Блок информации - клостридиозы

Материал для исследования:

-кусочки пораженных и некротизированных тканей;

-экссудат;

-отделяемое ран;

-кровь;

-гной (в случае присоединения вторичной инфекции)

1 этап исследования

Кусочки тканей, а также гной/экссудат, забранный шприцем или стерильным вискозным зондом-тампоном, помещают во флаконы или коммерческую транспортную систему-тубсер с транспортной средой (агаровым гелем) для анаэробов, в специальный мешок или систему пробирок, из которых удален кислород. Наиболее часто в качестве транспортных сред для анаэробов используют среду Амиеса, Стюарта, Кери-Блер, тиогликолевую. Другим тампоном собирают отделяемое раны для микроскопии, помещают его в стерильную сухую пробирку. Пробы доставляют в лабораторию в течение 1 часа.

Из нативного материала готовят мазки, окрашивают по Граму, дополнительно — по Бурри-Гинсу и Ожешко (для выявления капсул и спор соответственно).

Доставленный в транспортной среде материал делят на две части, одну из которых прогревают при 800С 10 минут на водяной бане (для уничтожения вегетативных клеток сопутствующих микроорганизмов). Обе части исследуют параллельно.

При отсутствии анаэростатов материал засевают в пробирки со средами Китт-Тароцци и Вильсон-Блер, дополнительно — с молоком по Тукаеву, причем среды разливают «высоким столбиком» и предварительно регенерируют путем кипячения в течение 10-15 мин., либо же используют их сразу после приготовления не позднее 2-х часов.

При наличии анаэробного оборудования производят посев в вышеуказанные среды и на пластинки анаэробного неселективного и селективного (с аминогликозидами) кровяных агаров. Вместо указанных можно использовать любые другие аналогичные среды, выпускаемые промышленностью. Чашки с агарами помещают в анаэростат.

Все посевы культивируют при 370С , пробирки просматривают через 2, 6, 24 часа, чашки - через двое суток.

2 этап исследования (через 6 часов — 2-е суток)

Отмечают характер роста микроорганизмов в пробирочных средах и время появления изменений в них; из каждой среды с видимыми признаками роста готовят мазки по Граму,

2

4

5

5. Возбудители воздушно-капельных инфекций

Воздушно-капельные инфекции — инфекции, вызываемые разнообразными группами микроорганизмов (бактериями, хламидиями, микоплазмами, вирусами и др.), при которых воздушнокапельный путь передачи является одним из ведущих.

Основными бактериальными возбудителями специфических воздушно-капельных инфекций являются:

Corynebactherium diphtheriae,

Bordetella pertussis/parapertussis,

Neisseria meningitidis,

Mycobacterium tuberculosis,

Legionella pneumophilia.

5.1. Схема бактериологической диагностики менингококковых

инфекций

Материал для исследования при различных формах менингококковой инфекции:

при локализованных формах (бактерионосительстве, назофарингите) слизь из носоглотки;

при генерализованных формах:

-менингококцемии - венозная кровь,

-менингите /менингоэнцефалите - ликвор и венозная кровь.

1 этап исследования

I.Исследование носоглоточной слизи

Слизь с задней стенки глотки берут натощак или через 3-4 ч.

6

после еды стерильным ватным тампоном, укрепленном на изогнутой проволоке. Материал берут с обязательным надавливанием шпателем на корень языка. Тампон вводят концом кверху за мягкое небо в носоглотку и проводят 2-3 раза по задней стенке. При извлечении тампон не должен касаться зубов, слизистой щек, языка.

Тампон опускают в пробирку с транспортной средой и доставляют в лабораторию в согревающих условиях (37°С) в специальных контейнерах в течение 2-4ч.

В лаборатории материал засевают на 2 чашки: пластинку 20% сывороточного агара и сывороточного агара с линкомицином (для подавления роста Грам+ кокков - нормальных обитателей ВДП). Пpи посеве материал втирают тампоном на поверхности 1х2 см, а затем этим же тампоном делают посев штрихами.

4) Чашку помещают в термостат при 370С, повышенной влажности и 5-10% С02.

Примечание: материал может быть засеян на чашки на месте его взятия: в этом случае транспортировка осуществляется немедленно при 37°С.

2 этап исследования

Через сутки отмечают рост характерных для менингококков колоний: бесцветные, нежные, полупрозрачные колонии средних размеров (2-3 мм) с ровными краями и гладкой поверхностью, вязкой консистенции.

Из колоний готовят мазки и окрашивают по Граму в модификации Калины, микроскопируют (грамотрицательные бактерии выглядят ярко-розовыми, грамположительные – сине-черными).

При обнаружении в мазках Грамдиплококков бобовидной формы колонии отсевают на сектора 20% сывороточного агара или скошенного сывороточного агара для накопления чистой культуры.

Посевы термостатируют при 37°С, повышенной влажности сутки.

Примечание: в первых посевах для менингококков характерен полиморфизм (различная величина и окраска клеток, может быть

7

беспорядочное расположение в виде «рассыпанного гороха» ).

носоглотке человека могут встречаться нормальные обитатели — непатогениые нейссерии, а также вид Могахеllа catarrhalis, сходный с нейссериями по ряду свойств.

Для идентификации выполняют следующие биохимические и культурапьные тесты:

-оксидазный и каталазный (они «+» у всех нейссерий и моракселл);

-окисление сахаров путем посевов на 4 чашки с 20% сывороточным агаром, содержащим один из углеводов (глюкоза, мальтоза, сахароза, лактоза) и индикатор;

-способность расти на бессывороточных средах путем посева на простой МПА;

-способность расти в присутствии желчи - посев на 20% сывороточный агар с 0,2% желчи.

наличии в лаборатории серогрупповых антименингококковых сывороток определяют серогруппу культуры в слайд-агглютинации. Примечание: на территории России циркулируют в основном серогруппы менингококков А, В. С.

4.Дают заключение.

Таблица 7

8

Культуральные и биохимические свойства нейссерий и Могахеllа catarrhalls

9