Курс лекций (Доркина) - микробиология

2.Фильтры помещают на поверхность среды Эндо в чашку Петри.

3.Инкубируют при 37 C в течение суток и подсчитывают количество выросших колоний, типичных для E. coli.

4.Из 2-3 колоний красного цвета готовят мазки, окрашивают по Граму, а также ставят оксидазный тест. Если в мазках видны грам «-» мелкие палочки, которые являются оксидазоотрицательными, то результат считается положительным.

5.2-3 такие колонии засевают в разведённую среду Эйкмана и инкубируют в

течение суток при 37 C. Если в пробирках имеется газообразование, дают окончательный положительный ответ на наличие E. coli.

Коли – индекс рассчитывают по количеству красных колоний на фильтре. Например, на фильтре выросли 3 окрашенные колонии, а воды было 300 мл. Следовательно, в 100 мл

– 1 клетка E. coli, а в 1000 мл – 10 клеток, т.е. коли-индекс равен 10. Исходя из этого значения коли-индекса, рассчитываем коли-титр: 1000/10 = 100. Если коли-индекс равен 5, то коли-титр равен 1000/5=200.

Нормативы по коли-титру и коли-индексу воды.

Микробное число водопроводной воды не должно превышать 50, а

дистиллированной воды, используемой для приготовления лекарств, не должно превышать 10-15.

Микрофлора воздуха.

Воздух является неблагоприятной средой для микроорганизмов. Отсутствие питательных веществ, влаги, оптимальной температуры, губительное действие солнечных лучей и высушивания приводят к быстрой гибели микробов в воздухе. Но некоторые виды могут сохраняться в воздухе достаточно долго. Их распространение в воздухе связано с образованием в нём аэрозоля – системы из воздуха, капель жидкости и твёрдых частиц. Микроорганизмы адсорбируются на частицах аэрозоля и оказываются надёжно защищёнными от губительного действия УФ-лучей.

В воздухе могут встречаться до 100 видов сапрофитных микроорганизмов: пигментообразующие бактерии (микрококки, жёлтая сарцина, палочка чудесной крови и др.), спорообразующие микробы (дрожжи, плесневые грибы, актиномицеты), споровые палочки (B. subtilis, B. megaterium, B. cereus), которые наиболее устойчивы к действию прямого солнечного света и высушивания.

Количество микробов в воздухе открытого воздушного пространства колеблется от нескольких тысяч до нескольких десятков тысяч в 1 мм3. Это зависит от степени загрязнённости воздуха частицами пыли, от температуры, от характера местности, осадков, влажности, от населённости, от времени года и т.д. Чем выше концентрация в воздухе пыли, дыма, копоти, тем больше микробов, т.к. каждая частица адсорбирует на поверхности множество микроорганизмов. Микрофлора открытого воздушного пространства в основном отражает микрофлору почвы, т.к. в воздух микроорганизмы попадают с поверхности почвы с пылью.

Воздух больших городов содержит большие количества микроорганизмов, а воздух лесов, гор, полей, лугов и также воздух над водной поверхностью отличается сравнительной чистотой. Особенно мало микроорганизмов в воздухе хвойных лесов, над ледяными и снежными просторами Арктики. Летом воздух загрязнён больше, чем зимой. Атмосферные осадки способствуют очищению воздуха от микробов.

Много микроорганизмов содержится в воздухе закрытых помещений. Количество микробов в воздухе закрытых помещений зависит от их объёма, частоты проветривания, качества уборки, степени освещённости, нахождения в них людей и др. Воздух закрытых помещений отражает, в основном, микрофлору организмов людей и животных, находящихся в этих помещениях. Микроорганизмы попадают в воздух с поверхности тела (с чешуйками кожи) и через верхние дыхательные пути при разговоре, кашле, чихании.

Врезультате в воздух попадают и патогенные микроорганизмы: гноеродные кокки, микобактерии туберкулёза, дифтерийная палочка, палочка коклюша, сибиреязвенная бацилла, стрептококки, бактерии туляремии, риккетсии и другие. Некоторое время они могут находиться в воздухе, что связано с их устойчивостью к высушиванию и действию УФ-лучей. Через воздух они могут передаваться вместе с каплями слизи и мокроты при чихании, кашле, разговоре.

