Методы косвенной индикации возможного присутствия возбудителя во внешней среде
•- Общее микробное число (ОМЧ)
определяют путем подсчета всех микроорганизмов в 1 грамме или 1 мл субстрата.
•При этом исходят из предположения, что чем больше объект загрязнен органическими веществами, тем выше ОМЧ и тем вероятнее присутствие патогенов
ОМЧ определяют двумя методами:
1. Прямой подсчет.
Проводят под микроскопом с помощью специальных камер, например, Петрова или Горяева, либо специальных электронных счетчиков. Предварительно исследуемую пробу гомогенизируют и вносят краситель (обычно эритрозин). Можно проводить прямой подсчет и на мембранных фильтрах, через которые пропускают исследуемую жидкость или взвесь. Метод применяют в экстренных случаях.
Метод мембранной фильтрации
ОМЧ определяют двумя методами:
2. Количественный посев на питательные среды.
Из приготовленных серийных десятикратных разведений исследуемой жидкости по 1 мл переносят в стерильные чашки Петри и заливают расплавленным и остуженным до 45-500С МПА. После инкубации подсчитывают число выросших колоний. При этом выявляются лишь мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные бактерии, способные размножаться на МПА.
Санитарно-показательными называют микроорганизмы,
•по которым можно косвенно судить о возможном присутствии патогенов во внешней среде
Основные характеристики СПМ
1.Микроорганизм должен постоянно обитать в естественных полостях человека и животных и постоянно выделяться во внешнюю среду.
2.Микроб не должен размножаться во внешней среде (исключая пищевые продукты), или размножаться незначительно.
3.Длительность выживания микроба во внешней среде должна быть не меньше, а даже больше, чем у патогенных микроорганизмов.
4.Устойчивость СПМ во внешней среде должна быть аналогичной или превышать таковую у патогенных микроорганизмов.
5.У микроба не должно быть во внешней среде «двойников» или аналогов, с которыми их можно перепутать.
6.Микроб не должен изменяться во внешней среде.
7.Методы идентификации и дифференциации микроорганизмов должны быть простыми.
СПМ условно разделяют на 3 группы
Группа А
включает обитателей кишечника человека и животных; микроорганизмы расценивают как
индикаторы фекального загрязнения. В нее входят так называемые бактерии группы кишечных палочек – БГКП – ОКБ, эшерихии, энтерококки; а также сульфит- восстанавливающие клостридии (включая
Cl.perfringens), и др.
Группа В
включает обитателей верхних дыхательных путей и носоглотки; микроорганизмы расценивают как
индикаторы
аэрогенного загрязнения.
В нее входят альфа- и бета-гемолитические стрептококки, стафилококки.
Группа С
•включает сапрофитные микроорганизмы, обитающие во внешней среде; микроорганизмы расценивают как индикаторы процессов самоочищения. В нее входят бактерии- аммонификаторы, бактерии- нитрификаторы, некоторые спорообразующие бактерии, грибы, актиномицеты и др.
Содержание СПМ выражают в титрах и индексах
Титр СПМ – наименьший объем исследуемого материала (в мл) или весовое количество (в гр), в котором обнаружена хотя бы одна особь СПМ.
Индекс СПМ – количество особей СПМ, обнаруженных в определенном объеме (количестве) исследуемого объекта. Для воды, молока и других жидких продуктов – в 1 л; для почвы, пищевых продуктов – в 1 г. Индекс – величина, обратная титру, поэтому перерасчет титра в индекс и обратно можно производить по формуле: Т=1000/И; И=1000/Т – для жидкостей. Соответственно для почвы и пищевых продуктов Т=1/И, И=1/Т.
Как дополнительный показатель в настоящее время также используют
индекс наиболее вероятного числа (НВЧ), имеющий доверительные границы, в пределах которых может колебаться истинное количество искомого микроба с 95% вероятностью. Для определения НВЧ исследования проводят 3, 5, и 10 раз. Показатель определяют по специальным таблицам Хоскенса-Муре.
Основные группы СПМ Бактерии группы кишечных палочек
Под общим названием «бактерии группы
кишечных палочек» – БГКП, колиформные бактерии
– обобщенные колиформные бактерии - ОКБ
объединяются бактерии порядка
Enterobacterales, родов Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella.