44. Гемоглобин: структура, функции, количественные и качественные методы определения.

В эритроцитах находится вещество, окрашенное в красный цвет – гемоглобин. Гемоглобин является дыхательным ферментом эритроцитов и составляет до 90 % их сухой массы. Гемоглобин – сложный белок, состоящий из собственно белковой части (глобина) и небелковой части – простетической группы (гема), содержащей железо.

Важнейшая функция гемоглобина – связывание, перенос и высвобождение кислорода. Кроме этого, гемоглобин является главным внутриклеточным буфером, поддерживающим оптимальное для метаболизма рН. Количество гемоглобина в крови, или его концентрация, у животных оно различно и колеблется от 80 г/л до 170 г/л.

Качественные и количественные методы определения гемоглобина в крови используются для оценки его уровня и состояния организма.

1. Качественные методы

Цель — выявить наличие гемоглобина в крови или определить его качество.

- Цветовая реакция (на глаз)

Основной метод в лабораторной практике — основан на окраске крови или срезов кровяных мазков. Позволяет визуально определить наличие гемоглобина и его изменение при патологиях (например, анемии или гемолитических состояниях).

- Микроскопия мазка крови

Позволяет оценить морфологические свойства эритроцитов и наличие гемоглобина внутри них. Используется для диагностики гемоглобиносных заболеваний.

- Фиксированные реакции и окраски

2. Количественные методы

Цель — точное определение концентрации гемоглобина в крови.

- Гемоглобинометрия (автоматическая)

Современные автоматические анализаторы используют фотометрические методы для определения концентрации гемоглобина. Они обеспечивают высокую точность и скорость.

- Метод окрашивания по Циль-Нильсону

В основе — окрашивание крови специальными реагентами, после чего измеряется оптическая плотность. Обычно используется в лабораториях или портативных приборах.

- Метод Лебериха (оксихромовая методика)

В крови гемоглобин реагирует с окисляющими агентами, образуя оксихромовые комплексы, которые измеряются фотометрически.

- Титриметрические методы

В некоторых случаях применяются для определения содержания гемоглобина путем титрования.

- Метод гемоглобинометра по Хеда

45. Лейкоциты: классификация, функции и методы подсчета. Лейкоцитарная формула и ее выведение.

Лейкоциты, или белые кровяные клетки, отвечают в организме за иммунитет. Их общее количество в 1 л в норме составляет 4-9*103. Они крупнее эритроцитов и имеют ядро. Лейкоциты могут изменять свою форму, многие из них способны переходить из просвета кровеносных сосудов в ткани.

Лейкоциты делят на две группы:

1. зернистые (гранулоциты) — нейтрофилы, эозинофилы, базофилы.

2. незернистые (агранулоциты) – моноциты, лимфоциты.

Функции лейкоцитов:

1. удаление патогенных агентов и мёртвых клеток;

2. стимуляция процессов регенерации тканей;

3. формирование иммунной памяти.

Лейкоцитарная формула.

Вывод лейкоформулы.

Лейкоцитарная формула — это процентное соотношение различных видов лейкоцитов в сыворотке крови. К основным разновидностям лейкоцитов относятся: нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы, базофилы.

Вывод лейкоцитарной формулы включает в себя определение относительного количества (%) каждого из видов лейкоцитов с подсчётом лейкоцитов на 100 клеток. Для подсчёта используют, например, метод Филиппченко или Шиллинга.

Физиология лейкоцитов заключается в их защитной и иммунной функции. Лейкоциты защищают организм человека от опасных микроорганизмов, одна из их главных задач — разрушение инородных частиц.

Исследование лейкоцитарной формулы важно в диагностике гематологических, инфекционных, воспалительных заболеваний, а также для оценки тяжести состояния и эффективности проводимой терапии.

Некоторые показатели лейкоцитарной формулы здорового человека:

• нейтрофилы: юные — 0–1%, палочкоядерные — 1–5%, сегментоядерные — 40–70%;

• базофилы — 0–1%;

• эозинофилы — 1–5%;

• лимфоциты — 20–35%;

• моноциты — 3–8% от общего количества лейкоцитов