Всвязи с этим воздух может быть фактором передачи ряда инфекций: гриппа,

кори, скарлатины, дифтерии, туберкулёза, коклюша, стрептококковых, стафилококковых

именингококковых инфекций, ангины, оспы, лёгочная форма чумы и др.

Поэтому проводится санитарно-бактериологический контроль состояния воздуха, особенно в больничных и детских учреждениях, в аптеках.

Оценка санитарного состояния воздуха.

Состояние атмосферного воздуха оценивается по микробному числу .

Критерии оценки санитарного состояния воздуха закрытых помещений.

1.ОБЩАЯ МИКРОБНАЯ ЗАГРЯЗНЕННОСТЬ.

2.КОЛИЧЕСТВО САНИТАРНО-ПОКАЗАТЕЛЬНЫХ МИКРОБОВ ВОЗДУХА. Cанитарно-показательными микробами воздуха закрытых помещений являются:

1)золотистый стафилококк - S. aureus;

2)-зеленящий стрептококк - Str. viridans;

3)-гемолитический стрептококк - Str. haemolyticus.

Эти бактерии являются показателями орально-капельного загрязнения. Они имеют

общий путь выделения в окружающую среду с патогенными микроорганизмами,

передающимися воздушно-капельным путём. Сроки выживания их в окружающей среде не отличаются от сроков, характерных для большинства возбудителей воздушнокапельных инфекций.

Показатели санитарного состояния воздуха.

1.МИКРОБНОЕ ЧИСЛО ВОЗДУХА - общее количество микробов в 1м3 (1000 литров) воздуха.

2.КОЛИЧЕСТВО САНИТАРНО-ПОКАЗАТЕЛЬНЫХ МИКРОБОВ В 250 ЛИТРАХ ВОЗДУХА.

Методы определения показателей микробной загрязненности воздуха.

Методы делятся на седиментационные и аспирационные.

1.Седиментационный метод Коха - наиболее простой метод. Он используется только для ориентировочного анализа. Посев воздуха делают так: чашку Петри с определенной плотной питательной средой оставляют открытой в течение определённого времени и микробы оседают из воздуха на поверхность среды. Затем чашки Петри с посевом инкубируют в термостате и подсчитывают число колоний, зная, что 1 колония – 1 клетка. Микробное число воздуха или количество санитарно-показательных микробов подсчитывают, пользуясь правилом Омелянского: на поверхность питательной среды площадью 100 см2 за 5 мин оседает столько микробов, сколько их содержится в 10 л воздуха.

2.Аспирационный метод Кротова - более точный количественный метод. Посев воздуха осуществляется с помощью аппарата Кротова. Прибор Кротова устроен так, что можно сделать посев определенного объема воздуха на различные среды.

Для определения общего количества сапрофитных бактерий пропускают 100 л воздуха и используют МПА.

Для определения количества дрожжевых и плесневых грибов пропускают 250 л

воздуха и используют среду Сабуро.

Для определения количества санитарно-показательных микробов пропускают 250 л и используют желточно-солевой агар для стафилококка, среду Гарро (кровяной агар с генциановым фиолетовым) для стрептококков.

В каждом помещении делают посевы на 5-10 чашек Петри. Посевы на МПА, среде Гарро и желточно-солевом агаре инкубируют при 37С, 24 часа, а затем выдерживают при комнатной температуре 24 часа. Посевы на среде Сабуро – при 22-28С, 4 сут. После инкубации подсчитывают количество колоний и производят пересчет на 1 м3 воздуха. Идентификацию стафилококка, выросшего на желточно-солевом агаре, проводят по специальным тестам.

Нормативы.

Хотя официальных стандартов чистоты воздуха не разработано, приняты примерные показатели, по которым оценивается степень микробного загрязнения воздуха жилых помещений.

Разработаны нормативы микробной загрязненности различных помещений аптеки.

ЛЕКЦИЯ №8

Нормальная микрофлора организма человека. Дисбактериозы. Пробиотики.

Нормальная микрофлора человека – это совокупность микробных сообществ (биоценозов) в организме здоровых людей. Микробные биоценозы сформировались в процессе эволюции в результате приспособления микроорганизмов друг к другу и к

организму человека.

В состав нормальной микрофлоры входит более чем 500 видов микроорганизмов. В норме встречаются как безвредные, так и болезнетворные микроорганизмы. Все виды находятся в состоянии эубиоза - динамического равновесия друг с другом и с организмом человека. Организм человека и его нормальная микрофлора это единая экологическая система.

Нормальную микрофлору человека делят на 2 группы:

а) аутохтонная (резидентная) – облигатная микрофлора; она состоит из постоянных микроорганизмов, максимально приспособленных к существованию в организме хозяина (сапрофиты, условно-патогенные);

б) аллохтонная (транзиторная) – факультативная микрофлора; она состоит из временных микроорганизмов, которые не могут долго жить в организме человека (сапрофиты и условно-патогенные).

Иногда у здоровых людей могут встречаться патогенные бактерии и вирусы (бактерио- и вирусоносительство).

Микрофлора заселяет поверхность тела и полости, сообщающиеся с окружающей средой (кроме лёгких и матки). В связи с этим различают микрофлору кожи, слизистых оболочек, полости рта, верхних дыхательных путей, пищеварительного тракта и мочеполовой системы.

Остальные органы и ткани человека, а также кровь, лимфа, спинномозговая жидкость стерильны (так как в них отсутствуют микроорганизмы).

Для микрофлоры каждой области тела человека характерно относительное постоянство.

Микрофлора кожи.

Микроорганизмы находятся на поверхности кожи, в волосяных мешочках, в сальных и потовых желёзах. Они питаются выделениями жировых и сальных желёз, отмершими клетками, продуктами распада. На 1 см2 – 80 тысяч микроорганизмов.

Видовой состав: 1) непатогенные стафилококки (S. epidermidis, S. saprophyticus), сарцины, дифтероиды, плесневые и дрожжеподобные грибы (C. albicans), коринебактерии, спорообразующие бациллы (Bac. subtilis), микобактерии; 2) некоторые патогенные и условно-патогенные – S. aureus (5%), стрептококки.

Наибольшее количество микробов находится на открытых участках кожи (руки, лицо, шея, ушные раковины). На коже можно обнаружить транзиторные микробы, но они быстро исчезают, так как кожа обладает бактерицидным действием (уничтожение микробов). Бактерицидное действие обусловлено содержанием в поте противомикробных веществ: -глобулинов, иммуноглобулинов A , трансферрина, лизоцима и др. Это действие более эффективно, если кожа чистая. На грязной коже наблюдается усиление роста микроорганизмов, которые и определяют запах тела.

Микрофлора кожи имеет большое значение в загрязнение воздуха микроорганизмами. Это происходит при шелушении кожи, так как на чешуйках находятся микроорганизмы. Через грязные руки может произойти загрязнение лекарственных средств микроорганизмами, которые вызывают их порчу.

Микрофлора верхних дыхательных путей.

Микроорганизмы попадают в верхние дыхательные пути вместе с частичками пыли. Большая их часть задерживается в носо- и рото-глотке. Трахея и бронхи – стерильны.

В носовой полости содержится небольшое количество микробов. В носоглотке их значительно больше: стрептококки (Str. mitis – 80-90%), бактероиды, нейссерии, вейлонеллы, стафилококки, дифтероиды, лактобактерии. Встречаются патогенные и условно-патогенные микробы: Str. pneumonia, Neisseria meningitis. При ослаблении защитных сил они могут вызывать заболевания дыхательных путей: ангины, бронхиты и др.

У носителей болезнетворных микробов могут встречаться гемолитические стрептококки, стафилококки, а также дифтерийная палочка, менингококки, туберкулёзная палочка, некоторые болезнетворные вирусы (гриппа, стоматита).

Микрофлора пищеварительного тракта.

Микрофлора пищеварительного тракта наиболее стабильна и разнообразна по своему составу. Микроорганизмы находятся в полости и на слизистых оболочках. В разных отделах пищеварительного тракта состав микрофлоры различен.

В ротовой полости имеются благоприятные условия для многих микробов: температура, влажность, слабощелочное значение рН. Здесь находится более 100 видов микроорганизмов (в 1 мл слюны – 108 микробных тел). Основная масса локализована в зубном налёте (в 1 мг – 250 миллионов микробных тел).

Главную роль в формировании постоянной микрофлоры играет слюна, так как она обладает бактерицидным действием. В ней находятся противомикробные вещества: лизоцим, лактоферрин, пероксидаза, нуклеаза, секреторный иммуноглобулин.

Вротовой полости обитают стрептококки (Str. salivarius – наиболее постоянный обитатель), лактобациллы, вейлонеллы, нейссерии, коринебактерии, бактероиды. Обнаруживаются гемофильные бактерии, трепонемы, дрожжеподобные грибы, актиномицеты, микоплазмы, простейшие.

Вжелудке содержится незначительное количество микробов. Желудочный сок имеет кислое значение рН, что вызывает гибель микроорганизмов. Желудочный сок – надёжный защитный барьер от проникновения в кишечник патогенных и условнопатогенных микробов. Если кислотность снижается, в желудке обнаруживаются лактобациллы, дрожжи, Bac. subtilis, Sarcina ventriculus, поступающие из ротовой полости. Возможно также проникновение в желудок, а затем и в кишечник дизентерийных, брюшнотифозных, паратифозных бактерий, холерных вибрионов и других патогенных микробов. При гастритах и язвенной болезни в желудке обнаруживается Campylobacter pylori.

Вверхнем отделе тонкой кишки обитает мало микроорганизмов, так как в тонкой кишке содержится много ферментов. Здесь обнаруживаются бифидобактерии, клостридии, эубактерии, лактобациллы, анаэробные кокки. В нижних отделах тонкой кишки микрофлора приближается к микрофлоре толстого кишечника.

Втолстой кишке содержатся огромное количество микробов, так как здесь имеются благоприятные условия для размножения многих микроорганизмов. За сутки с фекалиями

выделяется 17 1012 микробных тел, что составляет 1/3 сухой массы фекалий.

В толстой кишке обитает около 260 видов факультативных и облигатных анаэробов. Облигатные анаэробы составляют 96-99%: 1) грамположительные неспоровые палочки – бифидобактерии, лактобактерии, эубактерии, катенобактерии; 2) грамотрицательные неспоровые палочки – бактероиды; 3) грамположительные споровые палочки – C. perfringens, C. sporogenes (в небольших количествах). Бифидобактерии и

бактероиды составляют 80-90%.

Факультативные анаэробы составляют 1-4%: 1) грамотрицательные бактерии семейства Enterobacteriaceae: E. coli, p, Enterobacter, p. Citrobacter, p. Klebsiella, p. Proteus;

2)лактобациллы; 3) энтерококки (Str. faecalis).

Внебольшом количестве (0,001-0,01%) содержатся клебсиеллы, протей, дрожжи, синегнойная палочка, простейшие, вирусы. В очень редких случаях встречаются стафилококки и стрептококки.

Значение микрофлоры человека.

Л. Пастер пытался вывести безмикробных животных, для того чтобы изучить значение микробов. Но техника того времени не позволяла ответить на этот вопрос. В настоящее время безмикробную жизнь макроорганизмов изучает гнотобиология. У гнотобиотов (безмикробных животных), которых выращивают путём вскармливания

стерильной пищей в специальных камерах, увеличена слепая кишка, недоразвита лимфоидная ткань, снижена масса внутренних органов, объём крови, содержание воды в тканях и антител в сыворотке крови, снижены клеточные и гуморальные факторы иммунитета. Таким образом, данные гнотобиологии говорят о жизненно важном значении микрофлоры.

Микробные биоценозы поддерживают нормальные физиологические функции и играют определённую роль в иммунитете. Нарушения в микробных биоценозах во многих случаях могут привести к возникновению патологических процессов в соответствующих органах.

Важную роль играет микрофлора толстой кишки. Она обладает выраженными антагонистическими свойствами (особенно анаэробные микробы) и препятствует развитию патогенных бактерий, которые могут попасть с пищей и водой в кишечник, а также гнилостных бактерий. Микробы – постоянные обитатели кишечника образуют бактериоцины, антибиотики, молочную кислоту, спирты, перекись водорода, жирные кислоты, которые подавляют размножение патогенных видов. Таким образом, анаэробы кишечника участвуют в обеспечении колонизационной резистентности, так как предотвращают колонизацию (заселение) слизистых оболочек посторонними микроорганизмами.

Микробы кишечника также участвуют в процессах пищеварения, водно-солевом, белковом, углеводном, липидном обменах, образуют на слизистой оболочке кишечника защитную плёнку, способствуют формированию и развитию иммунной системы, участвуют в обезвреживании токсических соединений, синтезируют биологически активные вещества (витамины, антибиотики, бактериоцины).

Большое значение имеет E. сoli, которая обладает высокой ферментативной активностью, синтезирует витамины B1, B2, B12, B5, K, обладает антагонистическими свойствами против патогенных представителей семейства Enterobacteriaceae, против стафилококков и грибов p. Candida.

Но имеются и патогенные серовары E. coli, которые вызывают у детей младшего возраста тяжёлые заболевания – колиэнтериты, дизентериеподобные и холероподобные гастроэнтериты, а у взрослых – эшерихиозы в виде дизентериеподобных заболеваний или нагноительно-воспалительных поражений.

Другие условно-патогенные представители нормальной микрофлоры также могут вызвать заболевания при снижении защитных сил организма: гнойно-воспалительные процессы после операций, при ожогах и обморожениях, а у новорожденных – поражения кожи, слизистых оболочек, сепсис. Условно-патогенные микроорганизмы кожи при несоблюдении правил гигиены или при ослаблении организма могут вызвать такие заболевания, как пиодермия, фурункулёз и т.д. Микроорганизмы полости рта могут служить одной из причин кариеса зубов.

Дисбактериоз (дисбиоз).

Дисбактериоз (дисбиоз) – это состояние, развивающееся в результате утраты нормальных функций микрофлоры. При этом происходит нарушение сложившегося равновесия между видами микробов, а также между ними и организмом человека, т.е. нарушается состояние эубиоза. При дисбактериозе происходят качественные и количественные изменения бактериальной микрофлоры. При дисбиозе – изменения и среди других микроорганизмов (вирусов, грибов). Дисбактериозы вызывают различные эндогенные (внутренние) и экзогенные (внешние) факторы. Чаще всего развиваются

дисбактериозы кишечника.

К важнейшим экзогенным факторам относится безконтрольное применение антибиотиков. Эти лекарственные средства селективно (избирательно) действуют на определённые микроорганизмы и уничтожают чувствительные к ним виды. Поэтому создаются условия для размножения видов, устойчивых к антибиотикам.

Для нормальной микрофлоры кишечника характерно следующее соотношение

между видами - преобладание анаэробных бифидобактерий и незначительное содержание аэробных бактерий, что способствует нормальной работе кишечника. При дисбактериозе кишечника это соотношение нарушается и преобладает аэробная флора, вплоть до полного отсутствия бифидо- и лактобактерий, резко увеличивается количество условнопатогенной микрофлоры, особенно часто встречаются патогенный стафилококк, протей, дрожжеподобные грибы рода Candida, клебсиеллы, реже – синегнойная палочка, клостридии.

Главная причина дисбактериоза - нарушение антагонистической активности нормальной микрофлоры кишечника (т.е. нарушение колонизационной резистентности). В результате аномально размножаются те микроорганизмы, которые в норме присутствуют в небольших количествах и относятся к факультативной (транзиторной) микрофлоре. Происходит нарастание и распространение гнилостных микроорганизмов p. Pseudomonas, p. Proteus, грибов p. Candida, в том числе условно-патогенных микробов, которые образуют токсические вещества (индол, скатол).

Т.о. при дисбактериозе наблюдается: 1) резкое уменьшение общего количества микробов, вплоть до полного исчезновения отдельных видов нормальной микрофлоры (бифидо- и лактобактерий, нормальной кишечной палочки); 2) преобладание видов,

которые в норме встречаются в минимальном количестве.

В результате нарушения нормальной микрофлоры кишечника нарушается его нормальная работа, т.е. развивается дисфункция кишечника. Наблюдаются нарушения стула (запоры чередуются с поносами), метеоризм. Могут наблюдаться признаки общей интоксикации и развитие иммунодефицита (частые простудные заболевания, герпес, лямблиоз, кандидоз).

Последствия дисбактериоза: 1) резкое увеличение антибиотикорезистентности бактерий; 2) снижение образования витаминов и ферментативной активности

микрофлоры; 3) снижение иммунологической резистентности организма. Считается, сто дисбактериоз и дисбиоз – это эндогенные инфекции, развивающиеся чаще всего в результате нарушения нормальной микрофлоры антимикробными препаратами.

Препараты для лечения дисбактериозов.

Лечение заключается в восстановлении нормальной микрофлоры. Для

восстановления нормальной микрофлоры применяются пробиотики.

Пробиотики – это живые микроорганизмы или вещества, которые нормализуют состав и функции микрофлоры в организме.

К пробиотикам относятся:

1) эубиотики – препараты, содержащие живые (лиофильно высушенные) микроорганизмы (чаще представители нормальной микрофлоры, обладающие выраженными антагонистическими свойствами). Они могут быть монокомпонентными (монокультуры) и поликомпонентными.

Монокомпонентные:

-колибактерин – живая культура кишечной палочки штамма М-17, антагонистически активного против патогенных бактерий семейства Enterobacteriaceae;

-бифидумбактерин – живые Bifidobacterium bifidum в высушенном виде;

-лактобактерин – высушенная взвесь живых антагонистически активных штаммов лактобактерий;

-бактисубтил – препарат (в капсулах), содержащий высушенную культуру Bac. subtilis (штамм IР5832);

-фловинин БС – чистая культура бацилл штамма IР5832 с вегетативными спорами. Поликомпонентные:

-бификол – препарат, содержащий высушенные живые антагонистически активные штаммы кишечной палочки и бифидобактерий.

-бифиформ – препарат, содержащий высушенные живые бифидобактерии и энтерококки; а также аципол, бифилакт, ацилакт, линекс .

2)Пребиотики – вещества немикробного происхождения, компоненты убитых микробных клеток и /или их метаболиты:

- хилак-форте – концентрат продуктов обмена веществ бактерий – симбионтов толстого кишечника, а также биосинтетическая молочная кислота, молочно-солевой буфер, лактоза, аминокислоты, жирные кислоты;

3)Синбиотики – содержат как живые микроорганизмы, так и неклеточные стимуляторы роста нормальной микрофлоры: нутролин В (лактобациллы + витамины), ацидофилюс, примадофилюс, мальтидофилюс, бебилайф.

Для нормализации микрофлоры используются живые бактерийные препараты для заквашивания молока и приготовления продуктов, обладающих пробиотическим действием ("наринэ" и др.). При некоторых формах кишечного дисбиоза используются также и бактериофаги: коли-протейный, стафилококковый, синегнойный

бактериофаги.

ЛЕКЦИЯ №9

Микрофлора лекарственных растений. Фитопатогенные микроорганизмы. Микробная порча растительного сырья, готовых лекарственных средств. Методы контроля микробной чистоты растительного сырья и лекарственных средств.

Лекарственные растения используются для приготовления лекарств. Нужно знать, что растительное лекарственное сырье может быть загрязнено микроорганизмами, которые будут вызывать порчу растительного сырья.

Растительное сырье может быть загрязнено микроорганизмами – представителями

нормальной микрофлоры растений, а также фитопатогенными микроорганизмами – возбудителями инфекционных заболеваний растений.

Нормальная микрофлора растений.

В норме на поверхности живых растений (на листьях, стеблях, плодах, семенах) обитают микроорганизмы, которые называются эпифитной микрофлорой. Они питаются выделениями растений и органическими загрязнениями на поверхности растений. Эпифитная микрофлора не наносит вреда и препятствует проникновению фитопатогенных микробов в растительные ткани (антагонистическое действие). К эпифитной микрофлоре относятся: грам «-» бактерии Erwinia herbicola (на МПА образует золотисто-желтые колонии), грам«-» полиморфная палочка Pseudomonas fluorescens (на МПА – прозрачные колонии с флюоресценцией), спорообразующие бактерии – Bacillus mesentericus, Bacillus vulgatus, бесспоровые бактерии – Bacterium putidam, E. сoli, а также небольшое количество грибов.

Возле корней растений в почве находится большое количество микроорганизмов. Эта зона называется ризосферой. Здесь встречаются псевдомонады, микобактерии (неспорообразующие палочки), актиномицеты, а также спорообразующие бактерии и грибы. Эти микроорганизмы переводят различные сложные вещества в соединения, доступные для растений, синтезируют биологически активные соединения (витамины, антибиотики и др.), вступают в симбиотические взаимоотношения с растениями, обладают антагонистическими свойствами по отношению к фитопатогенным микробам. Состав ризосферы специфичен для каждого вида растений.

Состав нормальной микрофлоры растений зависит от вида, возраста растений, типа почвы, температуры, влажности окружающей среды, от других условий произрастания, от времени проверки растений, их высоты и целостности. Растения культурных почв в большей степени загрязнены микроорганизмами, чем растения лугов и лесов. Осенью на листьях обнаруживается больше микробов, чем ранней весной. При повышении влажности воздуха повышается количество микробов на поверхности растений

(эпифитная микрофлора). На поврежденных растениях накапливается большое количество пыли, а, следовательно, и микроорганизмов. Особенно много микробов содержится в нижней части растений, что связано с их попаданием из почвы. В большом количестве обнаруживаются микроорганизмы на растениях, растущих на, свалках, вблизи навоза, в местах выпаса скота. При этом на растениях могут быть обнаружены и патогенные микроорганизмы.

Фитопатогенные микроорганизмы.

Кфитопатогенным микробам относятся возбудители инфекционных заболеваний у растений - бактерии, грибы и вирусы. Болезни, вызываемые бактериями, называются бактериозами. Различают местные и общие бактериозы. Общие бактериозы вызывают гибель всего растения или его отдельных частей. Местные бактериозы - поражения только отдельных участков растений.

Передача возбудителей бактериозов происходит через зараженные семена, остатки больных растений, почву, воздух, воду, путем переноса насекомыми, моллюсками, нематодами. Бактерии проникают в растения через устьица, нектарники, через повреждения. Внутри растения бактерии могут распространяться 2-мя путями: 1) межклеточный путь; такие заболевания называются паренхиматозными; 2) по сосудам; бактерии закупоривают сосуды, поэтому растения увядают; такие заболевания называются сосудистыми.

Основные роды бактерий - возбудителей инфекционных заболеваний растений:

Род Erwinia - вызывает болезни типа ожога, увядания, мокрой или водянистой

гнили.

Род Pseudomonas – вызывает бактериальную пятнистость (на листьях образуются пятна различной окраски и размеров).

Род Xanthomonas – вызывает сосудистые бактериозы (закупорка сосудов, увядание и гибель), поражает листья, вызывает пятнистость.

Род Corynebacterium – сосудистые и паренхиматозные заболевания, бактериальный рак.

Род Agrobacterium – вызывает образование опухолей (корончатые галлы). Род Pectobacterium – вызывает преимущественно гнили растений.

Квирусным заболеваниям растений относятся мозаичные болезни, желтухи, болезнь увядания, карликовость, закукливание и др.

Грибные болезни растений – микофитозы: фузариозы, гнили, аскохитозы, головни

идр.

Грибы, поражающие растения, могут в случае приготовления из пораженного зерна продуктов питания вызывать пищевые отравления человека – микотоксикозы. Примером является эрготизм – заболевание, возникающее при употреблении продуктов, приготовленных из зерна, зараженного спорыньей.

Срезанные и сорванные при заготовке лекарственные растения (растительное сырье) могут содержать большое количество микробов. Растительное сырье может быть загрязнено:

1)нормальной микрофлорой растений;

2)фитопатогенной микрофлорой; т.е. микробами самих растений,

3)микробами из окружающей среды (почвы, воздуха, от людей).

