3. Методы выделения антраценов из лрс, очистка извлечения.

Из сырья антраценпроизводные извлекают водой или спиртом различной концентрации. Для получения свободных агликонов, антрагликозиды в растительном сырье подвергают гидролизу, свободные агликоны извлекают диэтиловым эфиром или хлороформом. Для обнаружения антраценпроизводных в сырье используют качественные реакции и хроматографическое исследование. Качественные реакции основаны на химических свойствах: 1. Реакция образования антрахинолятов со щелочью. Может быть проведена в трех вариантах: а) на сухом сырье - при нанесении нескольких капель 5-10 % раствора натрия гидроксида на сырье появляется вишнево-красное пятно. Положительный результат наблюдается, если антраценпроизводные присутствуют в окисленной форме.

б) с водным извлечением (1:10) - при добавлении к водному извлечению из сырья нескольких капель 5-10 % раствора щелочи образуется вишнево-красное окрашивание. в) реакция Борнтрегера. Позволяет обнаружить эмодины в присутствии других производных антрацена. Проба основана на способности антрагликозидов подвергаться щелочному гидролизу с образованием свободных агликонов. Одновременно происходит окисление восстановленных форм. После подкисления гидролизата агликоны извлекают эфиром. При встряхивании эфирного слоя с раствором аммиака эмодины переходят в водный слой, окрашивая его в вишнево-красный цвет. Хризофанол остается в органическом слое, окрашивая его в желтый цвет.

Содержащиеся в сырье марены производные ализарина окрашивают аммиачный слой в фиолетовый цвет.

2. Реакция микросублимации (микровозгонки). Основана на способности антраценпроизводных возгоняться при 200 °С с последующей конденсацией на холодной поверхности без изменения основной структуры. Может быть проведена в двух вариантах: в пробирке и на предметном стекле. При нанесении на сублимат раствора натрия гидроксида образуется вишнево-красное (производные хризацина) или фиолетовое (производные ализарина) окрашивание.

3. Реакция образования лаков.

Основана на способности антраценпроизводных образовывать со спиртовым раствором магния ацетата окрашенные комплексы.

Хроматографическое исследование. Для идентификации антраценпроизводных в лекарственном растительном сырье используют бумажную хроматографию и хроматографию в тонком слое сорбента. Обнаруживают производные антрацена по характерной флуоресценции в УФ-свете. Количественное определение. Все методы количественного определения антраценпроизводных в сырье основаны на определении свободных агликонов после кислотного гидролиза.

Агликоны экстрагируют в органический растворитель и определяют различными методами. 1. Фотоэлектроколориметрический метод. Основан на способности окрашенных антрахинолятов поглощать монохроматический свет при длине волны 540 нм.

Стадии определения: 1. Гидролиз антраценпроизводных и экстракция агликонов из сырья. 2. Получение окрашенных солей. Эфирное извлечение обрабатывают в делительной воронке отдельными порциями щелочно-аммиачного раствора (5 % раствор натрия гидроксида, содержащий 2 % раствор аммиака). Антраценпроизводные в виде окрашенных антрахинолятов переходят в водную фазу; обрабатывают до тех пор, пока последняя порция щелочно-аммиачного раствора не будет оставаться бесцветной. 3. Окисление восстановленных форм антраценпроизводных. Для перевода всех форм антраценпроизводных в окисленные, часть щелочно- аммиачного раствора антрахинолятов нагревают на водяной бане в течение 15 мин. Восстановленные формы окисляются кислородом воздуха и вступают в реакцию со щелочно-аммиачным раствором, окраска становится интенсивнее. 4. Измерение оптической плотности окрашенных антрахинолятов с помощью фотоэлектроколориметра (ФЭК) при длине волны 540 нм (зеленый светофильтр).

Содержание антраценпроизводных в сырье (%) рассчитывают по калибровочному графику, построенному по кобальта хлориду (CoCl2 ·6H2O), в пересчете на истизин. Фотоэлектроколориметрический метод рекомендован ГФ XIII для определения содержания антраценпроизводных в сырье крушины, ревеня, марены красильной.

2. Спектрофотометрический метод. Этим методом определяют содержание антраценпроизводных в листьях сенны. Имеются особенности из-за структуры действующих веществ: - экстракцию сеннозидов проводят водой при нагревании; - водное извлечение очищают от смолистых веществ; - окисление восстановленных форм проводят с помощью железа окисного хлорида (FeCl3); - гидролиз гликозидов антрахинонов проводят 50 % раствором кислоты серной; - оптическую плотность окрашенных антрахинолятов измеряют с помощью спектрофотометра при длине волны 523 нм; - содержание суммы антраценпроизводных в пересчете на хризофанол вычисляют по калибровочному графику, построенному по кобальта хлориду.