1_blok_voprosov_FKh_s_oglavleniem

1.Фармацевтический и фармакопейный анализ. Выбор методов для фармакопейного анализа и их характеристика: правильность, воспроизводимость,

пределы обнаружения веществ.

Фармацевтический анализ – это наука о химической характеристике и измерении биологически активных веществ на всех этапах производства: от контроля сырья до оценки качества полученного лекарственного вещества, изучения его стабильности, установления сроков годности и стандартизации готовой лекарственной формы. Особенностями фармацевтического анализа является его многогранность и многообразие веществ или их смесей, в том числе индивидуальные химические вещества, сложные смеси биологических веществ (белков, углеводом, олигопептидов и т.д.). Способы анализа нуждаются в постоянном совершенствовании и,если в УП фармакопее превалировали химические методы, в том числе качественные реакции, то на современном этапе используются преимущественно физико-химические и физические методы анализа.

Фармацевтический анализ в зависимости от поставленных задач включает:

Основным и наиболее существенным является фармакопейный анализ, т.е. анализ лекарственных средств на соответствие стандарту – фармакопейной статье или иному НД и, таким образом, подтверждение его пригодности. Отсюда и требования к высокой специфичности, селективности, точности и достоверности анализа.

Заключение о качестве лекарственного средства можно сделать только на основании анализа пробы (статистически достоверной выборки). Порядок отбора пробы указан либо в частной статье, либо в общей статье ГФ Х1 изд. (вып.2) с.15. Для проведения испытания лекарственных средств на соответствие требованиям нормативно-технической документации проводят многоступенчатый отбор проб (выборок). При многоступенчатом отборе пробу (выборку) образуют по ступеням и продукцию в каждой ступени отбирают случайным образом в пропорциональных количествах из единиц, отобранных в предыдущей ступени. Число ступеней определяется видом упаковки.

1 ступень: отбор единиц упаковочной тары (ящиков, коробок и т.д.); 2 ступень: отбор упаковочных единиц, находящихся в упаковочной таре (коробок, флаконов, банок и т.д.);

3 ступень: отбор продукции в первичной упаковке (ампул, флаконов, контурных упаковок и т.д.).

Для расчета отбора количества продукции на каждой ступени используют формулу:

0,4√n

где n – количество упаковочных единиц данной ступени.

Конкретный порядок формирования выборки подробно описан в ГФ Х1 издания, вып.2. При этом анализ считается достоверным при воспроизводимости как минимум четырех проб.

Критерии фармацевтического анализа

Для различных целей анализа имеют значения такие критерии как избирательность

анализа, чувствительность, точность, время выполнения анализа, количество испытуемого вещества.

Избирательность анализа имеет существенное значение при анализе сложных препаратов, состоящих из нескольких действующих компонентов. В этом случае очень важна избирательность анализа для количественного определения каждого из веществ.

Требования к точности и чувствительности зависят от объекта и цели исследования. При испытании чистоты или примесей используют высокочувствительные методы. Для постадийного контроля производства важен фактор времени, затрачиваемый на анализ.

Важным параметром метода анализа является предел чувствительности метода. Этот предел означает наименьшее содержание, при котором можно достоверно обнаружить данное вещество. Наименее чувствительными являются химические методы анализа и качественные реакции. Самые чувствительные ферментные и биологические методы, позволяющие обнаруживать единичные макромолекулы веществ. Из реально применяемых самыми чувствительными являются радиохимический, каталитический и флуоресцентный методы, позволяющие определять до 10-9%; чувствительность спектрофотометрических методов 10-3-10-6%; потенциометрических 10-2%.

Термин «точность анализа» включает одновременно два понятия: воспроизводимость и правильность полученных результатов.

Воспроизводимость –характеризует рассеяние результатов анализа по сравнению со средним значением.

