Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
1. Глобальная стратегия Ликвидировать туберкулез цели, задачи, основные компоненты.docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
12.01.2026
Размер:
6.55 Mб
Скачать

12. Лабораторная диагностика туберкулеза. Культивирование на плотных и жидких питательных средах: показания, методы, преимущества, недостатки, ограничения.

Показания: (назначать может только фтизиатр)

- для подтверждения диагноза туберкулеза

-для выделения скудного бактериовыделения

-для подтверждения наличия микобактерий в мокроте

Методы

  • метод пропорций на жидкой питательной среде – (ВАСТЕС)

  • метод абсолютных концентраций на плотной питательной среде (Финна- 2)

Сегодня практически утратил свою значимость для диагностики туберкулеза посев диагностического материала на плотные питательные среды, когда для получения результата необходимо от 21 до 90 дней. Используются только для контроля эффективности химиотерапии.

Автоматизированная система ВАСТЕС:

Обработка для разжижения и деконтаминации (предотвращение роста других бактерий) => пробирка с питательной средой и встроенным флюоресцентным индикатором, который инактивирован высокими концентрациями О2 => МБТ поглощают О2 => активируют ФИ => светится при УФ – излучении.

Преимущества:

  • высокая чувствительность, позволяющая выявлять даже небольшое количество бактерий: от 10 МБТ в одном мл материала.

  • сокращение времени получения культуры

  • позволяет одновременно исследовать лекарственную устойчивость к ПТП.

Общие недостатки:

    • трудоемкими

    • высокозатратны

    • требует специализированного обучения персонала.

    • Требуется дорогостоящего оборудования

    • Медленный рост МБТ требует значительного времени ожидания результатов исследования.

    • автоматизированные системы с жидкими питательными средами позволяют получить результат в течение 14 – 42 дней (но всё равно быстрее, чем на плотных).

13. Лабораторная диагностика туберкулеза. Молекулярно-генетические методы (GeneXpert, tb-Lamp, проба на стрипах, «Амплитуб»): показания, методы, преимущества, недостатки, ограничения.

Используются:

  • Видовая идентификация МБТ

  • Определения лекарственной чувствительности

Показания:

- установление диагноза туберкулеза

- назначает только врач фтизиатр

- видовая дифференцировка микобактерий

ОБЩИЕ ПРЕИМУЩЕСТВА:

  • высокая чувствительность: для выделения ДНК возбудителя туберкулеза достаточно нескольких (5-10) микобактерий в одном миллилитре мокроты

  • высокая специфичность.

  • быстрые (2-3 часа) и достоверные.

  • Определяем незначительное кол-во микобактерий даже у людей с отрицательным тестом мокроты на КУМ

  • Быстрота

НЕДОСТАТКИ

-ДОРОГОЕ ОБОРУДОВАНИЕ

-НЕДОСТУПНОСТЬ ДЛЯ ЛЮБОВОГО УЧРЕЖДЕНИЯ ПЕРВИЧНОГО ЗВЕНА здравоохранения

Тест - система «GeneXpert» - автоматизирования система ПЦР - диагностики туберкулеза.

  • Позволяет обнаружить ДНК микобактерии туберкулеза и определить наличие гена устойчивости к рифампицину в течении 2-х часов.

  • Необх. конц МБТ 5 – 10 мбт/мл.

  • Метод дорогостоящий, но на сегодняшний день самый быстрый по срокам определения лекарственной устойчивости МБТ.

  • Высокая точность

ДНК-стрипы

  • ЛУ к рифампицину, изониазиду, фторхинолонам.

  • возможность идентифицировать вид МБт,

  • Результат 5 дней.

  • Метод основан на множественной обратной гибридизации на ДНК-стрипах

  • Результат гибридизации визуализируется на нейлоновой мембране – стрипе в виде набора полос, которые вручную или с помощью прибора сравнивают с шаблоном и определяют наличие мутаций, ассоциированных с ЛУ

Петлевая изотермическая амплификация (LAMP) - удвоение участка ДНК с высокой специфичностью, эффективностью и скоростью в условиях постоянной температуры. Позволяет проводить типизацию МБТ, МЛУ/нет.

Плюсы: быстро, дёшево и с минимумом технических средств, амплификация (умножение) ДНК при использовании этой технологии происходит в одной пробирке.

Минусы– не обнаруживает ЛУ.

Амплитуб

-определения антибиотикоустойчивости к препаратам I и II ряда, идентификации и генотипирования микобактерий. Технология «Амплитуб» состоит из 3-х основных этапов: пробоподготовки, выделения ДНК и полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени.