О пределение концентрации железа в сыворотке крови батофенантролиновым методом по набору фирмы Lachema Принцип

Сывороточное железо восстанавливают тиогликолевой кислотой, белки осаждают трихлоруксусной кислотой, в надосадочной жидкости устанавливают нужную величину pH ацетатом натрия и проводят цветную реакцию с батофенантролином.

Одновременно определяют общую железосвязывающую способность сыворотки (ОЖСС) — максимальное количество Fe³⁺, которое может связаться с белками сыворотки.

Определение железосвязывающей способности сыворотки крови батофенантролиновым методом по набору фирмы Lachema

Принцип

Исследуемую сыворотку выдерживают с раствором трехвалентного железа, при этом весь трансферрин насыщается. Избыток солей железа удаляют адсорбцией на карбонате магния, определяют содержание железа в надосадочной жидкости любым методом.

Влияющие факторы

Физиологическое повышение уровня железа отмечается при употреблении пероральных контрацептивов, этанола, аскорбиновой кислоты.  Снижение — при приеме больших количеств ацетилсалициловой кислоты, потреблении крепкого чая, кофе, повышенном содержании кортизона, кортикотропина, адреналина при усиленной выработке или приеме соответствующих препаратов. Обследуемый не должен принимать препараты железа по крайней мере 5 дней.

Снижение in vitro наблюдается при использовании цитрата натрия, фторид‑оксалата, ЭДТА. Сыворотка или ликвор должны быть свободны от гемолиза и примесей крови. Необходимо использовать тщательно промытую, обработанную бихроматом калия и бидистиллированной водой, посуду.

Клинико‑диагностическое значение

Сыворотка

Увеличение имеет место:

• При недостаточном использовании железа — гемолитических, гипопластических и апластических анемиях, хронических гепатитах и циррозах печени, ферментативных нарушениях синтеза гема при свинцовых интоксикациях;

• При повышенном поступлении железа в организм — наблюдается при первичном и вторичном гемохроматозе, когда из‑за наследственного нарушения механизмов регуляции всасывания в желудочно‑кишечном тракте в организм поступает огромное количество железа; также накопление железа может быть при частом переливании крови, избыточном внутривенном и внутримышечном введении препаратов железа. Высокий уровень бывает при талассемиях, при всех формах желтух.

Снижение наблюдается при железодефицитных анемиях, при активном эритропоэзе (начальная форма злокачественной анемии), обтурационной желтухе, острых и хронических инфекциях, дефиците в пище янтарной и пировиноградной кислот, фруктозы, витамина С (переводит трехвалентное железо в кишечнике в усвояемую двухвалентную форму), избытке оксалатов, фитатов, гемосидерозе внутреннних органов, нефрозе, квашиоркоре, при всех воспалительных процессах.

Общая железосвязывающая способность

Возрастание ОЖСС выявляется при гипохромных анемиях, остром гепатите, поздних сроках беременности.

Снижение — при анемиях, хронических инфекциях, гемохроматозе, циррозе, опухолях и заболеваниях почек.

Трансферрин

Увеличение содержания трансферрина отмечается при хронических железодефицитных анемиях различной этиологии.

Снижение — при потерях белка: нефротический синдром и хроническая почечная недостаточность, гастроэнтеропатии, ожоги; злокачественные опухоли, анемии при хронических инфекциях, белководефицитные состояния, тяжелые заболевания печени, наследственные состояния.

Ферритин

Увеличение содержания ферритина в сыворотке отмечается при остром миелобластном и лимфобластном лейкозе, лимфогрануломатозе, воспалительных процессах, поражении печеночных клеток.

Снижение концентрации сопровождает уменьшение уровня железа, при эпидемическом гепатите в зависимости от тяжести может выявляться 2‑3‑кратное снижение уровня белка.

Хлор

Важнейшими анионами внеклеточного пространства являются хлорид‑ионы, в нем содержится до 90% общего количества хлора. Они находятся в организме преимущественно в виде солей Na, K, Ca, Mg и играют важную роль в создании осмотического давления, в поддержании кислотно‑щелочного равновесия. Основным депо хлора является кожа, подкожная клетчатка и соответствующая межклеточная жидкость, где депонируется от 30 до 60% введенного хлора. В крови хлор встречается главным образом в комплексе с ионами натрия. В эритроцитах ионов хлора в 2 раза меньше, чем в плазме. С мочой выводится до 90%, остальное количество удаляется с потом и калом.

В физиологических условиях изменения концентрации ионов хлора вторичны к изменениям других ионов и направлены в первую очередь на создание электронейтральности среды. Нескомпенсированная гиперхлоремия приводит к метаболическому ацидозу.

Для определения содержания хлора в биологических жидкостях используются следующие группы методов:

1. Ртутнометрические методы;

2. Колориметрические методы;

3. Электрохимические методы — являются наиболее удобными и точными;

4. Изотопные методы.

5. Осадочные методы, основанные на способности ионов хлора образовывать с ионами серебра нерастворимые соли. Количество осаждающего вещества эквивалентно содержанию хлорид‑ионов. Конец реакции устанавливают по прекращению выпадения осадка или с помощью индикатора. Эти методы отличаются друг от друга осаждающим реактивом (азотнокислое, йоднокислое серебро) и индикатором (хромат калия, железоаммиачные квасцы, по количеству освободившегося йода, дихлорфлюоресцин и т.д.);

В качестве унифицированного предложен меркуриметрический метод.