Правильность – отражает разность между действительным и найденным содержанием вещества. Точность анализа зависит от качества приборов, опытности аналитика и т.д. Точность анализа не может быть выше, чем точность наименее точного измерения. Это означает, что если при титровании точность составляет ±0,2 мл плюс ошибка от натекания тоже ±0,2 мл, т.е. суммарно ±0,4 мл то при расходовании 20 мл титранта ошибка составляет 0,2%. При уменьшении навески и количества титранта точность уменьшается. Таким образом титриметрический анализ позволяет выполнять определение с относительной погрешностью ± (0,2-0,3)%. Каждый из методов имеет свою точность. При анализе важно иметь представление о следующих понятиях:

Грубые ошибки- являются просчетом наблюдателя или нарушения методики анализа. Такие результаты отбрасываются как недостоверные.

Систематические ошибки – отражают правильность результатов анализа. Они искажают результаты измерений, как правило, в одну сторону на некоторое постоянное значение. Систематические ошибки можно частично устранить введением поправок, калибровкой прибора и т.д.

Случайные ошибки – отражают воспроизводимость результатов анализа. Они вызываются неконтролируемыми переменными. Среднее арифметические случайных ошибок стремится к нулю. Поэтому для расчетов необходимо использовать не результаты единичных измерений, а среднее из нескольких параллельных определений.

Абсолютная ошибка –представляет собой разность между полученным результатом и истинным значением. Эта ошибка выражается в тех же единицах, что и определяемая величина.

Относительная ошибка определения равна отношению абсолютной ошибки к истинному значению определяемой величины. Выражают ее обычно в процентах или долях.

Значения относительных ошибок находятся в зависимости от того каким методом выполняют анализ и что из себя представляет анализируемое вещество – индивидуальное вещество и смесь многих компонентов.

Относительная ошибка при исследованиях индивидуальных веществ спектрофотометрическим методом составляет 2-3 %, ИК-спектрофотометрией – 5-12%; жидкостной хроматографией 3-4%; потенциометрией 0,3-1%. Сочетанные методы как правило снижают точность анализа. Наименее точными являются биологические методы – их относительная ошибка достигает 50%.

2.Природа и характер примесей. Влияние примесей на состав лекарственного средства и его фармакологическую активность. Методы обнаружение примесей: физические, химические, хроматографические, спектрофотометрические.

Примесь – это вещество, постороннее основному веществу, содержащееся в количестве менее 0,01%.

Источники примесей в лекарственных веществах:

1.Технологический процесс а) вспомогательные вещества, растворители (хлорид ионы, сульфат ионы, ионы кальция, ионы аммония) б) аппаратура (ионы железа, свинца, цинка, мышьяка) в) исходное сырьё, продукты синтеза и полусинтеза (специфические примеси)

2.При неправильном хранении и транспортировке могут появиться примеси.

3.«Перекрестное загрязнение»

КЛАССИФИКАЦИЯ ПРИМЕСЕЙ:

1. оказывающие влияние на фармакологический эффект – специфические, то есть имеющие собственное токсическое действие, или искажающие действие основного вещества:

•ионы-антагонисты по фармакологическому действию,

•исходные вещества и промежуточные продукты синтеза препаратов, параллельно экстрагируемые вещества -сопутствующие вещества, имеющие близкие свойства и структуру, но отличные по фармакологическому действию,

•вещества, образующиеся в результате длительного или неправильного хранения (продукты его разложения, если вещество лабильно) и т.д..

2. не влияющие на фармакологический эффект – указывающие на общую степень очистки, (хлорид ионы, сульфат ионы, ионы кальция, аммония, свинца, железа, цинка,

мышьяка);не имеющие специфического действия, но присутствие их в больших количествах снижает концентрацию и соответственно уменьшает активность препарата - общие примеси: хлориды, сульфаты, соединения кальция, цинка, железа, тяжёлых металлов, мышьяка, соли аммония.

II. ПО ИЗМЕНЕНИЮ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА И СПОСОБНОСТИ ВЫЗЫВАТЬ ТОКСИЧЕСКИЙ ЭФФЕКТ.

Допустимые примеси – это примеси не оказывающие влияния на терапевтическую активность лекарственного препарата и на организм. Для них в НД устанавливаются предельные концентрации, т.е. максимальное количество, которое может присутствовать в лекарственном веществе и в этом, количестве примесь не оказывает токсического действия.

Недопустимые оказывают влияние на терапевтическую активность и их не должно быть.

III. ПО ПРИРОДЕ 1. Органические примеси 2. Минеральные примеси 2.

3.Стабильность, срок хранения и срок годности. Проблемы, связанные со стабильностью лекарственных препаратов во время хранения; основные факторы, ведущие к инактивации лекарственных веществ; методы контроля стабильности, сроки годности, возможность прогнозирования сроков годности методом «ускоренного старения».

Срок годности - период времени, в течение которого лекарственное средство полностью отвечает всем требованиям нормативной документации, в соответствии с которой оно было произведено и хранилось.

Стабильность - способность лекарственного средства сохранять химические, физические, микробиологические, биофармацевтические и фармакологические свойства в определенных фаницах на протяжении срока годности.\

Проблемы, связанные со стабильностью лекарственных препаратов во время хранения,

возникают из-за воздействия физических, химических и биологических факторов, которые могут привести к инактивации веществ. Это снижает эффективность препаратов и повышает риск нежелательных побочных эффектов.

Физические факторы

•Температура. Повышенные температуры ускоряют химические реакции, что может вызвать быстрое разложение активных веществ. Низкие температуры запускают кристаллизацию и осаждение компонентов, повышают вязкость препаратов в жидких формах.

•Влажность. Влияет на физические и химические свойства лекарств, способствует гидролизу и ускорению распада веществ.

•Свет. Ультрафиолетовое и видимое излучение запускает фотохимические реакции, приводящие к деградации веществ.

Химические факторы

•Гидролиз. Происходит при хранении некоторых классов химических соединений, даже в кристаллическом виде, особенно при повышенной температуре и влажности.

•Окислительные процессы. Снижают стабильность препаратов, чувствительных к кислороду.

•Образование примесей. При неправильном хранении могут появляться примеси, которые изменяют направленность фармакологического действия.

Биологические факторы

•Микробиологическая контаминация. Загрязнение препаратов микроорганизмами, что снижает стабильность и может привести к потере стерильности.

•Деградация вспомогательных веществ. Стабилизаторы, консерванты и другие компоненты препарата также могут разлагаться в течение срока хранения.

Долгосрочные испытания стабильности лекарственных средств

Долгосрочные испытания должны проводиться в рекомендованной для данного лекарственного средства первичной и вторичной упаковке при постоянной верхней (наиболее высокой) температуре установленного режима хранения в течение всего заявленного срока годности.

В ряде случаев могуг требоваться дополнительные испытания при нижней температуре установленного режима хранения (например, для мягких лекарственных форм, для которых возможны изменения их физико-химического состояния при пониженных температурах).

Образцы лекарственных средств, находящиеся на изучении стабильности, подлежат проверке по показателям качества нормативной документации в следующие сроки:

-в течение первого года хранения - через каждые 3 мес;

-в течение второго и третьего года хранения - через каждые 6 мес;

-после третьего года хранения - через каждые 12 мес.

Испытания стабильности методом "ускоренного старения"

Метод "ускоренного старения" преимущественно используется для определения сроков годности фармацевтических субстанций, представляющих собой вещества с установленным химическим строением, и лекарственных препаратов, содержащих эти вещества в качестве действующих.

Не рекомендуется использовать этот метод определения для лекарственного растительного сырья, лекарственных растительных препаратов, гомеопатических лекарственных средств, термолабильных фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов, иммунобиологических лекарственных препаратов, препаратов крови и др.

Срок годности, установленный с помощью метода "ускоренного старения", не должен превышать 3 лет для антибиотиков, полученных микробиологическим или полусинтетическим путем, и их лекарственных форм - 2 лет. Метод не применим для увеличения ранее установленного срока годности лекарственного средства свыше 3 лет.

Метод "ускоренного старения" заключается в выдерживании испытуемого лекарственного средства при температурах и влажности, превышающих температуру и влажность его хранения в процессе обращения.

В данной ОФС приводятся рекомендации по изучению сроков годности лекарственных средств методом "ускоренного старения" с использованием измененного температурного режима. При повышенных температурах, как правило, ускоряются протекающие в лекарственных средствах физико-химические процессы, приводящие со временем к нежелательным изменениям качества. Таким образом, при повышенной температуре промежуток времени, в течение которого контролируемые показатели качества лекарственного средства сохраняются в допустимых пределах (экспериментальный срок годности), искусственно сокращается в сравнении со сроком годности при температуре хранения. Это позволяет значительно сократить время, необходимое для установления срока годности.

