Микробиология. Лекции / Zanyatie_21_Obschaya_Virusologia_Plyus_LechFak_2022
.pdf
У всех клеточных форм жизни на Земле реализация генетической информации идет следующим образом: ДНК → транскрипция → иРНК → трансляция → белок
У вирусов механизм реализации может быть иным – это зависит от типа нуклеиновой кислоты в его геноме
• ДНК-содержащие вирусы – аналогичная схема:
ДНК → транскрипция → иРНК → трансляция → белок
•Плюс-РНК-содержащие вирусы:
плюс-РНК → трансляция → белок
•Минус-РНК-содержащие вирусы:
Самый сложный механизм – у вируса гепатита В
минус-РНК → транскрипция *→ иРНК → трансляция → белок
• РНК-содержащие ретровирусы:
РНК → обратная транскрипция *→ ДНК → транскрипция → иРНК → трансляция → белок
** - здесь участвуют уникальные (таких нет в организме человека) → и не очень «точные» ферменты (ошибки ведут к изменчивости вируса)
В образовании суперкапсида участвует мембрана пораженной клетки: с ее помощью происходит «одевание» вирусов при их отпочковывании →
для этого на мембране
накапливаются
поверхностные
антигены
вируса
(а в суперкапсиде остаются фосфолипиды
из ЦПМ клетки хозяина)
Есть варианты развития вирусной инфекции:
взаимодействие вируса с клеткой может строиться как
Продуктивная инфекция (литический путь):
-Подавление клеточного метаболизма →
-Репликация вируса + накопление токсических компонентов вируса →
-Итог – повреждение лизосом, высвобождение их ферментов → выход вирусов и гибель клетки.
Клинически это – острая инфекция
Персистирующая инфекция (стабильное взаимодействие):
Вирус длительно сохраняется в организме хозяина, что ведет к:
●хронической инфекции (литический процесс продолжается, вирус присутствует и выделяется...);
●латентной инфекции (вирусный геном сохраняется в клетках хозяина без репликации вируса);
●злокачественному росту клетки
(вирусы м.б. канцерогенами!).
М.б. абортивная инфекция –
когда процесс обрывается...
Способы культивирования вирусов:
Вирусы размножаются только в живых клетках:
-лабораторных животных;
-куриных эмбрионов;
-клеточных культур (клетках, полученных путем измельчения органов или тканей человека или животных), которые способны существовать или размножаться in vitro в особых средах (имеющих оптимальный солевой состав, содержащих питательные вещества, витамины, аминокислоты, нуклеотиды и т.д.).
Культивирование вируса в организме животных
Заражение животного материалом, содержащим вирус
Появление клиники заболевания и/или смерть животного (→ вирус есть!)
Материал от животного смешивают с противовирусными антителами и заражают следующее животное
если антитела обезвредили вирус, животное останется в живых
если антитела не связали вирус, животное заболеет и/или погибнет → надо использовать антитела к другим вирусам
Эта реакция (вирус + антитела) = реакция нейтрализации
Культивирование вирусов в полостях куриного эмбриона:
- в амниотической полости;
-в желточном мешке;
-в аллантоисной полости. + Эмбрион стерилен, неподвижен → безопасен.
+ Процесс заражения вирусом весьма технологичен.
-Не все вирусы способны
внем репродуцироваться.
-Примеси куриного желтка и белка в вакцинах → риск аллергических реакций!
А как узнать, что вирус в эмбрионе реально накопился?! И еще: как его «опознать»?
Реакция гемагглютинации (РГА): при добавлении к вирусу взвеси эритроцитов (к вирусу гриппа – куриных, к вирусу клещ. энцефалита – гусиных) происходит их склеивание (агглютинация)
обнаружение вируса↑
Если в вируссодержащую жидкость сначала добавить а/тела против вируса, они заблокируют склеивание эритроцитов. Это – реакция
идентификация вируса ↑ торможения гемагглютинации (РТГА)
Клеточные культуры – это в настоящее время отдельная, особая часть вирусологии:
Одна из самых ранних культур клеток человека – HeLa - получена от Генриетты Лакс, умершей от рака шейки матки.
Опухолевые клетки часто применяют в вирусологии, т.к. они менее «капризны». Из «нормальных» клеток чаще используют клетки эпителия, фибробласты или клетки крови – Почему?!
Плюсы и Минусы у этого способа культивирования вирусов те же, что у эмбрионов.
NB! При производстве вакцин клетки опухолей, естественно, не применяют!
Культивирование вирусов в клеточных культурах:
Клетки помещают в плоские сосуды, заливают питательной средой и заражают вирусом.
Клетки сорбируются на дне, образуя монослой.
При нормальных условиях существование клеток ведет к закислению питательной среды, что покажет изменение цвета индикатора в среде 
Если клетки поражены вирусом, то как изменится их метаболизм?
И каким будет цвет индикатора?!
Культивирование вирусов в клеточных культурах:
Вирусная инфекция:
– разрушает монослой клеток;
– меняется их форма;
– часть клеток гибнет или сливается друг с другом;
– образуются необычные включения в цитоплазме или ядрах клеток.
Все это – цитопатогенное действие вируса (ЦПД).
Метаболизм зараженной вирусом культуры клеток будет снижен → цвет индикатора не изменится. Феномен называется цветная проба.