадка, параинфлуенца-3, parainfluenza-3 – транспортная лихорадка, параинфлюэнца - 3, острая контагиозная вирусная болезнь, гл. обр. телят, характеризующаяся преим. поражением органов дыхания. Болезнь регистрируется во всех странах, где развито скотоводство. В естеств. условиях вирус поражает в основном кр. рог. скот, редко — овец, лошадей и буйволов.
РНК - вирус, относящийся к сем. Paramyxoviridae Вирус обладает гемолитич., гемагглютинирующим и гемадсорбирующим свойствами. Размеры вириона — 150—250 нм. Источник возбудителя инфекции — больное животное, выделявщие вирус с выдыхаемым воздухом, носовой слизью, а также с вагинальными истечениями и спермой. Болезни способствуют транспортировка и перегруппировка телят. Животные чаще заражаются аэрогенно, но возможны алиментарный и половой пути инфицирования.
Возбудитель погибает при температуре 56С в течение часа, при 36С — за 5 ч. К низкой температуре он устойчив и сохраняет вирулентность при 4-кратном замораживании и оттаивании; в лиофильном состоянии при; 4С жизнеспособен до 2 лет. Обезвреживают вирус ультрафиолетовые лучи, а так- же 1—2%-ные растворы кислот и щелочей.
Наиболее активно вирус репродуцируется в клетках почки и легкого теленка. В культуре клеток вызывает ЦПД, характеризующееся образованием симпластов за счет слияния нескольких клеток, а в цитоплазме, и ядрах клеток — формирование эозинофильных включений. В куриных эмбрионах вирус лучше накапливается при заражении их в амниотическую полость.
Пат.мат: носовую слизь, лимфоузлы (бронхиальные, средостенные заглоточйые), слизистую оболочку носовой полости, гортани, трахеи, кусочки легких.
Инкубац. период 24—30 ч. Заболевание чаще начинается с лихорадки на 2—3-й сут после заражения, макс. подъем темп-ры до 41ºС и более отмечают на 3—4-е или 6—7-е сут. Аппетит ухудшается, дыхание становится поверхностным и частым, появляются слизисто-гнойные истечения из носа, слезотечение и кашель. Иногда первые симптомы болезни — серозный конъюнктивит и ринит, чрезмерное слюноотделение, а у нек-рых телят — и диарея. У взрослых животных болезнь, как правило, не сопровождается симптомами респираторного заболевания. У стельных коров инфекция может привести к внутриутробному заражению плода, абортам или рождению нежизнеспособных телят.
Иммунитет: переболевшие животные, как правило, повторно не заболевают. У телят колостральный иммунитет сохраняется до 2—4 месячного возраста. Для специфической профилактики используют гипериммунные сыворотки и сыворотки (полиглобулины) животных-реконвалесцентов.
Для серологического исследования направляют кровь, которую исследуют в РТГА, РНГА, РИФ.
4 билет (неполный, надо спросить какой еще вопрос в билете).
Задачи ветеринарной вирусологии в решении проблем обеспечение население продовольствием. Понятие о генотипе и фенотипе вирусов. Генетические признаки вирусов.
Задачами Государственной ветеринарной службы области являются: предупреждение и ликвидация заразных и массовых незаразных болезней животных; обеспечение безопасности продуктов и сырья животного происхождения в ветеринарно-санитарном отношении; защита населения от болезней, общих для человека и животных; охрана территории области от заноса заразных болезней животных, от ввоза сырья и продуктов животного происхождения, опасных по ветеринарно-санитарным показателям, из иностранных государств, республик, краев и областей Российской Федерации. Медицинская и ветеринарная вирусология прежде всего рассматривают вирусы, поражающие человека и животных, изучает их роль в развитии инфекционных и онкологических заболеваний, определяет способы диагностики, терапии и профилактики вирусных заболеваний.
Ну и типа, если логически подумать, то нужно будет сказать, мол ветеринарная вирусология предотвращает распространение вирусных инфекций, которые наносят огромный экономический ущерб в оснащении населения продуктами (типа когда на ферме заболевает одна свинья, то потом заразится все стадо, их мясо могут использовать как продукты для человека, в итоге заражается и человек).
