2. БИОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

Цель: Диагностика наследственных болезней обмена веществ (НБО), в основе которых лежит дефект фермента, ведущий к накоплению субстрата или дефициту продукта реакции.

2.1.Основные подходы

1.Качественные и количественные пробы: Обнаружение аномальных метаболитов в биологических жидкостях (моче, крови, поте).

oПример: Проба Феллинга на фенилкетонурию (ФКУ) — при добавлении 5% хлорного железа к моче, содержащей фенилпируват, появляется сине-зеленая окраска.

2.Определение активности ферментов: Прямое измерение активности специфического фермента в плазме крови, эритроцитах, лейкоцитах или культуре фибробластов.

oПример: Определение активности гексозаминидазы А для диагностики болезни Тея-Сакса.

3.Нагрузочные пробы: Оценка метаболического пути после введения предшественника.

oПример: Проба с фенилаланином для подтверждения ФКУ.

2.2.Доклиническая диагностика (скрининговые программы)

Это массовое обследование новорожденных для раннего выявления НБО, поддающихся лечению. Цель — предотвращение инвалидизации.

•Неонатальный скрининг (ННС), "пяточный тест":

oСроки: У доношенных — на 4-5-й день жизни (24-48 часов жизни — слишком рано, возможен ложноотрицательный результат), у недоношенных — на 7-й день жизни.

oМатериал: Капиллярная кровь из пятки, наносимая на тест-бланк (фильтровальную бумагу, фку – вероятно, опечатка, имеется в виду фильтровальная бумага).

o Методы анализа: В современных условиях используется

преимущественно тандемная масс-спектрометрия (высокоточный метод, позволяющий ровать десятки заболеваний). Классические методы

включают флюоресцентный анализ и тест Гатри (микробиологический тест, основанный на росте бактерий на средах с ингибитором, который преодолевается при избытке определенного метаболита, например, фенилаланина).

•Заболевания, включенные в неонатальный скрининг в России (расширенная программа, 5 заболеваний):

1.Фенилкетонурия (ФКУ): Нарушение обмена фенилаланина (ФА).

Пороговый уровень ФА: > 2 мг% (122 мкмоль/л). Норма: 0.8 - 2

мг% (4.8 - 122 мкмоль/л).

2.Врожденный гипотиреоз.

3.Адреногенитальный синдром.

4.Галактоземия.

5.Муковисцидоз.