По результатам, полученным в процессе "ускоренного старения" лекарственного средства, можно решить также обратную задачу, т.е. установить температуру хранения, обеспечивающую какой-либо заданный срок годности.

Испытания стабильности методом экстраполяции

При достаточном обосновании допускается экстраполяция данных, полученных по результатам долгосрочного хранения.

Экстраполяцию проводят с помощью статистической обработки данных. Если полученные результаты свидетельствуют о незначительной деградации и малой вариации, статистический анализ может не проводиться.

Методом экстраполяции предлагаемый срок годности может быть увеличен не более чем в 2 раза, но не более чем на 12 мес, по сравнению с долгосрочными испытаниями.

Данные, полученные с использованием метода экстраполяции, должны быть подкреплены обязательствами предприятия (разработчика) по продолжению изучения стабильности в условиях долгосрочных испытаний в течение всего заявленного срока годности.

При использовании метода крайних вариантов во всех временных точках по полному протоколу тестируют только образцы с крайними (предельными) вариантами факторов (например, дозировки, размер упаковки (тары) и (или) номинальный объем). Такой протокол предполагает, что стабильность любых промежуточных вариантов соответствует стабильности исследуемых крайних вариантов.

Исследование крайних вариантов допускают в отношении нескольких дозировок с пропорциональным составом; в случае одного и того же вида упаковки, если при прочих равных условиях имеются различия в размере упаковки или номинальном объеме лекарственного препарата.

Испытания стабильности матричным методом

При использовании матричного метода в определенный момент времени исследуется лишь подгруппа из общего числа образцов всех комбинаций факторов, подлежащих изучению. В очередной момент времени проводят исследование другой подгруппы образцов всех комбинаций факторов. К различным факторам одного и того же лекарственного препарата относят, например, совокупность различных серий, различных дозировок, различных размеров одной и той же укупорочной системы упаковки и, в ряде случаев, различных укупорочных систем упаковки.

Применение матричного метода допускают в отношении нескольких дозировок, идентичных или близких по составам.

Исследование влияния упаковки на стабильность лекарственного средства

Изменения качества лекарственного препарата могут быть вызваны взаимодействием лекарственного средства и системы упаковки, включающей укупорочные средства. Если для жидких лекарственных препаратов (кроме тех, что находятся в запаянных ампулах) нельзя исключить отсутствие взаимодействия, то в испытания на стабильность включают образцы в перевернутом или горизонтальном положениях (т.е. образцы, которые контактируют с укупорочным средством, например, пробкой), наряду с вертикально установленными образцами, для определения влияния материала укупорочного средства (пробки) на качество лекарственного препарата. Результаты экспериментальных исследований должны фиксировать все сочетания различных систем упаковки (укупорки), анализируемых лекарственных средств.

Для лекарственных средств в многодозовой упаковке, кроме стандартных данных, необходимых для традиционной упаковки одноразового использования (например, флакона), заявитель должен провести испытания, подтверждающие способность упаковки выдержать условия повторного открывания/закрывания и при этом сохранить качество и эффективность лекарственного средства на протяжении всего срока применения.

К основным факторам, оказывающим влияние на лекарственный препарат после вскрытия упаковки, относятся микробное загрязнение и физико-химическая деградация.

В исследование стабильности лекарственных препаратов после вскрытия первичной упаковки следует включать не менее 2 серий; при этом, по крайней мере, одна серия должна быть с истекающим сроком годности.

Проверку показателей на соответствие требованиям нормативной документации осуществляют в первую временную точку, как минимум одну промежуточную, а также в последнюю временную точку предлагаемого срока годности вскрытого лекарственного препарата.

Анализ лекарственного препарата проводят по всем показателям нормативной документации, которые могут меняться в процессе хранения (за исключением показателей, изменения по которым в процессе хранения не могут происходить в сторону ухудшения качества), и обязательно должны включать контроль на микробиологическую чистоту или стерильность.

