Микробиология. Лекции / Zanyatie_16_Kholerny_Vibrion_2022
.pdf
Отбор проб для лабораторной диагностики холеры (из МУК 4.2.3745-22)
Принцип
тройной
упаковки
Емкости с образцами биологического материала этикетируют, обрабатывают снаружи дезраствором, герметизируют парафинированной пленкой (парафилмом), помещают во вторичный контейнер с адсорбирующим влагу материалом и помещают в кейс для транспортирования проб с документами (список проб)
Материал от больного (подозрительного на заболевание) забирает медицинский персонал медицинских организаций (МО).
Материал забирают немедленно после выявления больного и до начала лечения антибиотиками в стерильную посуду, не содержащую следов дезрастворов.
Пробы перевозят на служебном транспорте с сопровождающим. Материал для исследования должен быть доставлен не позже, чем через 2 часа после его взятия.
Ответственность за правильность отбора, хранения, транспортирования и своевременность доставки проб в микробиологическую лабораторию несет руководитель МО, где был выявлен больной и забран материал для исследования.
Особенности диагностики холеры (из МУК 4.2.3745-22 Лабораторная диагностика холеры) С учетом легкости распро-
странения, быстроты развития и тяжести клиники, основываясь на быстроте роста возбудителя, диагностику холеры рекомендуется вести круглосуточно (!) с выдачей предварительных ответов на этапах бактериологического иссл-я
МФА – метод флуоресцирующих антител ПЦР – полимеразная цепная реакция ИХА – иммунохемилюминесцентный анализ ИФА – иммуноферментный анализ
Принципы диагностики холеры (cхема по МУК 4.2.3745-22)
Принципы диагностики холеры (пояснения)
Поскольку холера – это ООИ, а ее возбудитель обладает высокой скоростью роста, бактериологическая диагностика проводится круглосуточно и делится не на дни (классические 1-й день работы, 2-й день и т.д.), а на этапы:
1 этап: посев материала, содержащего возбудитель (испражнения, рвотные массы, желчь и т.д.), на жидкие и плотные среды: 1% пептонную воду (на схеме – “I”) и чашки с агарами (щелочной агар и среды СЭДХ или ТСВS). Постановка ускоренных тестов (МФА, РИВ, ПЦР) (1-й предварительный ответ)
2 этап: через 6-8 часов оценивают рост на 1-й жидкой среде накопления, проводят ускоренные тесты (МФА, РИВ, ПЦР) (2-й предварительный ответ) и делают пересев на 2-ю среду накопления (на схеме – “II”) и чашки с агарами(щелочной агар + СЭДХ/ТСВS).
3 этап: через 12-16 часов: А. Изучают рост на 2-й жидкой среде накопления, проводят ускоренные тесты (МФА, РИВ, ПЦР) (3-й предварительный ответ) и производят высев на щелочной агар.
Б. Изучение и отбор колоний со щелочного агара, засеянного в начале исследования (на 1-м этапе): постановка ОРА (реации агглютинации на стекле) с сывороткой холерной 01. При (+) реакции ставят реакцию с сыворотками Инаба и Огава. При (-) результатах изучают антигенные свойства с холерной сывороткой 0139. Это – тоже 3-й предварительный ответ.
Особенности диагностики холеры (заключение)
По завершении бактериологического исследования о выделенной культуре необходимо знать:
Видовую принадлежность - V. cholerae Серогруппу: О1 или О139 У с/гр.О1 - Биовар: классический или Эль-Тор
Серовар: Инаба, Огава или Гикошима
Токсигенность = эпидемическую значимость (нетоксигенные штаммы вызывают спорадические случаи)
Для этого изучают: Антигенные свойства Биохимическую активность Фагочувствительность Гемолитическую активность
Молекулярно-генетические характеристики
Лечение холеры
1 – Срочная госпитализация больного в инфекционное отделение (изоляция!).
2 – Восполнение потерянной жидкости и электролитов: Na, K, Ca, Cl, HCO3-. Пути введения: per os и внутривенно (при легкой форме холеры этого достаточно для выздоровления без применения а/б)
3 – Антибиотики рекомендуются ВОЗ только в случаях с тяжелым обезвоживанием. Лечение антибиотиками позволяет сократить течение болезни на 1—3 дня и снизить выраженность симптомов.
Против V.cholerae эффективны: азитромицин, тетрациклин, доксициклин, эритромицин, ципрофлоксацин.
NB! У отдельных штаммов V.cholerae формируется устойчивость к антибиотикам.
Профилактика холеры: неспецифическая и специфическая
|
Решающее значение имеет |
Используется оральная |
|
многосторонний подход, в том числе: |
отечественная вакцина: |
||
- |
Эпиднадзор: выявление больных |
Вакцина холерная бивалентная |
|
|
с диареей, выявление V.cholerae, |
||
|
химическая таблетированная - |
||
|
уведомление о случаях холеры; |
||
|
смесь анатоксина (холерогена) и |
||
- |
Мероприятия по улучшению |
||
О-антигенов культур Инаба и |
|||
|
водоснабжения: качественная |
||
|
питьевая вода, обеззараживание |
Огава. |
|
|
канализационных стоков; |
Прививки с 2-летнего возраста |
|
- |
Санитария и гигиена: санитарное |
||
(от 1 до 3 таблеток до еды, не |
|||
|
просвещение населения, выпол- |
||
|
разжевывая) обеспечивают: |
||
|
нению надлежащих правил |
||
|
|
||
|
личной и общественной гигиены; |
– антибактериальный, |
|
- |
Мобилизация общественности: |
– антитоксический, |
|
|
информированность → быстрое |
–местный кишечный иммунитет |
|
|
обращение за медицинской |
||
|
помощью → успех в борьбе! |
на срок до 6 месяцев. |
|
Перспективы противостояния человечества/медицины и холеры
Холера не может быть искоренена, т.к. холерные вибрионы (ХВ) являются аутохтонной микрофлорой водных экосистем на эндемичных территориях и проявляют высокую степень генетической вариабельности, которая поддерживает резистентность ХВ к нагрузке окружающей среды и последующую персистенцию.
Способность ХВ образовывать биопленки на биотических и абиотических поверхностях даже в присутствии конкурентной микрофлоры может служить основой для сохранения и переноса возбудителя в новые регионы с вероятностью формирования новых очагов холеры. В связи с повышением температуры из-за глобального изменения климата и появления генетически измененных штаммов ХВ область их распространения может расшириться за пределы эндемичных очагов, что способствует повышению риска заражения людей. Поэтому необходимо слежение за циркуляцией ХВ в объектах окружающей среды.