Исследование клеток, тканей, органов и выделений

Необходимо решение двух основных вопросов:

• установление природы пятна (сперма, моча, пот и др.); • возможность происхождения пятна от конкретного человека.

Наличие спермы в пятне доказывается микроскопическим методом после того, как при большом увеличении микроскопа удается обнаружить целые сперматозоиды, представленные всеми основными структурными элементами (головкой, шейкой и хвостом). При обнаружении целого сперматозоида параллельно решается вопрос о его видовой специфичности, т.к. по морфологическим признакам сперматозоиды человека и животного отличаются.

При азоспермии, олигоспермии, некроспермии или разрушении сперматозоидов (например, если использовались средства контрацепции, содержащие сперматоцидные вещества), а также в случае малого количества спермы сперматозоиды не обнаруживаются. В таких случаях наиболее достоверным методом является реакция иммунофлюоресценции в количественной модификации, позволяющая установить наличие антигенов спермы на вещественных доказательствах.

Доказав семенное происхождение пятна, переходят к определению групповой принадлежности спермы. При установлении возможности ее происхождения на вещественных доказательствах от определенного лица в судебно-медицинскую лабораторию направляют образцы жидкой крови.

Исследование пятен слюны, мочи, пота

Пятна слюны обнаруживаются на окурках, посуде, пищевых остатках. Наличие слюны устанавливается цветной реакцией на амилазу с использованием крахмала и йода (раствор Люголя). Наличие пота доказывается цветной реакцией на присутствие аминокислоты серина. Моча обнаруживается химической реакцией с получением берлинской лазури либо хроматографическим методом.

Группоспецифические свойства выделений и крови у большинства людей совпадают. Их устанавливают в основном теми же методами, что и кровь. Но у 24% лиц, называемых невыделителями, антигенные детерминанты системы АВ0, обнаруживаясь в крови, практически отсутствуют в слюне, сперме и других выделениях. Это связано с тем, что антигенные детерминанты системы АВ0 являются олигосахаридами и могут экскретироваться в мочу в свободном виде, входить в состав гликолипидов мембран или секретироваться различными железами в составе гликопротеинов. У невыделителей синтезируются только гликолипиды с этими антигенами, но не образуются гликопротеиды. Секреторный статус обусловлен генетически. Его установление должно предшествовать определению групповой принадлежности следов выделений на вещественных доказательствах. Так, от слабого выделителя антигена В не может образоваться пятно спермы с четко выраженным антигеном В. О степени «выделительства» судят по результатам сравнительного исследования слюны или желчи и крови. Кроме того, категорию «выделительства» можно определить, установив групповую принадлежность крови по системе Льюис. Все взрослые с группой крови Le (a+) являются несекреторами, а с Le (b+) — секреторами.

В ряде случаев, в особенности при половых преступлениях, на вещественных доказательствах (предметах одежды) могут быть найдены смешанные пятна крови и выделений (спермы, влагалищного содержимого). Для дифференцирования антигенов различного происхождения применяют:

• метод, основанный на использовании сывороток с высоким титром, которые вы-являют свойства антигенов выделений и не выявляют свойств антигенов крови;

• метод прогревания объектов, приводящий к денатурации белков крови с утратой их способности к переходу в раствор и сохранении этой способности у антигенов выделений;

• метод аффинной хроматографии, который позволяет разделять белки крови и выделений и изучать их свойства отдельно.

Дифференцирование антигенов в смешанных пятнах спермы и влагалищных выделений также возможно. Для этого используют методы разделения белков этих выделений реакцией электрофореза в полиакриламидном геле или реакцией иммунофлюоресценции.