Растительное лекарственное сырье может загрязняться микроорганизмами из окружающей среды на всех этапах его заготовки и хранения: сбор, первичная обработка, сушка, измельчение, упаковка, получение резаного сырья, растительных порошков, а также при приготовлении брикетов, гранул, таблеток.

Срезанные и сорванные растения являются хорошей питательной средой для размножения микроорганизмов (грибов, гнилостных и целлюлозоразрушающих бактерий и др.). Поэтому происходит микробная порча сырья. Признаки порчи: изменение цвета,

появление очагов размножения плесени и пр. Микробная порча приводит к изменению фармакологических свойств растений и лекарственных препаратов, полученных из растений, а также может служить причиной образования токсичных продуктов. Патогенные микроорганизмы могут вызывать заболевания у людей, использующих препараты.

Одним из способов, препятствующих росту микроорганизмов на растениях, является их высушивание. На высушенных растениях жизнедеятельность микробов значительно снижается, многие бактерии погибают. В связи с этим, микробная порча сырья происходит в первую очередь при повышенной влажности, которая способствует размножению гнилостных микробов.

Поэтому необходимо строго соблюдать условия хранения растительного сырья и проводить бактериологический контроль его микробной загрязненности.

Методы контроля микробной чистоты растительного сырья.

Для оценки микробной обсемененности растительного сырья используется

метод смывов. В асептичных условиях, используя стерильные инструменты, взвешивают 1 г сырья, помещают в стерильную пробирку с 5 мл изотонического раствора хлорида натрия и встряхивают на шуттель-аппарате в течение 10 мин; берут 1 мл смыва, делаю разведения 1:10, 1:100; из каждого разведения делают посев 1 мл в глубину питательной среды в чашках Петри. Для выявления роста грибов и дрожжей используют среду Сабуро или сусло-агар, для выявления бактерий – МПА. При этом засевают 2-3 параллельные чашки на каждое разведение. Оставляют в термостате при 37С для бактерий и при 24С для грибов и дрожжей, подсчитывают число выросших колоний и, зная разведение смыва, подсчитывают микробную загрязненность сырья. Микробную загрязненность лекарственного сырья выражают количеством клеток микроорганизмов в 1 г сырья.

Микрофлора готовых лекарственных форм.

Микроорганизмы могут загрязнять и различные готовые лекарственные препараты. В готовые лекарственные препараты микробы попадают:

1)из растительного лекарственного сырья (нормальная и фитопатогенная микрофлора растений);

2)из окружающей среды во время изготовления лекарственных препаратов в аптеках и на фармацевтических фабриках.

Источники микробного загрязнения лекарственных препаратов:

1)лекарственные растения; 2) вода 3) аптечная посуда, оборудование и пр.; 4) воздух производственных помещений; 5) руки персонала. Микроорганизмы могут попадать в лекарственные средства в процессе неправильного анализа, особенно органолептического.

Микрофлора готовых лекарственных форм, изготовляемых в аптеках и на производстве, зависит от : 1) вида сырья, его питательной ценности для микроорганизмов или, напротив, его антимикробной активности, начальной загрязненности; 2) химической природы веществ, входящих в состав лекарственного средства; 3) технологии приготовления (настои, отвары, температура, время, объем и пр.); 4) условий хранения; 5) санитарно-гигиенических условий в аптеках и на фабриках.

Микроорганизмы, попадающие в лекарства, приводят к их порче и могут изменить их качество, разлагая своими ферментами действующее начало и переводя его

вдругие соединения. Таким образом,. микроорганизмы могут изменять свойства лекарств, делая их неактивными или даже токсичными, например, в результате образования микробных токсинов и пирогенов. Патогенные микроорганизмы могут вызывать инфекционные заболевания у людей, использующих препараты, загрязненные микроорганизмами родов Staphylococcus, Pseudomonas, Salmonella и др. Среди готовых лекарственных форм наиболее загрязненными являются препараты растительного происхождения – настои и отвары. При хранении этих лекарств, особенно в теплом