Генотип – это постоянное свойство вируса, которое меняется только в результате мутации. Наследственная информация, содержащаяся в геноме, обеспечивает воспроизводство вируса, а генетическое разнообразие, представленное в генофонде, позволяет вирусам приспосабливаться и выживать в изменяющихся внешних условиях. Фенотип – это совокупность всех внешних и внутренних признаков, а также функций данного вируса. Фенотип не является постоянным свойством, а может изменяться в процессе развития под влияние внешних условий. Все признаки вирусов, информация о которых закодирована в генах, называются генетическими. При этом многие признаки обычно обусловливаются несколькими генами.
Генетические признаки у штаммов определяют после предварительного их клонирования. Все их условно разделяют на основные группы:
-групповые и видовые: тип и морфология нуклеиновой кислоты; тип капсида и количество капсомеров; антигенная
специфичность; устойчивость к органическим растворителям и детергентам; наличие фермента нейраминидазы и антигеновхозяина; гемагглютинирующие свойства; патогенность для определенного вида живых чувствительных систем;
-внутриштаммовые: гемагглютинирующая активность; терморезистентность; отношение к УФ-лучам, ингибиторам;
характер бляшек и др.
Бешенство
Neuroryctes rabid, водобоязнь, фободипсия, гидрофобия, рабиес - острая инфекционная болезнь, протекающая с тяжелым поражением НС, как правило, с летальным исходом. Восприимчивы человек и все млекопитающие животные. РНК – сод, пулевидной формы, 180 нм, спирал.сим, сем: Rhabdoviridae. Род: Lyssavirus.
Источник - инфицированные животные (лисы, волки, собаки, кошки, грызуны, лошади, мелкий и крупный рогатый скот), механизм заражения – контактный (при укусе или ослюнении животным поврежденной кожи или слизистых). Природный резервуар – летучие мыши. Устойчив к фенолу, замораживанию, антибиотикам. Разрушается кислотами, щелочами, нагреванием (при 56°С инактивируется в течение 15 мин, при кипячении - за 2 мин. Чувствителен к ультрафиолетовым и прямым солнечным лучам, к этанолу к высушиванию. Различают уличный (циркулирующий в природе) и фиксированный вирус бешенства, поддерживаемый в лабораториях. Фиксированный вирус не выделяется со слюной и не может быть передан во время укуса. Размножается в различных тканевых культурах (первично трипсинизированных и перевиваемых, в культурах диплоидных клеток человека или фибробластов эмбриона хомячка), а после адаптации - на куриных и утиных эмбрионах, что используют при получении антирабических вакцин. Пат.мат: для исследования на бешенство в лабораторию направляют свежий труп или голову мелких животных, а от крупных - голову или головной мозг. Внедрение вируса в организм через поврежденную кожу или слизистые--> репликация в миоцитах--> центростремительное продвижение по афферентным нервных волокнам в ЦНС с последующим поражением и гибелью клеток головного и спинного мозга (вирус тропен к продолговатому мозгу, коре больших полушарий и мозжечка, к таламусу и гипоталамусу, подкорковым ганглиям, ядрам черепных нервов и др.) --> центробежное распространение по эфферентным волокнам практически во все внутренние органы (в т.ч. и в слюнные железы). После заражения в начальном периоде может подниматься t тела, расширяться зрачки. Постепенно усиливается возбуждение животного, появляется раздражительность, светобоязнь, дрожь, нарушение координации движений. В некоторых случаях наблюдается диарея. По мере прогрессирования заболевания может проявляться агрессивное поведение животного, оно может кидаться и кусать других животных и людей. Или наоборот, у многих диких животных (особенно лис) пропадает страх перед людьми, они часто подходят к населенным пунктам, становятся ласковыми, стремятся облизать. Далее при прогрессировании болезни появляются параличи, в том числе челюстей, судороги, что приводит к гибели животного. Переболевших нет, чудес не бывает, вакцина антирабическая. Общеклинические исследования: ОАК - лимфоцитарный лейкоцитоз при анэозинофилии, обнаружение АГ вируса ИФ-методом в отпечатках роговицы, биоптатах кожи и мозга, вирусологический метод – выделение культуры вируса из слюны, ликвора и слезной жидкости с помощью биопробы на новорожденных мышатах. На секции диагноз подтверждают гистологическим обнаружением оксифильных включений (телец Бабеша-Негри) в клетках аммонова рога или гиппокампа (обусловлены репликацией и накоплением вирионов бешенства)
