Микробиология. Лекции / 11.Клиническая микробиология, ИСМП
.pdf
Если для посева используют готовые среды, можно работать одному!
Правила взятия крови
При наличии у больного постоянного венозного катетера или капельницы в вене можно воспользоваться ими для получения крови.
Некоторому количеству крови дают свободно стечь в пробирку (эту кровь можно использовать для биохимических анализов),
затем набирают кровь в шприц и тут же засевают на жидкие питательные среды.
Бактериологическое исследование крови – самое длительное в бактериологии
1. Посевы крови в жидкой среде инкубируют:
до 10 суток (МР от 19.12.1991 г.); до 7 суток (ВОЗ-WHO).
2.При появлении признаков роста производят пересев на чашки с плотными средами.
3.Выделяют и идентифицируют чистые культуры. ИТОГО: ≥ 10 дней!
Для взятия отделяемого инфицированных открытых ран созданы транспортные среды
Лечащий врач с соблюдением правил асептики должен:
1.Предварительно стерильным ватным тампоном со спиртом или другим антисептиком обработать кожу вокруг раны, удалить некротические массы и гной стерильной салфеткой.
2.Произвести взятие материала стерильным тампоном путем круговых вращательных движений от центра к периферии поверхности раны.
3.Поместить тампон в транспортную среду (↑).
Правила взятия отделяемого открытых инфицированных ран (2)
При наличии в ране дренажей отсасывают шприцем отделяемое и помещают 1-2 мл в стерильную пробирку.
Кусочки тканей, гной, промывную жидкость из дренажа также берут в стерильные пробирки (или контейнеры) при соблюдении всех правил асептики.
Не более чем через 1 час после взятия весь материал доставляют в микробиологическую лабораторию для немедленного посева.
При невозможности доставить материал в течение этого времени, он должен храниться в холодильнике, но ≤ 2 часов.
NB! Пробирки с транспортными средами сохраняют жизнеспособность флоры до 3-x дней при комнатной to !
Общие моменты бактериологического исследования раневого материала
Не забываем, что клинический материал принято засевать также на жидкие среды
.....?! |
на случай ..... .....?!) |
обогащения |
|
Посев по Голду на:
1.кровяной агар,
2.ЖСА,
3.среда Эндо.
При (+) результате: оценивают количество колоний, микроскопируют и отсевают на скошенный агар для изоляции чистых культур, их идентификации и изучения антибиотикограммы.
Посев по Голду – штрихами на сектора чашек позволяет количественно оценить микрофлору:
•На чашки с питательными средами наносят материал и делают 30-40 штрихов петлей в секторе А.
•Прожигают петлю и выводят 4 штриха из сектора А в сектор I.
•Вновь прожигают петлю и проводят 4 штриха из сектора I в сектор II.
•То же – в сектор III.
Для расчета концентрации микробов после посева по Голду есть таблицы:
Критерий значимости микроба для воспалительного процесса – присутствие в концентрации ≥ 105 КОЕ / мл
По таблице в зависимости от количества выросших на секторах колоний находят концентрацию микроорганизмов в засеянном материале.
Основные возбудители:
-S.aureus и КНС;
-В стоматологии + α- и β- гемолитич.стрептококки
-Энтеробактерии (E.coli,
Klebsiella, Proteus и др.); реже
-Pseudomonas aeruginosa;
-Acinetobacter lwoffii;
Для сбора и транспортировки иных видов клинического материала существуют стерильные пластиковые контейнеры:
В такие контейнеры удобно отбирать:
•материал из ротовой полости;
•мокроту;
•мочу;
•пробы иссеченных тканей;
•испражнения (есть контейнеры со встроенной лопаточкой для удобного отбора проб...).
Главное – соблюдение правила отбора проб необходимого клинического материала!
Правила взятия отделяемого дыхательных путей
Глотка, ротовая полость и нос.
Материал из ротовой полости берут натощак или через 2 часа
после еды стерильным ватным тампоном или ложечкой со слизистой оболочки или ее пораженных участков у выходов протоков слюнных желез, с поверхности языка, из язвочек. При наличии пленки последнюю снимают стерильным пинцетом.
Материал из носовой полости забирают сухим стерильным ватным тампоном, который вводят вглубь полости носа.
Материал из носоглотки берут стерильным заднеглоточным ватным тампоном. Тампон осторожно вводят через носовое отверстие в носоглотку. Если при этом начинается кашель, тампон не удаляют до его окончания.
Для проведения анализов на дифтерию исследуют одновременно пленки и слизь из носа и глотки. Материал из носа и глотки берут разными тампонами.
Общие моменты по бактериологическому исследованию отделяемого дыхательных путей
Производится посев на плотные питательные среды:
1. кровяной агар,
2. ЖСА,
3. среда Эндо
4. + агар Сабуро для выделения грибков. Кроме того, делают посев на жидкую среду обогащения – сахарный бульон
При росте колоний оценивают их количество, вычисляют концентрацию. Выделяют чистые культуры и идентифицируют их.
Определяют чувствительность к антибиотикам.