
- •Введение
- •1 Характеристика родаRhodococcus
- •1.1 Дополнительная описательная информация
- •2 Материалы и методы
- •2.1 Методы идентификации микроорганизмов
- •2.1.1 Определение физиологических признаков
- •2.1.2 Рост на плотной питательной среде на чашках Петри
- •2.1.3 Использование соединений углерода:
- •2.1.4 Использование кислот:
- •Индикатор- фенолрот (феноловый красный)
- •Заключение
- •Список использованных источников
2.1.2 Рост на плотной питательной среде на чашках Петри
Идентификацию микроорганизма проводили по следующими призанакам: форма, размер, оптические свойства, цвет, край, структура, консистенция колнии. Результаты исследования сведены в таблицу 1.
Таблица 1 - Рост на плотной питательной среде на чашках Петри. Возраст колоний-12 суток.
Признак\ Культура |
18-19 |
77-32(сух) |
Форма колонии |
круглая |
круглая |
Размер колонии |
4 мм |
3мм |
Поверхность колонии |
гладкая |
гладкая |
Профиль колонии |
каплевидный |
каплевидный |
Блеск |
есть |
есть |
Прозрачность |
Не прозрачна |
Не прозрачна |
Цвет колонии |
Розовато-кремовый |
Кремовый с розовым |
Край колонии |
гладкий |
гладкий |
Структура колонии |
однородная |
однородная |
Консистенция колонии |
Легко снимающаяся с агара, пленчатая |
Легко снимающаяся с агара, пленчатая |
|
|
|
Рисунок 1 – Рост на плотной питательной среде на чашках Петри. Возраст колоний-12 суток.
Таблица 2 – Морфологические и физиолого-биохимические признаки
Возраст клеток-3 суток.
Показатель |
Результат | ||
|
18-19 |
77-32 | |
Форма клетки |
Палочка |
Палочка | |
Цвет колонии |
белый |
белый | |
Форма колонии |
округлая |
округлая | |
Консистенция |
маслянистая, однородная |
маслянистая, однородная | |
Отношение к кислороду |
аэробные |
аэробные | |
Каталазная активность |
+ |
+ | |
Лизис |
- |
- | |
Кислотоустойчивость |
- |
- | |
Окраска по Граму |
грам(+) |
грам(+) | |
Разжижение желатины | |||
Амилолитическая активность (гидролиз крахмала) | |||
Протеолиз казеина |
Рисунок 2 – Аэробность микроорганизмов
2.1.3 Использование соединений углерода:
Основной фон среды состава(г\л):
(NH4)2SO4 -2,6; KH 2PO 4-2,4; K 2HPO4 x3H 2O-5,6;MgSO 4x7H2O-1,0; агар микробиологический-18; раствор микроэлементов-0,1 мл; вода дистиллированная .
Раствор микроэлементов(г) СuSO4x5H2O-0,64;FeSO4Х7H2O;-0,11;MnCl2Х4H2O-0,79;ZnSO4х7Н2О-0,15, вода дистиллированная-100. Раствор готовят отдельно и хранят при температуре 3-5о.
Углеводы и спирты готовят в виде 10 %-ных водных растворов и стерилизуют отдельно от основного фона среды автоклавированием при 0,5 атм или фильтрованием. Раздельная стерилизация рекомендуется в связи с тем, что сахара в присутствии фосфатов и других компонентов среды частично разрушаются и образуют соединения, токсичные для микроорганизмов. Стерильные растворы добавляют к основному фону в таком количестве, чтобы концентрация сахара (спирта) в среде.составляла 1 г на 100 мл. Стерильные растворы углеводов(спиртов) добавлябт в стерильную агаризованную расплавленную среду, тщательно перемешивают ее и разливают в стерильные чашки Петри. После того как агар застынет, дно чашки Петри с наружной стороны делят на секторы чернилами или карандашом по стеклу. Затем каждую из исследуемых культур микроорганизмов высевают петлей, проводя радиальный штрих (рис. 1)
Рисунок 3 - Схема посева на плотную среду различных микроорганизмов для определения способности использовать углеводы
Продолжительность культивирования 2-10 суток . О результатах судят по интенсивности роста культур в сравнении с ростом на контрольной среде, не содержащей испытываемых соединений углерода. (таб. 3)
Таблица 3- Использование соединений углерода на плотной питательной среде
Соединение углерода |
2 суток |
5 суток |
3 недели | |||
18-19 |
77-32 |
18-19 |
77-32 |
18-19 |
77-32 | |
Глюкоза |
- |
- |
- |
- |
с |
с |
фруктоза |
- |
- |
- |
- |
с |
с |
Сахароза |
с |
- |
н |
- |
н |
- |
мальтоза |
- |
- |
- |
- |
н |
н |
рамноза |
с |
с |
с |
с |
с |
с |
инизотол |
с |
- |
н |
- |
н |
- |
Маннитол |
с |
- |
н |
с |
н |
- |
Сорбитол |
- |
- |
- |
с |
с |
с |
Соединение углерода |
6 недель |
|
| |||
18-19 |
77-32 |
18-19 |
77-32 |
18-19 |
77-32 | |
Глюкоза |
|
|
|
|
|
|
фруктоза |
|
|
|
|
|
|
Сахароза |
|
|
|
|
|
|
мальтоза |
|
|
|
|
|
|
рамноза |
|
|
|
|
|
|
инизотол |
|
|
|
|
|
|
Маннитол |
|
|
|
|
|
|
Сорбитол |
|
|
|
|
|
|
- роста нет
Н нормальный рост
С слабый рост
Таблица 4- Использование соединений углерода в жидкой среде
Соединение углерода |
3 суток |
7 суток |
2 недели | |||
18-19 |
77-32 |
18-19 |
77-32 |
18-19 |
77-32 | |
Глюкоза |
Н |
- |
Н |
- |
Н |
- |
фруктоза |
Н |
- |
Н |
- |
Н |
- |
Сахароза |
Н |
- |
Н |
- |
Н |
- |
мальтоза |
С |
- |
С |
- |
Н |
С |
рамноза |
- |
- |
С |
- |
- |
- |
инизотол |
- |
С |
- |
Н |
С |
С |
Маннитол |
С |
- |
Н |
- |
Н |
С |
Сорбитол |
С |
- |
Н |
- |
Н |
С |
Соединение углерода |
3 недели |
|
| |||
18-19 |
77-32 |
18-19 |
77-32 |
18-19 |
77-32 | |
Глюкоза |
Н |
С |
|
|
|
|
фруктоза |
НН |
С |
|
|
|
|
Сахароза |
Н |
С |
|
|
|
|
мальтоза |
Н |
С |
|
|
|
|
рамноза |
С |
- |
|
|
|
|
инизотол |
С |
С |
|
|
|
|
Маннитол |
Н |
С |
|
|
|
|
Сорбитол |
Н |
С |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Рисунок – Использование соединений углерода в жидкой среде