Исследования стабильности лекарственных препаратов после восстановления или разведения

Если предполагается возможность хранения восстановленного твердого лекарственного препарата или разведенного концентрированного лекарственного препарата в течение определенного периода времени, должны проводиться исследования стабильности приготовленного таким образом препарата.

Цель изучения стабильности восстановленных препаратов - определить срок, в течение которого после восстановления или разведения лекарственного препарата его качество продолжит соответствовать требованиям нормативной документации, и лекарственный препарат может применяться по назначению.

Изучению стабильности подлежат восстановленные лекарственные препараты, приготовленные с использованием всех возможных для растворения/разведения лекарственных препаратов

растворителей, указанных в инструкции по медицинскому применению.

Условия хранения восстановленного лекарственного препарата могут отличаться от условий хранения исходного лекарственного препарата.

Для подтверждения стабильности восстановленного лекарственного препарата допускается предоставлять данные, полученные для 2 серий, при этом, по крайней мере, одна серия должна быть с истекающим сроком годности.

Проверку показателей на соответствие требованиям нормативной документации рекомендуется осуществлять в первую и последнюю временные точки предлагаемого срока годности восстановленного лекарственного препарата.

Анализ лекарственного препарата проводят по всем показателям, которые могут меняться в процессе хранения, и обязательно должен включать контроль на стерильность или микробиологическую чистоту.

Стресс-исследования и фотостабильность

Помимо установления срока годности и выбора условий хранения изучение стабильности оригинальных лекарственных препаратов и фармацевтических субстанций проводится с целью установления наиболее вредного влияния внешних факторов (высокие или низкие температуры, влага, кислород и другие компоненты воздуха, свет и т.п.) в зависимости от времени и условий их воздействия.

Стресс-исследования допускается проводить на одной серии лекарственного средства. Неотъемлемой частью стресс-исследований является исследование фотостабильности.

Объем исследований лекарственного средства должен определяться на основании наличия или отсутствия изменений, возникших в результате влияния света.

Условия хранения лекарственных средств, указанные в нормативной документации, должны соблюдаться на всех этапах обращения лекарственного средства.

4. Стандартизация лекарственных средств, нормативная документация (НД): Государственная фармакопея, фармакопейные статьи (ФС), общие фармакопейные статьи (ОФС). Унификация методов анализа. Принцип общей фармакопейной статьи "Общие реакции на подлинность".

Стандартизация лекарственных средств и нормативная документация (НД)

Стандартизация лекарственных средств — это система требований к качеству, безопасности и эффективности лекарственных препаратов, обеспечивающая их соответствие установленным нормам. Основными документами, регулирующими качество лекарств, являются:

1. Государственная фармакопея (ГФ)

oОсновной нормативный документ, содержащий стандарты качества лекарственных средств, методы контроля и требования к их производству.

o В России действует ГФ РФ (XV издание).

oВключает общие фармакопейные статьи (ОФС) и фармакопейные статьи

(ФС).

2.Фармакопейные статьи (ФС)

oНормативные документы, устанавливающие требования к конкретным

лекарственным веществам или препаратам.

oСодержат:

▪Описание препарата (внешний вид, растворимость).

▪Методы анализа (идентификация, количественное определение).

▪Нормы примесей, условия хранения.

3.Общие фармакопейные статьи (ОФС)

oРегламентируют общие методы анализа, применяемые для многих препаратов (например, определение pH, хроматография, спектрофотометрия).

o Унифицируют подходы к контролю качества.

Унификация методов анализа

Унификация означает приведение методов контроля к единым стандартам, что обеспечивает:

•Сопоставимость результатов между лабораториями.

•Повторяемость и надежность анализа.

•Соответствие международным требованиям (например, ICH, Европейская фармакопея).

Примеры унифицированных методов:

•Титриметрия, спектрофотометрия, ВЭЖХ, ТСХ.

•Микробиологические тесты (стерильность, пирогены).

Принцип общей фармакопейной статьи "Общие реакции на подлинность"

ОФС "Общие реакции на подлинность" описывает стандартные химические реакции, используемые для подтверждения подлинности лекарственных веществ.

Основные принципы:

1.Специфичность – реакция должна четко указывать на наличие определенного иона или функциональной группы.

oНапример:

▪Реакция на ионы хлора (AgNO → белый осадок AgCl).